本课题属于杭州市医药卫生科技计划项目(项目编号：2003B041)。 　　结核分歧杆菌是结核病的病原菌。研究发现结核菌可表现为滤过型、颗粒型、球菌、短杆菌、成熟杆菌等多种形态，而且它们对化疗的反应各不相同。典型杆菌人们对其研究较多，是目前细菌学诊断的主要依据。但对其它形式的细菌如结核菌L型(MTB-L)等仍然知之甚少。研究发现，分歧杆菌L型具有可塑性、滤过性，保留了原菌的部分生物学特性与致病性，但与原菌又有很大的不同，很易造成漏诊。而分歧杆菌L型不仅存在于痰、尿、胸腹水等，也有可能在血液中广泛存在。有研究发现，分歧杆菌L型稳定型细胞膜代偿性增厚，造成DNA提取困难，使PCR结果表现为假阴性，但也有相反结论。荧光定量PCR(FQ-PCR)技术目前已广泛应用于结核菌的检测，具有实时检测、可定量、减少污染等优点，但现有文献基本未涉及FQ-PCR在检测MTB-L上的临床价值，而MTB-L已被许多学者认为是结核病确诊的条件之一。考虑到MTB-L与原菌有很大的不同，所以有必要进一步评价FQ-PCR检测结核菌L型的临床价值。 　　本课题针对临床中较为常见的“痰菌阴性”(“菌阴”)和难治性肺结核病，采用涂片、改良罗氏培养、结核菌L型培养、免疫组化染色、透射电镜、荧光定量PCR(FQ-PCR)等多种方法，对相关病例进行了系统研究。证明结核菌L型生物学特性与原菌明显不同，“菌阴”和难治结核患者存在较高的分歧杆菌L型感染率，而分歧杆菌L型检测可提高结核病细菌学诊断阳性率；首次发现结核菌L型巨球体，初步研究发现其具有潜在的诊断价值。研究发现，血、痰联合检测可提高结核杆菌荧光定量PCR和结核菌L型检测阳性率；FQ-PCR可用于血及痰中分歧杆菌L型的辅助诊断，但仍需结合培养和免疫学手段进行诊断，以免造成漏诊。证明结核分歧杆菌存在滤过型，而FQ-PCR可用于滤过型的辅助检测。经查新，该研究结果处于国内领先、国际先进水平。 　　通过本研究，对结核菌L型的特性有了进一步的发现，发表和待发表文章多篇，完成了合同书规定的各项经济技术指标。通过进一步推广，有望提高临床和检验人员对结核菌L型的认识，有利于提高结核病的细菌学诊断阳性率和临床治疗效果，从而取得较大的经济和社会效益。 　　目前尚未获奖。

　　本课题属于杭州市医药卫生科技计划项目(项目编号：2003B041)。 　　结核分歧杆菌是结核病的病原菌。研究发现结核菌可表现为滤过型、颗粒型、球菌、短杆菌、成熟杆菌等多种形态，而且它们对化疗的反应各不相同。典型杆菌人们对其研究较多，是目前细菌学诊断的主要依据。但对其它形式的细菌如结核菌L型(MTB-L)等仍然知之甚少。研究发现，分歧杆菌L型具有可塑性、滤过性，保留了原菌的部分生物学特性与致病性，但与原菌又有很大的不同，很易造成漏诊。而分歧杆菌L型不仅存在于痰、尿、胸腹水等，也有可能在血液中广泛存在。有研究发现，分歧杆菌L型稳定型细胞膜代偿性增厚，造成DNA提取困难，使PCR结果表现为假阴性，但也有相反结论。荧光定量PCR(FQ-PCR)技术目前已广泛应用于结核菌的检测，具有实时检测、可定量、减少污染等优点，但现有文献基本未涉及FQ-PCR在检测MTB-L上的临床价值，而MTB-L已被许多学者认为是结核病确诊的条件之一。考虑到MTB-L与原菌有很大的不同，所以有必要进一步评价FQ-PCR检测结核菌L型的临床价值。 　　本课题针对临床中较为常见的“痰菌阴性”(“菌阴”)和难治性肺结核病，采用涂片、改良罗氏培养、结核菌L型培养、免疫组化染色、透射电镜、荧光定量PCR(FQ-PCR)等多种方法，对相关病例进行了系统研究。证明结核菌L型生物学特性与原菌明显不同，“菌阴”和难治结核患者存在较高的分歧杆菌L型感染率，而分歧杆菌L型检测可提高结核病细菌学诊断阳性率；首次发现结核菌L型巨球体，初步研究发现其具有潜在的诊断价值。研究发现，血、痰联合检测可提高结核杆菌荧光定量PCR和结核菌L型检测阳性率；FQ-PCR可用于血及痰中分歧杆菌L型的辅助诊断，但仍需结合培养和免疫学手段进行诊断，以免造成漏诊。证明结核分歧杆菌存在滤过型，而FQ-PCR可用于滤过型的辅助检测。经查新，该研究结果处于国内领先、国际先进水平。 　　通过本研究，对结核菌L型的特性有了进一步的发现，发表和待发表文章多篇，完成了合同书规定的各项经济技术指标。通过进一步推广，有望提高临床和检验人员对结核菌L型的认识，有利于提高结核病的细菌学诊断阳性率和临床治疗效果，从而取得较大的经济和社会效益。 　　目前尚未获奖。