1．任务来源： 　　本项目是山西省留学回国人员科研资助基金项目。 　　2、性能指标： 　　（1）同型半胱氨酸、叶酸、维生素B12的检测：应用美国雅培公司提供的全自动分析仪，采用荧光偏振免疫分析法。 　　（2）动物模型的建立：高蛋氨酸饮食复制高同型半胱氨酸血症模型；切除双侧甲状腺腺体复制甲状腺功能减退模型；高脂饮食复制高脂血症模型，及胰岛素抵抗模型； 　　（3）透射电镜下观察血管内膜中膜及心肌的超微结构。 　　（4）在体左心功能：应用血流动力学方法，颈总动脉插管并连于生物信号分析仪，在体测定左心功能。 　　（5）胰岛素用放射免疫分析法测定，尿微量白蛋白用免疫散射比浊法测定，由美国LINCO公司提供试剂；一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）的测定采用化学比浊法，用美国Beckman公司的DU-70分光光度计检测吸光度，试剂盒由南京建成生物试剂公司提供；氧化低密度脂蛋白（oxLDL）采用酶联免疫吸附法（ELISA），试剂盒由南京建成生物试剂公司提供；C反应蛋白（CRP）采用免疫散射比浊法，所用仪器和试剂均为美国Beckman公司产品。 　　（6）基因组DNA采用美国GENTRA公司的DNA提取试剂盒提取；所有PCR反应试剂及限制性内切酶HinfⅠ均购自大连宝生物有限公司；采用聚合酶联反应-限制性片段长度多态性分析法（RELP-PCR）分析MTHFR基因多态性。 　　3、与国内外同类技术比较 　　采用动物实验和临床观察两部分，动物实验部分通过可靠方法复制高同型半胱氨酸血症、高脂血症、糖尿病模型、甲状腺功能减退模型及复合模型观察几种症、高脂血症、糖尿病模型、甲状腺功能减退模型及复合模型观察几种心血管系统疾病危险因素的协同作用及相关药物的干预作用，并进行了在体心功能检测及心脏血管的超微结果观察；临床观察部分收集符合要求的病例，检测血清指标采用聚合酶联反应-限制性片段长度多态性分析法（RELP-PCR）分析MTHFR基因多态性，分析风湿系统疾病与高Hcy血症的关系。 　　4、作用意义 　　高同型半胱氨酸（Hcy）血症是心血管系统疾病的一个独立危险因素，并且在内分泌及风湿系统疾病中同样存在。两者会协同加重对心血管系统的损害，在临床治疗中同时对原发病及高同型半胱氨酸血症进行干预，可能会收到更加明显的疗效。 　　5．该课题的创新之处：风湿系统疾病存在DNA低甲基化水平；MTHFR基因的突变，TT基因型是Hcy异常升高的易感基因；研究了高Hcy血症与心血管疾病传统危险因素之间的关系，并采用相关药物进行干预。 　　6、应用前景：本研究通过基础和临床部分的实验探明高Hcy血症与甲状腺功能减退、糖尿病、风湿系统疾病的关系，给予药物干预观察血Hcy水平的变化，探讨了影响Hcy代谢的关键酶如亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性为临床治疗提供理论依据。 　　本研究应用荧光偏振免疫分析技术、流式细胞仪检测及PCR技术，使同型半胱氨酸、叶酸等指标检测更为简便、准确、灵敏，适合各级医疗单位推广使用。

　　1．任务来源： 　　本项目是山西省留学回国人员科研资助基金项目。 　　2、性能指标： 　　（1）同型半胱氨酸、叶酸、维生素B12的检测：应用美国雅培公司提供的全自动分析仪，采用荧光偏振免疫分析法。 　　（2）动物模型的建立：高蛋氨酸饮食复制高同型半胱氨酸血症模型；切除双侧甲状腺腺体复制甲状腺功能减退模型；高脂饮食复制高脂血症模型，及胰岛素抵抗模型； 　　（3）透射电镜下观察血管内膜中膜及心肌的超微结构。 　　（4）在体左心功能：应用血流动力学方法，颈总动脉插管并连于生物信号分析仪，在体测定左心功能。 　　（5）胰岛素用放射免疫分析法测定，尿微量白蛋白用免疫散射比浊法测定，由美国LINCO公司提供试剂；一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）的测定采用化学比浊法，用美国Beckman公司的DU-70分光光度计检测吸光度，试剂盒由南京建成生物试剂公司提供；氧化低密度脂蛋白（oxLDL）采用酶联免疫吸附法（ELISA），试剂盒由南京建成生物试剂公司提供；C反应蛋白（CRP）采用免疫散射比浊法，所用仪器和试剂均为美国Beckman公司产品。 　　（6）基因组DNA采用美国GENTRA公司的DNA提取试剂盒提取；所有PCR反应试剂及限制性内切酶HinfⅠ均购自大连宝生物有限公司；采用聚合酶联反应-限制性片段长度多态性分析法（RELP-PCR）分析MTHFR基因多态性。 　　3、与国内外同类技术比较 　　采用动物实验和临床观察两部分，动物实验部分通过可靠方法复制高同型半胱氨酸血症、高脂血症、糖尿病模型、甲状腺功能减退模型及复合模型观察几种症、高脂血症、糖尿病模型、甲状腺功能减退模型及复合模型观察几种心血管系统疾病危险因素的协同作用及相关药物的干预作用，并进行了在体心功能检测及心脏血管的超微结果观察；临床观察部分收集符合要求的病例，检测血清指标采用聚合酶联反应-限制性片段长度多态性分析法（RELP-PCR）分析MTHFR基因多态性，分析风湿系统疾病与高Hcy血症的关系。 　　4、作用意义 　　高同型半胱氨酸（Hcy）血症是心血管系统疾病的一个独立危险因素，并且在内分泌及风湿系统疾病中同样存在。两者会协同加重对心血管系统的损害，在临床治疗中同时对原发病及高同型半胱氨酸血症进行干预，可能会收到更加明显的疗效。 　　5．该课题的创新之处：风湿系统疾病存在DNA低甲基化水平；MTHFR基因的突变，TT基因型是Hcy异常升高的易感基因；研究了高Hcy血症与心血管疾病传统危险因素之间的关系，并采用相关药物进行干预。 　　6、应用前景：本研究通过基础和临床部分的实验探明高Hcy血症与甲状腺功能减退、糖尿病、风湿系统疾病的关系，给予药物干预观察血Hcy水平的变化，探讨了影响Hcy代谢的关键酶如亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性为临床治疗提供理论依据。 　　本研究应用荧光偏振免疫分析技术、流式细胞仪检测及PCR技术，使同型半胱氨酸、叶酸等指标检测更为简便、准确、灵敏，适合各级医疗单位推广使用。