虫媒病是一类重要的传染病。目前我国法定的传染病有36种，其中鼠疫、肾综合征出血热、疟疾、登革热与登革出血热等13种疾病为虫媒病。随着国际贸易和旅游业的发展，病媒生物及其携带的病原体可借助交通工具、集装箱、货物等在国际间传播。使原本局限于一定地域内的虫媒病突破国境或自然地理的界限，在全球范围内广泛传播与流行，对输入国的卫生安全特别是口岸地区的卫生安全造成极大的威胁。 我国中长期科技发展规划已将外来生物入侵、疫情疫病研究列入国家安全研究的一部分。加强对病媒生物携带病原体的检测是防制虫媒病病原体通过国境口岸输入的基础和前提，也是国境口岸检疫执法和疾病监测的迫切需要。本研究适应国境口岸卫生检疫工作的实际需要，考虑卫生检疫技术力量的现状，研制了系列化、集成式、“傻瓜型”的核酸检测试剂盒。使用者只需将处理后的媒介样品加入反应管中，即可进行扩增反应。该试剂盒不仅简便、实用，而且便于长期保存和常温运输。 方法：本试剂盒将检测的6种病原体（登革病毒（Ⅱ型）、汉坦病毒、鼠疫耶尔森菌、莫氏立克次体、Q热立克次体、恙虫病东方体）的相关引物、酶、dNTP、缓冲液等多种试剂分别按比例优化整合到核酸扩增反应管中，并进行真空干燥处理。使用时将媒介样品进行前处理（提取RNA或DNA），按检测对象的不同加入到相应的PCR反应管中，在PCR扩增仪上进行扩增。 结果：对上述6种病原体检测试剂盒进行敏感性、特异性、重复性以及稳定性试验，试验结果表明：试剂盒检测核酸的下限依次为10pg、10pg、100 pg、100pg、10pg和10pg，具有较高的敏感性；试剂盒与其检测对象的近缘种之间无交叉反应，具有较好的特异性。试剂盒有良好的重复性；将检测试剂盒在常温、4℃和-20℃条件下分别保存7天、30天和1年后进行检测，试剂盒对相应样品的检测结果没有明显的变化，具有良好的稳定性。 结论：本研究研制的登革病毒（Ⅱ型）、汉坦病毒、鼠疫耶尔森菌、莫氏立克次体、Q热立克次体及恙虫病东方体等6种虫媒病原体集成式核酸检测试剂盒，明显缩短检测周期、简化工作程序、减轻工作量、降低成本、方便用户使用，其推广使用将为卫生检疫工作起到很好的技术支持作用。 应用前景： （1）本研究研制的核酸检测试剂盒，明显缩短检测周期、简化工作程序、减轻工作量、降低成本、方便用户使用，其推广使用将为卫生检疫工作起到很好的技术支持作用。 （2）本试剂盒可与现场检测技术配合使用，可对现场检测结果进行复核或完成现场无法进行的检测项目。 （3）对于那些无法自主完成核酸检测工作的单位，此试剂盒的研制成功将填补了他们在核酸检测方面的空白。

虫媒病是一类重要的传染病。目前我国法定的传染病有36种，其中鼠疫、肾综合征出血热、疟疾、登革热与登革出血热等13种疾病为虫媒病。随着国际贸易和旅游业的发展，病媒生物及其携带的病原体可借助交通工具、集装箱、货物等在国际间传播。使原本局限于一定地域内的虫媒病突破国境或自然地理的界限，在全球范围内广泛传播与流行，对输入国的卫生安全特别是口岸地区的卫生安全造成极大的威胁。 我国中长期科技发展规划已将外来生物入侵、疫情疫病研究列入国家安全研究的一部分。加强对病媒生物携带病原体的检测是防制虫媒病病原体通过国境口岸输入的基础和前提，也是国境口岸检疫执法和疾病监测的迫切需要。本研究适应国境口岸卫生检疫工作的实际需要，考虑卫生检疫技术力量的现状，研制了系列化、集成式、“傻瓜型”的核酸检测试剂盒。使用者只需将处理后的媒介样品加入反应管中，即可进行扩增反应。该试剂盒不仅简便、实用，而且便于长期保存和常温运输。 方法：本试剂盒将检测的6种病原体（登革病毒（Ⅱ型）、汉坦病毒、鼠疫耶尔森菌、莫氏立克次体、Q热立克次体、恙虫病东方体）的相关引物、酶、dNTP、缓冲液等多种试剂分别按比例优化整合到核酸扩增反应管中，并进行真空干燥处理。使用时将媒介样品进行前处理（提取RNA或DNA），按检测对象的不同加入到相应的PCR反应管中，在PCR扩增仪上进行扩增。 结果：对上述6种病原体检测试剂盒进行敏感性、特异性、重复性以及稳定性试验，试验结果表明：试剂盒检测核酸的下限依次为10pg、10pg、100 pg、100pg、10pg和10pg，具有较高的敏感性；试剂盒与其检测对象的近缘种之间无交叉反应，具有较好的特异性。试剂盒有良好的重复性；将检测试剂盒在常温、4℃和-20℃条件下分别保存7天、30天和1年后进行检测，试剂盒对相应样品的检测结果没有明显的变化，具有良好的稳定性。 结论：本研究研制的登革病毒（Ⅱ型）、汉坦病毒、鼠疫耶尔森菌、莫氏立克次体、Q热立克次体及恙虫病东方体等6种虫媒病原体集成式核酸检测试剂盒，明显缩短检测周期、简化工作程序、减轻工作量、降低成本、方便用户使用，其推广使用将为卫生检疫工作起到很好的技术支持作用。 应用前景： （1）本研究研制的核酸检测试剂盒，明显缩短检测周期、简化工作程序、减轻工作量、降低成本、方便用户使用，其推广使用将为卫生检疫工作起到很好的技术支持作用。 （2）本试剂盒可与现场检测技术配合使用，可对现场检测结果进行复核或完成现场无法进行的检测项目。 （3）对于那些无法自主完成核酸检测工作的单位，此试剂盒的研制成功将填补了他们在核酸检测方面的空白。