目前公认糖尿病已经成为世界范围内的公共健康问题，其并发症之一－糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是导致终末期肾病（ESRD）的主要病因，且预后较差，已经严重威胁广大人民的健康与生命，积极寻找有效治疗糖尿病肾病的药物并探讨其机制具有很重要的临床意义。益肾胶囊为纯中药医院内制剂（批号97并卫制剂加字f01-2005），由黄芪15g、当归10g、芡实15g、泽泻10g、红景天5g等组成。该药己通过急慢性毒性实验证实其无毒副作用，且对肾脏免疫病理损伤有改善作用。该课题为自选项目，运用电镜、病理、免疫荧光、生化检测及分子生物学方法，从不同角度探讨了益肾胶囊修复糖尿病肾病足细胞损伤的分子机制。为益肾胶囊治疗DN提供理论依据和实验基础。 　　该项目探讨了糖尿病肾病大鼠模型的建立、模型肾组织足细胞形态学的改变以及益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠尿液及肾组织足突细胞相关分子表达的影响。 　　结果显示： 　　（1）成功建立了糖尿病肾病模型，为避免外源性胰岛素造成的血糖大幅度波动和其他副作用，该研究采用比较低剂量的STZ，且对所有大鼠的所有时间段均监控血糖。实验中由于切除了单侧肾脏，因此加快了糖尿病肾病的肾脏损害过程。更重要的是，由于没有胰岛素治疗，大鼠持续地暴露于中度的高血糖水平，因而对肾脏的损害也加速了。本实验成功的建立了糖尿病肾病模型，为继续进行药物干预治疗奠定了良好的实验基础。 　　（2）注射STZ的第4周末，大鼠24h尿蛋白定量增加，且从左肾和体重的比率可以推测肾脏有增生肥大。但此时肾功能与对照组大鼠比较无明显差异。至24周时模型组大鼠的Scr、BUN较同期对照组均显著升高，Ccr明显下降。模型大鼠有肾小球系膜基质增多，系膜区增宽，基底膜皱曲等肾小球硬化表现，肾小管上皮细胞胞浆内可见大量糖原空泡，模型组肾小球硬化指数及肾小管损伤指数均显著高于同期对照组，且随着病变时间的延长，病理改变也加重。电镜下模型大鼠肾小球基底膜显著增宽，足细胞排列紊乱，数目减少。 　　（3）结果证实益肾胶囊在糖尿病肾病模型中可以降低24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐，改善部分肾功能，进而改善肾组织免疫病理损伤；电镜下经益肾胶囊治疗后，肾小球基底膜变清晰，未见明显增宽，足细胞较模型组大鼠明显增加。荧光显微镜下，益肾胶囊治疗组，大鼠尿液足细胞排泄明显减少，大鼠肾小球 podocalyxin蛋白表达较模型组显著增加；该实验进一步证实了益肾胶囊在基因水平上调了足细胞相关分子nephrin、podocin、WT-1、а-actinin-4在DN大鼠的表达水平。 　　创新性：以足细胞为研究对象，表明了益肾胶囊可以上调nephrin，podocin，WT-1，α-actinin-4以及podocalyxin分子在DN大鼠肾组织的表达水平，首次揭示了益肾胶囊修复糖尿病肾病足细胞的分子机制，为临床治疗糖尿病肾病提供了实验依据。

　　目前公认糖尿病已经成为世界范围内的公共健康问题，其并发症之一－糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是导致终末期肾病（ESRD）的主要病因，且预后较差，已经严重威胁广大人民的健康与生命，积极寻找有效治疗糖尿病肾病的药物并探讨其机制具有很重要的临床意义。益肾胶囊为纯中药医院内制剂（批号97并卫制剂加字f01-2005），由黄芪15g、当归10g、芡实15g、泽泻10g、红景天5g等组成。该药己通过急慢性毒性实验证实其无毒副作用，且对肾脏免疫病理损伤有改善作用。该课题为自选项目，运用电镜、病理、免疫荧光、生化检测及分子生物学方法，从不同角度探讨了益肾胶囊修复糖尿病肾病足细胞损伤的分子机制。为益肾胶囊治疗DN提供理论依据和实验基础。 　　该项目探讨了糖尿病肾病大鼠模型的建立、模型肾组织足细胞形态学的改变以及益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠尿液及肾组织足突细胞相关分子表达的影响。 　　结果显示： 　　（1）成功建立了糖尿病肾病模型，为避免外源性胰岛素造成的血糖大幅度波动和其他副作用，该研究采用比较低剂量的STZ，且对所有大鼠的所有时间段均监控血糖。实验中由于切除了单侧肾脏，因此加快了糖尿病肾病的肾脏损害过程。更重要的是，由于没有胰岛素治疗，大鼠持续地暴露于中度的高血糖水平，因而对肾脏的损害也加速了。本实验成功的建立了糖尿病肾病模型，为继续进行药物干预治疗奠定了良好的实验基础。 　　（2）注射STZ的第4周末，大鼠24h尿蛋白定量增加，且从左肾和体重的比率可以推测肾脏有增生肥大。但此时肾功能与对照组大鼠比较无明显差异。至24周时模型组大鼠的Scr、BUN较同期对照组均显著升高，Ccr明显下降。模型大鼠有肾小球系膜基质增多，系膜区增宽，基底膜皱曲等肾小球硬化表现，肾小管上皮细胞胞浆内可见大量糖原空泡，模型组肾小球硬化指数及肾小管损伤指数均显著高于同期对照组，且随着病变时间的延长，病理改变也加重。电镜下模型大鼠肾小球基底膜显著增宽，足细胞排列紊乱，数目减少。 　　（3）结果证实益肾胶囊在糖尿病肾病模型中可以降低24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐，改善部分肾功能，进而改善肾组织免疫病理损伤；电镜下经益肾胶囊治疗后，肾小球基底膜变清晰，未见明显增宽，足细胞较模型组大鼠明显增加。荧光显微镜下，益肾胶囊治疗组，大鼠尿液足细胞排泄明显减少，大鼠肾小球 podocalyxin蛋白表达较模型组显著增加；该实验进一步证实了益肾胶囊在基因水平上调了足细胞相关分子nephrin、podocin、WT-1、а-actinin-4在DN大鼠的表达水平。 　　创新性：以足细胞为研究对象，表明了益肾胶囊可以上调nephrin，podocin，WT-1，α-actinin-4以及podocalyxin分子在DN大鼠肾组织的表达水平，首次揭示了益肾胶囊修复糖尿病肾病足细胞的分子机制，为临床治疗糖尿病肾病提供了实验依据。