课题来源：课题一：湖南省卫生厅科研基金(C2004-003)，课题二：湖南省科学技术厅科技计划(湘科社字[2003]166号)，计划编号03SSY4012 　　课题背景：自身免疫性疾病(Autoimmune diseases，AID)是一类严重威胁我国人民健康的重大疾病。这类疾病的特点是反复发作，慢性迁延，治疗效果不好，具有相当高的致残率和病死率，发病率逐年攀升。几乎所有的AID都是细胞免疫和体液免疫共同作用的结果。淋巴细胞活化，尤其是自身反应性CD4+T淋巴细胞的出现，可能是这类疾病发生的关键环节。在某些AID，单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、血小板等都可成为主要的免疫活性细胞。T、B淋巴细胞在正常情况下是通过凋亡途径代谢的，大多数AID都存在诱导凋亡途径异常，致使活化的淋巴细胞长时间在机体内存活，源源不断产生自身抗体和免疫活性物质，对机体造成持续损害。 　　AID传统的治疗方法包括糖皮质激素和各种免疫抑制剂、细胞毒类药物等。其主要机理是抑制T、B细胞的功能和增殖，在一定程度上能控制病情的发展。但当B细胞已分化成浆细胞后，即对上述药物不敏感，致使部分患者疗效欠佳甚至无效。长期使用这些药物，毒副作用大，也使得AID患者成为恶性肿瘤的高发人群。血浆置换、免疫吸附治疗、淋巴细胞单采术治疗AID也得到了广泛的应用。血浆置换、免疫吸附治疗的主要机理是去除病人血浆中的自身抗体，解决了体液免疫问题，近期疗效明显，但由于没有去除免疫活性细胞，抗体滴度容易再度升高，甚至超过原有水平，造成病情反复或加重；淋巴细胞单采术又只能解决细胞免疫问题，没有去除血浆中的病理性成分，新生的淋巴细胞容易再度致敏活化。因此，寻求一种安全、简单、高效、经济的AID治疗方法非常必要。 　　技术原理：本研究运用美国产COBE血细胞分离机，对其管道加以改进，在去除血浆中的自身抗体、同种抗体、循环免疫复合物、炎症介质等病理性物质的同时，还可以选择性去除与各种AID密切相关的免疫活性细胞，血液中所有对机体有害的细胞如病理性浆细胞、APC、白血病细胞、肿瘤细胞、GVHD患者的异体淋巴细胞等也可以一并去除。同时输入供血者的新鲜冰冻血浆(FFP)，不仅可起到替补作用，还因为FFP中含有大量的IVIG，具有明显的免疫抑制和免疫调节作用。 　　技术的创造性与先进性：将免疫活性细胞去除和血浆置换两种治疗方法在同一操作过程中实现，集细胞单采术和血浆置换的优点于一体，兼顾了细胞免疫和体液免疫两方面的问题，阻止了免疫损伤→自身抗原暴露或释放→抗体滴度升高→免疫反应增强→加剧免疫损伤的恶性循环，也抑制了普通血浆置换后抗体滴度降低→解除了对单核巨噬细胞的负反馈抑制→免疫活性细胞产生大量抗体→病情加重的过程，同时也去除了免疫活性细胞表面吸附的大量病原体、自身抗原、抗体、细胞因子、免疫复合物等病理性产物，调整Th1/Th2细胞平衡和T/B淋巴细胞平衡，为恢复正常免疫创造了条件。病人血浆中的自身抗体、同种抗体、循环免疫复合物、粘附分子、炎性介质等也在治疗过程中去除，避免了新生免疫细胞的多克隆激活，不仅近期疗效明显，远期疗效也非常满意。该研究在提高疗效的同时，减少了置换次数，延长了间隔时间，每次治疗时间缩短，不仅减少了患者痛苦和经济负担，同时降低了多次侵入性操作及多次异体血浆输注带来的感染和免疫反应，也节约了宝贵的血液资源。 　　技术的成熟程度、适用范围、应用情况和安全性：参与该项目的团队成员有教授2名，副教授2名。其中博士3名，硕士2名，熟练操作COBE Spectra血细胞分离机的专业技术人员5名，先后培训进修实习医师多名。自1996年开始，该团队利用血细胞分离机对各种疾病进行治疗性血液成分去除和置换术，如血浆置换、红细胞置换、白血病细胞去除、外周血造血干细胞单采等，累计治疗病种达20多种，治疗病人3000多例，积累了大量成功的经验，技术娴熟。我院从2000年4月开始应用该技术治疗AID，总计治疗病人509例，病种18种，目前病例数以每月8～10例的速度增加。通过大样本的临床研究证明，本研究治疗以细胞免疫为主的AID效果最好，治疗以体液免疫为主的AID亦明显优于血浆置换组。从我们治疗的509例病人来看，病人年龄最小的只有2小时，体重2.3Kg；年龄最大的有83岁，还合并糖尿病、食道癌、冠心病等多种疾病，均能接受治疗，无一例病人于治疗过程中死亡，亦无严重的感染、出血等合并症，总成功率达100%，有效率96%以上。 　　由于该项目是原创性技术，还没有申请相应知识产权，所以还没有进行广泛的推广应用，目前在全国范围内只有我院独家使用。 　　存在的问题：①不能选择性去除T细胞亚群；②出凝血机制障碍、严重感染的病人需谨慎操作；③本项目为有创操作，在操作过程中需输入多人份异体血浆以及去除部分淋巴细胞，这可能增加感染机会。 　　获奖情况：本研究获湘雅医院2007年医疗新技术二等奖，已被推荐申报中南大学新技术成果奖。

