课题来源：本课题为甘肃省科学事业费资助项目，项目编号：0709TCYA063。 　　应用领域和技术原理：应用于临床基础与应用，技术原理为生物免疫治疗学。 　　性能指标：课题计划在白血病源性树突状细胞培养方法中以失活的流感疫苗代替经典的细胞因子组合(GM-CSF+IL-4+TNF-a)中的TNF-a作为成熟佐剂，比较两种培养方法得到的DC在形态、产率、免疫表型(CD83、CD1a、CD80、HLA-DR等)及细胞因子(IL-12)分泌水平上的差异，进一步比较其诱导的针对自体白血病细胞的CTL效应，研究流感疫苗对白血病DC功能的影响。运用流式细胞术及酶联免疫吸附方法分别检测流感疫苗修饰的白血病细胞来源的树突状细胞表面分子、分泌细胞因子水平，将所得DC与其同源T细胞混合，利用MTT法检测CTL杀伤活性。研究结果显示：与经典促成熟剂TNF-a相比，流感疫苗在短期内(48小时)即可使来源于髓系白血病的树突状细胞出现特征性成熟免疫表型明显升高，细胞因子IL-12分泌增加，证明流感疫苗可以促进白血病的树突状细胞的成熟，且全病毒流感疫苗高于裂解病毒流感疫苗。进一步以所得DC诱导自体淋巴细胞，可以引起较强的针对白血病细胞的CTL效应。 　　与国内外同类技术比较：近年来，树突状细胞(DC)被广泛试用于肿瘤尤其是白血病的生物免疫治疗，用来清除MRD防止复发，并已显示出一定的临床效果。白血病细胞来源的DC具有HLA限制性和白血病特异性等优势，但其成熟障碍，丧失了对恶性克隆的清除作用。所以，应用有效佐剂对DC进行成熟调控从而增强其抗肿瘤效应是目前需要解决的重要问题之一。为解决这一难题，人们已经尝试使用各种因子诱导DC成熟。但应用不同成熟佐剂的结果不尽相同，而且由于安全性等问题在临床应用中受限。 　　在流感病毒与机体免疫关系的研究中发现，流感病毒的组成成份具有影响细胞免疫及调节DC成熟的能力，已证实重组流感病毒体在诱导产生特异性针对黑色素瘤的CTL效应中具有强佐剂作用，流感多肽相关临床试验已取得可喜结果。流感疫苗含有流感病毒的抗原成份，近年来国外对流感疫苗的研究主要集中在其对细胞免疫尤其是对DC和CTL影响方面，而国内尚未见相关报道。有研究证明完整的灭活流感疫苗可刺激正常人血液来源的DC成熟，并证实流感疫苗所带有的蛋白足以产生CTL效应。 　　本课题应用流感疫苗作为白血病来源的树突状细胞疫苗的免疫佐剂，通过研究证明流感疫苗对白血病来源的树突状细胞疫苗具有促成熟作用。从而，流感疫苗作为一种临床安全制剂，将为DC疫苗的研究及应用提供一条全新有效、简便可行的新途径，具有重要的临床实际意义。 　　成果的创造性、先进性：本课题应用流感疫苗促进白血病细胞来源的树突状细胞的成熟，首次将流感疫苗这一技术成熟且已广泛应用于临床的生物制剂应用于白血病树突状细胞疫苗，为临床提供了增强肿瘤疫苗功能的新手段和新思路。流感疫苗对白血病来源的树突状细胞的影响国内外未见相关报道。 　　作用意义：本课题旨在应用流感疫苗作为白血病来源的树突状细疫苗的免疫佐剂，通过研究证明流感疫苗对白血病来源的树突状细胞疫苗具有促成熟作用。流感疫苗应用于临床的安全性已被证实，将其作为诱导DC的成熟佐剂，可能为白血病DC疫苗的研究及临床应用提供一条全新有效、简便可行的途径，同时，对白血病患者预防感染、减少住院天数，降低住院费用有重要意义，能够获得较高的社会效益并具有广阔的临床应用前景，应用DC瘤苗免疫治疗各种肿瘤及白血病必将成为一种崭新的肿瘤治疗方法，有着十分诱人的发展前景，社会意义、经济意义不可估量。人类战胜白血病等肿瘤将成为可能。 　　流感疫苗应用于临床的安全性已被证实，将其作为诱导DC的成熟佐剂，可能为白血病DC疫苗的研究及临床应用提供一条全新有效、简便可行的途径，同时，对白血病患者预防感染、减少住院天数，降低住院费用有重要意义，能够获得较高的社会效益并具有广阔的临床应用前景，树突状细胞(DC)作为抗原呈递细胞在诱导细胞毒T淋巴细胞中起非常重要的作用，应用DC瘤苗免疫治疗各种肿瘤及白血病必将成为一种崭新的肿瘤治疗方法，有着十分诱人的发展前景、社会意义、经济意义。 　　目前医院已购置价值200万元相关医疗设备，两人次赴国外超一流机构专项学习，进一步开展相关应用实验研究，为临床探讨治疗各种肿瘤及白血病提供新的理论依据，开辟了一条新的治疗途径。希望科技、卫生及学校有关部门予以政策支持。

