本研究为贵州省科委科技基金资助项目和自选项目。 胃肠内分泌学是近年来发展较快的胃肠学分支学科和边缘学科。 胰岛淀粉样多肽（IAPP），是由37个氨基酸组成的多肽，其结构和功能特点提示它是一种调节糖代谢的新激素。现已发现IAPP与胰岛素（Ins）共存于胰岛B细胞内。本课题组曾报道大鼠胚胎期、新生期和生后发育各时期胰腺、胃肠道IAPP-免疫反应（IR）细胞的分布及IAPP与Ins、生长抑素（SS）共存的情况。有学者注意到IAPP在胚胎期存在比较广泛，有可能起着生长因子的作用。本课题组也报道了IAPP在人胎胰腺、阑尾和气管的表达和定位。目前，有关IAPP在人胎胃肠道的表达及人胎不同发育时期IAPP-IR细胞的个体发生国内外尚未见报道。 血管活性肠肽（VIP）、生长抑素（SS）、胰多肽（PP）、P物质（SP）等均为已发现的脑肠肽。上述脑肠肽在人胎胃肠道的表达和定位尚有许多空白。 p16基因是1993年发现的新的抑癌基因，p16基因的失活可引起细胞异常增殖而导致肿瘤的发生，但关于p16蛋白在胎期细胞中的表达资料少见。 本课题采用免疫组织化学单染法、免疫组织化学邻片单染法、免疫组织化学双重染色和图像分析法，较系统地观察人胎胃肠道内IAPP、VIP、、PP、SS、和5-羟色胺（5-HT）、胃泌素（Gas）等胃肠激素在内分泌细胞的表达及定位以及p16在人胎儿胃粘膜中表达，系统研究了人胎不同胎龄时期IAPP^-、VIP^-、Gas^-、PP^-、SS^-、5-HT-IR细胞的个体发生并探讨IAPP与其它胃肠激素在细胞内共存的情况。 本课题获得了如下创新性结果： 1.IAPP在人胎胃肠道的定位研究 本研究应用免疫组织化学方法，首次报道人胎胃、十二指肠、结肠及直肠内分泌细胞内有IAPP的表达。IAPP-IR细胞的数量及分布随胎儿发育而变化。 （1）人胎11 周，胃黏膜中已有IAPP-IR 细胞，主要定位于胃底腺。14～20周，胃黏膜中IAPP-IR细胞数量逐渐增多，免疫反应显色也逐渐加深。经与HE染色的邻片比较，部分IAPP-IR细胞与壁细胞定位一致。 （2）胎期小肠内IAPP-IR细胞仅见于十二指肠。16周开始，在十二指肠绒毛上皮细胞间可见单个散在的IAPP-IR细胞；22～27周，其细胞数量则逐渐增多，主要分布于肠腺中。 （3）人胎结肠IAPP-IR细胞于18周出现，而直肠内IAPP-IR细胞于11周出现，IAPP-IR细胞在整个胎期始终分散存在，数量较少。用免疫组织化学邻片单染及双染法，观察到人胎结肠及直肠有的内分泌细胞中有IAPP与5-HT的共存，但二者出现的多少及免疫染色的强弱均有所不同。 IAPP的研究结果为拓宽IAPP 的研究提供了新的形态学资料。 2.首次观察到人胎直肠粘膜内存在VIP-IR细胞并证实人胎小肠及结肠粘膜内有VIP-IR细胞分布。小肠及直肠内VIP-IR细胞均于11周出现，结肠内VIP-IR细胞于18周出现，数量少，整个胎期细胞数量、形态及免疫染色强度均未见明显变化。 3.首次报道人胎早期结肠有G细胞存在。随胎龄增长，人胎结肠的G细胞逐渐减少，于26周后未见。胎儿小肠三段均有G细胞存在。 4.本研究证实PP、SS和5-HT在人胎小肠、结肠及直肠的内分泌细胞中已有分布，SP在人胎结肠及直肠内分泌细胞中有表达，邻片比较观察发现直肠内部分SP-IR 细胞与5-HT-IR 细胞定位一致。推测PP、SS、5-HT和SP在人胎肠道发育中具有一定的作用。 5.本实验还观察到P16蛋白在人胎儿胃黏膜中的表达，图像分析结果显示11～13周人胎儿胃黏膜腺上皮的p16蛋白平均灰度值最小，而阳性细胞数目最多；随着胎龄的增加，p16蛋白的平均灰度值逐渐增大，而阳性细胞的数目则逐渐减少；各胎龄组的阳性细胞数目及平均灰度值差异有显著性。 