“胚胎冷冻保存技术应用研究”是成都市计划生育技术指导所自拟科研项目。 　　胚胎冷冻保存技术在人类及其它哺乳动物生殖能力的保存中具有重要作用，胚胎冷冻保存是接受体外受精-胚胎移植及其衍生技术实施中最大限度保存生殖能力、提高每个取卵周期妊娠率最常用的方法，提高冷冻胚胎的存活率和发育潜力一直国内外研究者们关注的热点领域。 　　该研究采用细胞培养、胚胎冷冻、激光辅助孵化、显微操作、免疫组化、激光共聚焦显微技术，较为系统地研究了不同冷冻保护剂(丙二醇、二甲基亚砜、甘油和乙二醇)、不同冷冻保存方式(慢速冷冻-快速解冻、Vit-Master玻璃化冷冻)对早期胚胎的影响。结果表明：在慢速冷冻-快速解冻方法冷冻小鼠2～8-细胞胚胎时，以丙二醇为冷冻保护剂的囊胚形成率和囊胚孵出率最高；采用Vit-Master玻璃化冷冻仪冷冻小鼠2～8-细胞胚胎，以乙二醇为冷冻保护剂的囊胚形成率和囊胚孵出率显著高于其它冷冻保护剂的结果；激光辅助孵化结合显微操作去除冷冻胚胎坏死细胞可明显提高小鼠冷冻胚胎的囊胚形成率和囊胚孵出率；以丙二醇为冷冻保护剂、采用慢速冷冻-快速解冻法冷冻小鼠2～4-细胞胚胎，对胚胎的细胞骨架结构无明显影响。 　　该研究获得了以下有重要价值的创新研究成果：①采用Vit-Master玻璃化冷冻仪冷冻小鼠2～8-细胞胚胎，以乙二醇为冷冻保护剂取得了理想效果，该方式可能成为慢速冷冻-快速解冻的替代方式。②激光辅助孵化结合显微操作去除冷冻胚胎坏死细胞可明显提高小鼠冷冻胚胎的发育潜力，为临床上提高冷冻胚胎发育潜力提供了新的途径。③以丙二醇为冷冻保护剂，采用慢速冷冻-快速解冻法冷冻小鼠早期胚胎，对胚胎存活细胞的细胞骨架结构没有明显影响，有效地探索了胚胎冷冻新方法，为提高冷冻胚胎的发育潜力提供了新的思路和方法，对深入研究人类辅助生殖技术、保存物种资源以及低温生物学研究具有重要的理论意义和实践价值，应用前景较为广泛，达到了国内领先水平，具有较为明显的社会效益和可观的经济效益。

　　“胚胎冷冻保存技术应用研究”是成都市计划生育技术指导所自拟科研项目。 　　胚胎冷冻保存技术在人类及其它哺乳动物生殖能力的保存中具有重要作用，胚胎冷冻保存是接受体外受精-胚胎移植及其衍生技术实施中最大限度保存生殖能力、提高每个取卵周期妊娠率最常用的方法，提高冷冻胚胎的存活率和发育潜力一直国内外研究者们关注的热点领域。 　　该研究采用细胞培养、胚胎冷冻、激光辅助孵化、显微操作、免疫组化、激光共聚焦显微技术，较为系统地研究了不同冷冻保护剂(丙二醇、二甲基亚砜、甘油和乙二醇)、不同冷冻保存方式(慢速冷冻-快速解冻、Vit-Master玻璃化冷冻)对早期胚胎的影响。结果表明：在慢速冷冻-快速解冻方法冷冻小鼠2～8-细胞胚胎时，以丙二醇为冷冻保护剂的囊胚形成率和囊胚孵出率最高；采用Vit-Master玻璃化冷冻仪冷冻小鼠2～8-细胞胚胎，以乙二醇为冷冻保护剂的囊胚形成率和囊胚孵出率显著高于其它冷冻保护剂的结果；激光辅助孵化结合显微操作去除冷冻胚胎坏死细胞可明显提高小鼠冷冻胚胎的囊胚形成率和囊胚孵出率；以丙二醇为冷冻保护剂、采用慢速冷冻-快速解冻法冷冻小鼠2～4-细胞胚胎，对胚胎的细胞骨架结构无明显影响。 　　该研究获得了以下有重要价值的创新研究成果：①采用Vit-Master玻璃化冷冻仪冷冻小鼠2～8-细胞胚胎，以乙二醇为冷冻保护剂取得了理想效果，该方式可能成为慢速冷冻-快速解冻的替代方式。②激光辅助孵化结合显微操作去除冷冻胚胎坏死细胞可明显提高小鼠冷冻胚胎的发育潜力，为临床上提高冷冻胚胎发育潜力提供了新的途径。③以丙二醇为冷冻保护剂，采用慢速冷冻-快速解冻法冷冻小鼠早期胚胎，对胚胎存活细胞的细胞骨架结构没有明显影响，有效地探索了胚胎冷冻新方法，为提高冷冻胚胎的发育潜力提供了新的思路和方法，对深入研究人类辅助生殖技术、保存物种资源以及低温生物学研究具有重要的理论意义和实践价值，应用前景较为广泛，达到了国内领先水平，具有较为明显的社会效益和可观的经济效益。