技术原理： 1.胃黏膜标本的采集 胃镜下取胃窦及胃体粘膜各3块，分别做快速尿素酶实验、改良Giemsa染色及提取DNA进行荧光定量PCR、巢式PCR。 2.胃黏膜DNA提取 浸于无菌生理盐水的胃组织用超声细胞粉碎仪进行粉碎，用广东达安生产DNA提取液提取。 3.粪便DNA的提取 粪便DNA的提取用Qigen公司生产的QIAamp DNA Stool Mini Kit提取，其操作按说明进行。 4.FQ-PCR扩增 FQ-PCR应用幽门螺杆菌（HP）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒，按说明操作。 5.巢式PCR 参照基因库基因序列及文献报道自行设计内外引物及β-action引物，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 6.PCR-RFLP 用BsaI、BbsI进行酶切，限制酶购于纽英伦生物有限公司，分别在1×NEBuffer3条件下，50℃孵育4小时及在1×NEBuffer2条件下，37℃孵育4小时进行反应。 7.测序 10例突变标本及10例野生株经测序证实，由上海生工生物工程技术服务有限公司测序部完成。 本课题为应用基础研究课题，通过不同的取材方法，由胃黏膜到粪便组织，由有创到无创，采用荧光定量、巢式PCR方法及限制性片段长度多态性分析技术，检测H. pylori感染及H. pylori对克拉霉素耐药相关的23S rRNA基因突变，从分子-基因水平研究幽门螺杆菌对克拉霉素耐药的分子机制，并通过测序进行验证，建立了一种简便、快速、准确的分子生物方法，预测幽门螺杆菌对克拉霉素敏感性，对幽门螺杆菌根除治疗方案的选择具有重要指导意义，便于临床推广和应用。

技术原理： 1.胃黏膜标本的采集 胃镜下取胃窦及胃体粘膜各3块，分别做快速尿素酶实验、改良Giemsa染色及提取DNA进行荧光定量PCR、巢式PCR。 2.胃黏膜DNA提取 浸于无菌生理盐水的胃组织用超声细胞粉碎仪进行粉碎，用广东达安生产DNA提取液提取。 3.粪便DNA的提取 粪便DNA的提取用Qigen公司生产的QIAamp DNA Stool Mini Kit提取，其操作按说明进行。 4.FQ-PCR扩增 FQ-PCR应用幽门螺杆菌（HP）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒，按说明操作。 5.巢式PCR 参照基因库基因序列及文献报道自行设计内外引物及β-action引物，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 6.PCR-RFLP 用BsaI、BbsI进行酶切，限制酶购于纽英伦生物有限公司，分别在1×NEBuffer3条件下，50℃孵育4小时及在1×NEBuffer2条件下，37℃孵育4小时进行反应。 7.测序 10例突变标本及10例野生株经测序证实，由上海生工生物工程技术服务有限公司测序部完成。 本课题为应用基础研究课题，通过不同的取材方法，由胃黏膜到粪便组织，由有创到无创，采用荧光定量、巢式PCR方法及限制性片段长度多态性分析技术，检测H. pylori感染及H. pylori对克拉霉素耐药相关的23S rRNA基因突变，从分子-基因水平研究幽门螺杆菌对克拉霉素耐药的分子机制，并通过测序进行验证，建立了一种简便、快速、准确的分子生物方法，预测幽门螺杆菌对克拉霉素敏感性，对幽门螺杆菌根除治疗方案的选择具有重要指导意义，便于临床推广和应用。