风疹病毒是常见的上呼吸道感染病原体，也是常见的胎儿致畸的主要病原之一。风疹病毒主要侵犯上呼吸道粘膜，引起上呼吸道炎症，在患者鼻咽部分泌物中含大量病毒，出诊前后传染性最强。继之可侵入淋巴结发展为病毒血证引起全身感染，严重的并发症风疹后脑炎虽较罕见，但可引起死亡。风疹病毒感染最严重的问题是孕妇感染可导致对婴儿的先天性损害，尤其前3个月感染RV，可通过胎盘感染胎儿，导致孕妇流产、死胎，或新生儿一系列的器官畸形等先天性风疹综合症。 目前，风疹病毒实验室诊断主要采用酶联免疫吸附测定实验检测血清中特异性风疹病毒免疫球蛋白M。但是，特异性风疹病毒IgM 至少在病情发作5天才能检测得到。而且，风湿因子、细小病毒感染，或一些其他病毒因子，如EB病毒和麻疹病毒的干扰，可导致假阳性结果。近年来出现的实时荧光定量RT-PCR，在PCR 反应过程中实时地对病毒RNA进行敏感、快速、特异地定量检测。同时实时荧光定量PCR融会了PCR的高灵敏性、DNA杂交的高特异性以及光谱技术的高精确定量等优点，直接探测PCR过程中荧光信号的变化以获得定量结果，整个PCR检测过程不须开盖，采用一步法，防止了污染，降低了假阳性。 为了基础研究中RV RNA的定量及尽早检测临床标本中风疹病毒，避免出生缺陷，本研究建立了风疹病毒RNA Taqman实时荧光定量RT-PCR方法，建立了RV实时荧光定量RT-PCR 参考标准，并定量检测了2005年6月至2006年6月收集的102例风疹病人鼻咽拭子标本中风疹病毒RNA，评价其敏感度与特异度，为风疹病毒RNA的基础定量研究及风疹的临床诊断提供简便、准确、快捷的检测方法。 通过研究本课题得出以下结论：1、该方法的灵敏度高，可达2.75×102拷贝/反应。2、该方法重复性好，Ct值变异系数范围为1.25%～3.58%。3、该方法的特异度与敏感度均很高，分别为97.96%，91.18%。4、建立的特异性扩增子参考标准品的标准曲线相关系数为-0.9960，表示建立的风疹病毒参考标准品浓度的对数值与Ct值之间、具有良好的线性关系。建立的该方法为早期诊断风疹病毒提供了实验依据，广泛应用后显著地提高了社会效益与经济效益，因而该项研究具有非常广阔的应用前景。 本课题的创新点：1.建立了风疹病毒RNA TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法。2.建立了RV实时荧光定量RT-PCR 参考标准。 我们将在以下方面进行深入研究：扩大样本量，对本研究建立的该方法的临床应用前景进行更加确切的评价。

风疹病毒是常见的上呼吸道感染病原体，也是常见的胎儿致畸的主要病原之一。风疹病毒主要侵犯上呼吸道粘膜，引起上呼吸道炎症，在患者鼻咽部分泌物中含大量病毒，出诊前后传染性最强。继之可侵入淋巴结发展为病毒血证引起全身感染，严重的并发症风疹后脑炎虽较罕见，但可引起死亡。风疹病毒感染最严重的问题是孕妇感染可导致对婴儿的先天性损害，尤其前3个月感染RV，可通过胎盘感染胎儿，导致孕妇流产、死胎，或新生儿一系列的器官畸形等先天性风疹综合症。 目前，风疹病毒实验室诊断主要采用酶联免疫吸附测定实验检测血清中特异性风疹病毒免疫球蛋白M。但是，特异性风疹病毒IgM 至少在病情发作5天才能检测得到。而且，风湿因子、细小病毒感染，或一些其他病毒因子，如EB病毒和麻疹病毒的干扰，可导致假阳性结果。近年来出现的实时荧光定量RT-PCR，在PCR 反应过程中实时地对病毒RNA进行敏感、快速、特异地定量检测。同时实时荧光定量PCR融会了PCR的高灵敏性、DNA杂交的高特异性以及光谱技术的高精确定量等优点，直接探测PCR过程中荧光信号的变化以获得定量结果，整个PCR检测过程不须开盖，采用一步法，防止了污染，降低了假阳性。 为了基础研究中RV RNA的定量及尽早检测临床标本中风疹病毒，避免出生缺陷，本研究建立了风疹病毒RNA Taqman实时荧光定量RT-PCR方法，建立了RV实时荧光定量RT-PCR 参考标准，并定量检测了2005年6月至2006年6月收集的102例风疹病人鼻咽拭子标本中风疹病毒RNA，评价其敏感度与特异度，为风疹病毒RNA的基础定量研究及风疹的临床诊断提供简便、准确、快捷的检测方法。 通过研究本课题得出以下结论：1、该方法的灵敏度高，可达2.75×102拷贝/反应。2、该方法重复性好，Ct值变异系数范围为1.25%～3.58%。3、该方法的特异度与敏感度均很高，分别为97.96%，91.18%。4、建立的特异性扩增子参考标准品的标准曲线相关系数为-0.9960，表示建立的风疹病毒参考标准品浓度的对数值与Ct值之间、具有良好的线性关系。建立的该方法为早期诊断风疹病毒提供了实验依据，广泛应用后显著地提高了社会效益与经济效益，因而该项研究具有非常广阔的应用前景。 本课题的创新点：1.建立了风疹病毒RNA TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法。2.建立了RV实时荧光定量RT-PCR 参考标准。 我们将在以下方面进行深入研究：扩大样本量，对本研究建立的该方法的临床应用前景进行更加确切的评价。