中枢神经系统轴索损伤为什么难以修复，至今尚无定论，但近年的实验研究在这方面有所突破。目前已发现中枢神经系统神经纤维鞘存在两种神经轴索生长抑制物质，分子量分别为35 000和250 000Dalton并被命名为神经轴索生长抑制物NI- 35和NI-250。Maio S等人在1999年在Nature发表文章，利用大鼠cDNA序列克隆出NI-35蛋白，实验结果表明NI-35是由少突胶质细胞分泌的，有力地抑制了轴突的生长。针对髓磷脂NI-35蛋白和少突胶质细胞的抗体，可以使得背根神经节的轴突长如视神经鞘，说明了这种新策略可以提高中枢神经系统的再生和可塑性。2000年1月Tadzia GrandPré等人在Nature发表文章，他们的试验说明，针对NI35 和 NI250的NI抗体，可以在一定程度上使得脊髓外伤的神经轴突再生和功能恢复。而且进一步表明NI35蛋白表达与少突胶质细胞，在Schwann细胞不表达，试验结果支持了这种分子在成年中枢神经系统的再生的贡献。 　　利用基因工程技术制备具有抑制NI-35作用的IN-1重组单链抗体（IN-1-scFv）成为目前损伤后神经再生和功能恢复的试验研究的热点问题之一。IN-1抗体为鼠源性抗体，具有较强的免疫原性。同时此抗体的分子量过大，难以穿透毛细血管，限制了其临床应用，为此，采用基因工程技术将鼠源性抗体进行改造，制备新型抗体成为近年来抗体研究的热点。单链抗体是目前应用最为广泛的重组抗体，它是由抗体分子中构成抗原结合部的重链可变区和轻链可变区借助一联结短肽而成，由于只保留了可变区序列，免疫原性大为降低，同时因为没有Fc段，不能与非靶细胞的Fc受体结合，更有利于集中到靶部位。另外，完整抗体在构建为单链抗体后， 分子量通常只有原分子量的1/5或1/6，较小的分子量使其在神经组织中的分布指数较完整抗体明显升高，有利于应用。 　　本试验的研究目的是:将抗神经生长抑制因子（NI-35）抗体IN-1的重链和轻链可变区基因进行重组，构建了单链抗体IN-1-scFV，并在大肠杆菌中进行了有效表达。在证实了IN-1-scFV居于满意的免疫学活性后，将其用于DAI动物的模型上，以进一步检测此单抗的生物活性和治疗效果。 　　本课题还得到中国医科大学第一附属医院科研科、神经外科教研室的鼎力相助和中国医科大学分子生物学教研室，遗传学教研室，药理学教研室和实验动物部的技术支持。 　　本研究结果对于推动国内外对于弥漫性轴索损伤后，神经再生的免疫分子机制的研究和神经损伤后神经功能恢复的意义重大。促进颅脑外伤患者的神经功能恢复，解除伤患痛苦，缓解家庭及社会负担具有重要意义。

　　中枢神经系统轴索损伤为什么难以修复，至今尚无定论，但近年的实验研究在这方面有所突破。目前已发现中枢神经系统神经纤维鞘存在两种神经轴索生长抑制物质，分子量分别为35 000和250 000Dalton并被命名为神经轴索生长抑制物NI- 35和NI-250。Maio S等人在1999年在Nature发表文章，利用大鼠cDNA序列克隆出NI-35蛋白，实验结果表明NI-35是由少突胶质细胞分泌的，有力地抑制了轴突的生长。针对髓磷脂NI-35蛋白和少突胶质细胞的抗体，可以使得背根神经节的轴突长如视神经鞘，说明了这种新策略可以提高中枢神经系统的再生和可塑性。2000年1月Tadzia GrandPré等人在Nature发表文章，他们的试验说明，针对NI35 和 NI250的NI抗体，可以在一定程度上使得脊髓外伤的神经轴突再生和功能恢复。而且进一步表明NI35蛋白表达与少突胶质细胞，在Schwann细胞不表达，试验结果支持了这种分子在成年中枢神经系统的再生的贡献。 　　利用基因工程技术制备具有抑制NI-35作用的IN-1重组单链抗体（IN-1-scFv）成为目前损伤后神经再生和功能恢复的试验研究的热点问题之一。IN-1抗体为鼠源性抗体，具有较强的免疫原性。同时此抗体的分子量过大，难以穿透毛细血管，限制了其临床应用，为此，采用基因工程技术将鼠源性抗体进行改造，制备新型抗体成为近年来抗体研究的热点。单链抗体是目前应用最为广泛的重组抗体，它是由抗体分子中构成抗原结合部的重链可变区和轻链可变区借助一联结短肽而成，由于只保留了可变区序列，免疫原性大为降低，同时因为没有Fc段，不能与非靶细胞的Fc受体结合，更有利于集中到靶部位。另外，完整抗体在构建为单链抗体后， 分子量通常只有原分子量的1/5或1/6，较小的分子量使其在神经组织中的分布指数较完整抗体明显升高，有利于应用。 　　本试验的研究目的是:将抗神经生长抑制因子（NI-35）抗体IN-1的重链和轻链可变区基因进行重组，构建了单链抗体IN-1-scFV，并在大肠杆菌中进行了有效表达。在证实了IN-1-scFV居于满意的免疫学活性后，将其用于DAI动物的模型上，以进一步检测此单抗的生物活性和治疗效果。 　　本课题还得到中国医科大学第一附属医院科研科、神经外科教研室的鼎力相助和中国医科大学分子生物学教研室，遗传学教研室，药理学教研室和实验动物部的技术支持。 　　本研究结果对于推动国内外对于弥漫性轴索损伤后，神经再生的免疫分子机制的研究和神经损伤后神经功能恢复的意义重大。促进颅脑外伤患者的神经功能恢复，解除伤患痛苦，缓解家庭及社会负担具有重要意义。