　　课题来源：本课题为甘肃省科学事业费资助项目，项目编号：0709TCYA063。 　　应用领域和技术原理：应用于临床基础与应用，技术原理为生物免疫治疗学。 　　性能指标：课题计划在白血病源性树突状细胞培养方法中以失活的流感疫苗代替经典的细胞因子组合(GM-CSF+IL-4+TNF-a)中的TNF-a作为成熟佐剂，比较两种培养方法得到的DC在形态、产率、免疫表型(CD83、CD1a、CD80、HLA-DR等)及细胞因子(IL-12)分泌水平上的差异，进一步比较其诱导的针对自体白血病细胞的CTL效应，研究流感疫苗对白血病DC功能的影响。运用流式细胞术及酶联免疫吸附方法分别检测流感疫苗修饰的白血病细胞来源的树突状细胞表面分子、分泌细胞因子水平，将所得DC与其同源T细胞混合，利用MTT法检测CTL杀伤活性。研究结果显示：与经典促成熟剂TNF-a相比，流感疫苗在短期内(48小时)即可使来源于髓系白血病的树突状细胞出现特征性成熟免疫表型明显升高，细胞因子IL-12分泌增加，证明流感疫苗可以促进白血病的树突状细胞的成熟，且全病毒流感疫苗高于裂解病毒流感疫苗。进一步以所得DC诱导自体淋巴细胞，可以引起较强的针对白血病细胞的CTL效应。 　　与国内外同类技术比较：近年来，树突状细胞(DC)被广泛试用于肿瘤尤其是白血病的生物免疫治疗，用来清除MRD防止复发，并已显示出一定的临床效果。白血病细胞来源的DC具有HLA限制性和白血病特异性等优势，但其成熟障碍，丧失了对恶性克隆的清除作用。所以，应用有效佐剂对DC进行成熟调控从而增强其抗肿瘤效应是目前需要解决的重要问题之一。为解决这一难题，人们已经尝试使用各种因子诱导DC成熟。但应用不同成熟佐剂的结果不尽相同，而且由于安全性等问题在临床应用中受限。 　　在流感病毒与机体免疫关系的研究中发现，流感病毒的组成成份具有影响细胞免疫及调节DC成熟的能力，已证实重组流感病毒体在诱导产生特异性针对黑色素瘤的CTL效应中具有强佐剂作用，流感多肽相关临床试验已取得可喜结果。流感疫苗含有流感病毒的抗原成份，近年来国外对流感疫苗的研究主要集中在其对细胞免疫尤其是对DC和CTL影响方面，而国内尚未见相关报道。有研究证明完整的灭活流感疫苗可刺激正常人血液来源的DC成熟，并证实流感疫苗所带有的蛋白足以产生CTL效应。 　　本课题应用流感疫苗作为白血病来源的树突状细胞疫苗的免疫佐剂，通过研究证明流感疫苗对白血病来源的树突状细胞疫苗具有促成熟作用。从而，流感疫苗作为一种临床安全制剂，将为DC疫苗的研究及应用提供一条全新有效、简便可行的新途径，具有重要的临床实际意义。 　　成果的创造性、先进性：本课题应用流感疫苗促进白血病细胞来源的树突状细胞的成熟，首次将流感疫苗这一技术成熟且已广泛应用于临床的生物制剂应用于白血病树突状细胞疫苗，为临床提供了增强肿瘤疫苗功能的新手段和新思路。流感疫苗对白血病来源的树突状细胞的影响国内外未见相关报道。 　　作用意义：本课题旨在应用流感疫苗作为白血病来源的树突状细疫苗的免疫佐剂，通过研究证明流感疫苗对白血病来源的树突状细胞疫苗具有促成熟作用。流感疫苗应用于临床的安全性已被证实，将其作为诱导DC的成熟佐剂，可能为白血病DC疫苗的研究及临床应用提供一条全新有效、简便可行的途径，同时，对白血病患者预防感染、减少住院天数，降低住院费用有重要意义，能够获得较高的社会效益并具有广阔的临床应用前景，应用DC瘤苗免疫治疗各种肿瘤及白血病必将成为一种崭新的肿瘤治疗方法，有着十分诱人的发展前景，社会意义、经济意义不可估量。人类战胜白血病等肿瘤将成为可能。 　　流感疫苗应用于临床的安全性已被证实，将其作为诱导DC的成熟佐剂，可能为白血病DC疫苗的研究及临床应用提供一条全新有效、简便可行的途径，同时，对白血病患者预防感染、减少住院天数，降低住院费用有重要意义，能够获得较高的社会效益并具有广阔的临床应用前景，树突状细胞(DC)作为抗原呈递细胞在诱导细胞毒T淋巴细胞中起非常重要的作用，应用DC瘤苗免疫治疗各种肿瘤及白血病必将成为一种崭新的肿瘤治疗方法，有着十分诱人的发展前景、社会意义、经济意义。 　　目前医院已购置价值200万元相关医疗设备，两人次赴国外超一流机构专项学习，进一步开展相关应用实验研究，为临床探讨治疗各种肿瘤及白血病提供新的理论依据，开辟了一条新的治疗途径。希望科技、卫生及学校有关部门予以政策支持。