细胞内p16蛋白的高表达，提示p16蛋白在细胞的增殖分化中发挥抑制作用，以保证细胞正常的分裂分化。 本项目立题有据，方法先进，定位准确，结果可靠。 采取当今形态学较先进的免疫组织化学技术及图像分析技术对人胎胃肠道内分泌细胞内特定生物活性物质的表达及不同胎龄时期的变化情况进行研究。 本研究结果为充实胃肠激素的研究提供新资料，对研究有关疾病的发病机理提供新思路，尤其是人类胚胎发育是一个相当复杂的过程，IAPP和其他内分泌激素在胎儿胃肠道的发现，在胚胎学领域具有积极的意义。 本研究对胰岛淀粉样多肽这一新激素的表达变化进行了系统研究。研究结果为拓宽IAPP的研究提供了新的形态学资料；为证实IAPP在胃肠道具有调节作用提供了直接的依据；为进一步阐明IAPP的生理作用及神经内分泌免疫学这门新兴学科积累资料；并为临床探讨相关疾病的发病机理提供了新的探索途径。 本课题的研究论文多发表于本学科领域的权威期刊（解剖学报）及核心期刊（解剖学杂志），相关内容在中国解剖学会2000年、2004年学术年会、第六届及第七届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会和西南三省一市解剖学会2001年学术年会宣读和交流。“人胎儿小肠胰多肽及5-羟色胺免疫反应细胞的个体发生”获中国解剖学会第六届全国组织学胚胎学青年学术研讨会论文鼓励奖。本课题的论文已被国际权威检索系统和国内重要检索系统收录。 本成果的内容包括论文8篇，其中解剖学报（权威期刊）3篇，解剖学杂志（核心期刊）2篇，解剖科学进展1篇，徐州医学院学报2篇。论文摘要5篇，分别登载于解剖科学进展、解剖学杂志和四川解剖学杂志。

本研究为贵州省科委科技基金资助项目和自选项目。 胃肠内分泌学是近年来发展较快的胃肠学分支学科和边缘学科。 胰岛淀粉样多肽（IAPP），是由37个氨基酸组成的多肽，其结构和功能特点提示它是一种调节糖代谢的新激素。现已发现IAPP与胰岛素（Ins）共存于胰岛B细胞内。本课题组曾报道大鼠胚胎期、新生期和生后发育各时期胰腺、胃肠道IAPP-免疫反应（IR）细胞的分布及IAPP与Ins、生长抑素（SS）共存的情况。有学者注意到IAPP在胚胎期存在比较广泛，有可能起着生长因子的作用。本课题组也报道了IAPP在人胎胰腺、阑尾和气管的表达和定位。目前，有关IAPP在人胎胃肠道的表达及人胎不同发育时期IAPP-IR细胞的个体发生国内外尚未见报道。 血管活性肠肽（VIP）、生长抑素（SS）、胰多肽（PP）、P物质（SP）等均为已发现的脑肠肽。上述脑肠肽在人胎胃肠道的表达和定位尚有许多空白。 p16基因是1993年发现的新的抑癌基因，p16基因的失活可引起细胞异常增殖而导致肿瘤的发生，但关于p16蛋白在胎期细胞中的表达资料少见。 本课题采用免疫组织化学单染法、免疫组织化学邻片单染法、免疫组织化学双重染色和图像分析法，较系统地观察人胎胃肠道内IAPP、VIP、、PP、SS、和5-羟色胺（5-HT）、胃泌素（Gas）等胃肠激素在内分泌细胞的表达及定位以及p16在人胎儿胃粘膜中表达，系统研究了人胎不同胎龄时期IAPP^-、VIP^-、Gas^-、PP^-、SS^-、5-HT-IR细胞的个体发生并探讨IAPP与其它胃肠激素在细胞内共存的情况。 本课题获得了如下创新性结果： 1.IAPP在人胎胃肠道的定位研究 本研究应用免疫组织化学方法，首次报道人胎胃、十二指肠、结肠及直肠内分泌细胞内有IAPP的表达。IAPP-IR细胞的数量及分布随胎儿发育而变化。 （1）人胎11 周，胃黏膜中已有IAPP-IR 细胞，主要定位于胃底腺。14～20周，胃黏膜中IAPP-IR细胞数量逐渐增多，免疫反应显色也逐渐加深。经与HE染色的邻片比较，部分IAPP-IR细胞与壁细胞定位一致。 （2）胎期小肠内IAPP-IR细胞仅见于十二指肠。16周开始，在十二指肠绒毛上皮细胞间可见单个散在的IAPP-IR细胞；22～27周，其细胞数量则逐渐增多，主要分布于肠腺中。 （3）人胎结肠IAPP-IR细胞于18周出现，而直肠内IAPP-IR细胞于11周出现，IAPP-IR细胞在整个胎期始终分散存在，数量较少。用免疫组织化学邻片单染及双染法，观察到人胎结肠及直肠有的内分泌细胞中有IAPP与5-HT的共存，但二者出现的多少及免疫染色的强弱均有所不同。 IAPP的研究结果为拓宽IAPP 的研究提供了新的形态学资料。 2.首次观察到人胎直肠粘膜内存在VIP-IR细胞并证实人胎小肠及结肠粘膜内有VIP-IR细胞分布。小肠及直肠内VIP-IR细胞均于11周出现，结肠内VIP-IR细胞于18周出现，数量少，整个胎期细胞数量、形态及免疫染色强度均未见明显变化。 3.首次报道人胎早期结肠有G细胞存在。随胎龄增长，人胎结肠的G细胞逐渐减少，于26周后未见。胎儿小肠三段均有G细胞存在。 4.本研究证实PP、SS和5-HT在人胎小肠、结肠及直肠的内分泌细胞中已有分布，SP在人胎结肠及直肠内分泌细胞中有表达，邻片比较观察发现直肠内部分SP-IR 细胞与5-HT-IR 细胞定位一致。推测PP、SS、5-HT和SP在人胎肠道发育中具有一定的作用。 5.本实验还观察到P16蛋白在人胎儿胃黏膜中的表达，图像分析结果显示11～13周人胎儿胃黏膜腺上皮的p16蛋白平均灰度值最小，而阳性细胞数目最多；随着胎龄的增加，p16蛋白的平均灰度值逐渐增大，而阳性细胞的数目则逐渐减少；各胎龄组的阳性细胞数目及平均灰度值差异有显著性。 细胞内p16蛋白的高表达，提示p16蛋白在细胞的增殖分化中发挥抑制作用，以保证细胞正常的分裂分化。 本项目立题有据，方法先进，定位准确，结果可靠。 采取当今形态学较先进的免疫组织化学技术及图像分析技术对人胎胃肠道内分泌细胞内特定生物活性物质的表达及不同胎龄时期的变化情况进行研究。 本研究结果为充实胃肠激素的研究提供新资料，对研究有关疾病的发病机理提供新思路，尤其是人类胚胎发育是一个相当复杂的过程，IAPP和其他内分泌激素在胎儿胃肠道的发现，在胚胎学领域具有积极的意义。 本研究对胰岛淀粉样多肽这一新激素的表达变化进行了系统研究。研究结果为拓宽IAPP的研究提供了新的形态学资料；为证实IAPP在胃肠道具有调节作用提供了直接的依据；为进一步阐明IAPP的生理作用及神经内分泌免疫学这门新兴学科积累资料；并为临床探讨相关疾病的发病机理提供了新的探索途径。 本课题的研究论文多发表于本学科领域的权威期刊（解剖学报）及核心期刊（解剖学杂志），相关内容在中国解剖学会2000年、2004年学术年会、第六届及第七届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会和西南三省一市解剖学会2001年学术年会宣读和交流。“人胎儿小肠胰多肽及5-羟色胺免疫反应细胞的个体发生”获中国解剖学会第六届全国组织学胚胎学青年学术研讨会论文鼓励奖。本课题的论文已被国际权威检索系统和国内重要检索系统收录。 本成果的内容包括论文8篇，其中解剖学报（权威期刊）3篇，解剖学杂志（核心期刊）2篇，解剖科学进展1篇，徐州医学院学报2篇。论文摘要5篇，分别登载于解剖科学进展、解剖学杂志和四川解剖学杂志。