《红细胞的低温冷冻保存及其临床应用》课题为宁波市医学科研项目（计划编号2002056）。
近年来，宁波市临床上发现Rh(D)阴性的人越来越多，随之而来的是Rh(D)阴性血的需求量逐年增加。现在，如果血库暂时没有Rh(D)阴性的血液，其他需提供临床的途径有二：一是从Rh(D)阴性血型人群档案中选择，并联系献血员前来献血；二是调用外地血。如果本地一时找不到合适的献血员，必须调用外地血，手续繁多，耗时长，不能适应临床急救用血的需要。建立Rh(D)阴性血液冷冻库，可以在平时积累一定比例、各种血型的Rh(D)阴性血液，也可以把平时多余的Rh(D)阴性血液冷冻起来，保证日常和急救时临床用血的需要。
在低温下，活细胞的新陈代谢作用急剧减弱。依据这个事实，细胞和组织可以长期低温保存，供科研及临床医疗使用（例如，输血、骨髓移植、人工受精和试管受精等）。进行低温保存的主要步骤为：①细胞和组织放入防冻剂中；②一同降温至某一温度值下（如－86℃），并在该温度下进行长期保存；③对其进行复温；④复温后，从防冻剂中取出细胞和组织。然而，实验中发现，低温保存过程本身也会杀伤细胞及组织，这有悖于低温保存的目的。细胞及组织的损伤来源于上面保存过程中的每一个步骤，尤其是与细胞内外水结冰相关的损伤。依据物理和生物学等原理，需要优化长期低温保存的操作程序和设备，防止低温损伤。
本课题解决了原合同中提出的关键技术问题，主要有：冷冻液的加入、血液冷冻保存的速度、温度设定，冰冻红细胞的解冻复苏的温度、时间掌握，冷冻保护剂的选择，洗涤液的种类、浓度、加液速度等。结果检测按《血站基本标准》要求对冷冻红细胞制品进行红细胞回收率，残余红细胞,甘油残存量,游离血红蛋白（FHb），残余红细胞(WBC),残余血小板(PC)，体外溶血试验，无菌试验等指标检测，基本符合要求。本课题于 2005.12已完成具体实验，已经开展冰冻红细胞42例。同时成功地应用于临床，临床效果好，未发现副作用。
此项工作虽然技术要求高，工作量大，成本较高，但能解决特殊血型的临床急用，具有重要的临床意义，产生较好的社会效益。血液冷冻保存研究的成功，是血液保存方法上的重大突破，为解决血液长期储存、保障供血和特别是对稀有血型患者输血以及自身血液长期储存创造了条件。该研究总体技术达到国内同类研究的先进水平。
日后继续完善相应的标准操作规程，进一步积累临床应用病例，进一步建立和完善Rh(D)阴性无偿献血志愿者库，进一步扩大各种稀有血型及成分的血液储存。并对红细胞-86℃低温冷冻长时间保存方法、质控指标监测合格率与临床应用的安全性进行研究。
本研究主题面向临床实践，实用性强，实验方法设计科学合理，为解决临床Rh(D)阴性血液供应提供了有力保障，临床很需要这方面技术平台的支持，有极其重要的临床意义，在医疗临床上具有广阔的应用前景。 |