　　课题来源：课题一：湖南省卫生厅科研基金(C2004-003)，课题二：湖南省科学技术厅科技计划(湘科社字[2003]166号)，计划编号03SSY4012 　　课题背景：自身免疫性疾病(Autoimmune diseases，AID)是一类严重威胁我国人民健康的重大疾病。这类疾病的特点是反复发作，慢性迁延，治疗效果不好，具有相当高的致残率和病死率，发病率逐年攀升。几乎所有的AID都是细胞免疫和体液免疫共同作用的结果。淋巴细胞活化，尤其是自身反应性CD4+T淋巴细胞的出现，可能是这类疾病发生的关键环节。在某些AID，单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、血小板等都可成为主要的免疫活性细胞。T、B淋巴细胞在正常情况下是通过凋亡途径代谢的，大多数AID都存在诱导凋亡途径异常，致使活化的淋巴细胞长时间在机体内存活，源源不断产生自身抗体和免疫活性物质，对机体造成持续损害。 　　AID传统的治疗方法包括糖皮质激素和各种免疫抑制剂、细胞毒类药物等。其主要机理是抑制T、B细胞的功能和增殖，在一定程度上能控制病情的发展。但当B细胞已分化成浆细胞后，即对上述药物不敏感，致使部分患者疗效欠佳甚至无效。长期使用这些药物，毒副作用大，也使得AID患者成为恶性肿瘤的高发人群。血浆置换、免疫吸附治疗、淋巴细胞单采术治疗AID也得到了广泛的应用。血浆置换、免疫吸附治疗的主要机理是去除病人血浆中的自身抗体，解决了体液免疫问题，近期疗效明显，但由于没有去除免疫活性细胞，抗体滴度容易再度升高，甚至超过原有水平，造成病情反复或加重；淋巴细胞单采术又只能解决细胞免疫问题，没有去除血浆中的病理性成分，新生的淋巴细胞容易再度致敏活化。因此，寻求一种安全、简单、高效、经济的AID治疗方法非常必要。 　　技术原理：本研究运用美国产COBE血细胞分离机，对其管道加以改进，在去除血浆中的自身抗体、同种抗体、循环免疫复合物、炎症介质等病理性物质的同时，还可以选择性去除与各种AID密切相关的免疫活性细胞，血液中所有对机体有害的细胞如病理性浆细胞、APC、白血病细胞、肿瘤细胞、GVHD患者的异体淋巴细胞等也可以一并去除。同时输入供血者的新鲜冰冻血浆(FFP)，不仅可起到替补作用，还因为FFP中含有大量的IVIG，具有明显的免疫抑制和免疫调节作用。 　　技术的创造性与先进性：将免疫活性细胞去除和血浆置换两种治疗方法在同一操作过程中实现，集细胞单采术和血浆置换的优点于一体，兼顾了细胞免疫和体液免疫两方面的问题，阻止了免疫损伤→自身抗原暴露或释放→抗体滴度升高→免疫反应增强→加剧免疫损伤的恶性循环，也抑制了普通血浆置换后抗体滴度降低→解除了对单核巨噬细胞的负反馈抑制→免疫活性细胞产生大量抗体→病情加重的过程，同时也去除了免疫活性细胞表面吸附的大量病原体、自身抗原、抗体、细胞因子、免疫复合物等病理性产物，调整Th1/Th2细胞平衡和T/B淋巴细胞平衡，为恢复正常免疫创造了条件。病人血浆中的自身抗体、同种抗体、循环免疫复合物、粘附分子、炎性介质等也在治疗过程中去除，避免了新生免疫细胞的多克隆激活，不仅近期疗效明显，远期疗效也非常满意。该研究在提高疗效的同时，减少了置换次数，延长了间隔时间，每次治疗时间缩短，不仅减少了患者痛苦和经济负担，同时降低了多次侵入性操作及多次异体血浆输注带来的感染和免疫反应，也节约了宝贵的血液资源。 　　技术的成熟程度、适用范围、应用情况和安全性：参与该项目的团队成员有教授2名，副教授2名。其中博士3名，硕士2名，熟练操作COBE Spectra血细胞分离机的专业技术人员5名，先后培训进修实习医师多名。自1996年开始，该团队利用血细胞分离机对各种疾病进行治疗性血液成分去除和置换术，如血浆置换、红细胞置换、白血病细胞去除、外周血造血干细胞单采等，累计治疗病种达20多种，治疗病人3000多例，积累了大量成功的经验，技术娴熟。我院从2000年4月开始应用该技术治疗AID，总计治疗病人509例，病种18种，目前病例数以每月8～10例的速度增加。通过大样本的临床研究证明，本研究治疗以细胞免疫为主的AID效果最好，治疗以体液免疫为主的AID亦明显优于血浆置换组。从我们治疗的509例病人来看，病人年龄最小的只有2小时，体重2.3Kg；年龄最大的有83岁，还合并糖尿病、食道癌、冠心病等多种疾病，均能接受治疗，无一例病人于治疗过程中死亡，亦无严重的感染、出血等合并症，总成功率达100%，有效率96%以上。 　　由于该项目是原创性技术，还没有申请相应知识产权，所以还没有进行广泛的推广应用，目前在全国范围内只有我院独家使用。 　　存在的问题：①不能选择性去除T细胞亚群；②出凝血机制障碍、严重感染的病人需谨慎操作；③本项目为有创操作，在操作过程中需输入多人份异体血浆以及去除部分淋巴细胞，这可能增加感染机会。 　　获奖情况：本研究获湘雅医院2007年医疗新技术二等奖，已被推荐申报中南大学新技术成果奖。