鉴于ESBLs由质粒介导可迅速在菌株间转移和传播，现已播散至肠杆菌科的其他菌株甚至肠杆菌科以外的其他细菌，常规的纸片确证实验需4-5天，并且检测范围较窄仅限于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌。本课题建立SYBRGREEN I实时荧光定量PCR检测ESBLs，利用熔解曲线分析进行分型（临床常见的SHV、TEM、 CTX-M1、CTX-M2、CTX-M8、 CTX-M9、OXA-1、OXA-2、OXA-10 9种基因型），通过测序后建立实验室阳性标准菌株，对天津市人民医院、天津市胸科医院、天津市南开医院确证产ESBLs大肠埃希菌109株，肺炎克雷伯菌109株及天津市人民医院多重耐药铜绿假单胞菌49株，阴肠杆菌20株、鲍曼不动杆菌20株，其它肠杆菌19株进行基因检测。并对产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌进行药敏分析。随着国内基因扩增实验室不断规范化，越来越多的临床实验室开展了分子生物学基因检测技术，实时荧光定量PCR仪已应用于检验科日常检测工作。与定性PCR仪相比该方法具有定量结果可靠、检测更加灵敏，操作简便的特点；由于扩增、检测都在封闭管内，避免污染环境及假阳性结果，既保护操作人员，又减少人为因素造成的误差。因此，此法适用于具备分子生物实验室的医院检测微生物耐药基因，为临床早期提供用药依据。

鉴于ESBLs由质粒介导可迅速在菌株间转移和传播，现已播散至肠杆菌科的其他菌株甚至肠杆菌科以外的其他细菌，常规的纸片确证实验需4-5天，并且检测范围较窄仅限于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌。本课题建立SYBRGREEN I实时荧光定量PCR检测ESBLs，利用熔解曲线分析进行分型（临床常见的SHV、TEM、 CTX-M1、CTX-M2、CTX-M8、 CTX-M9、OXA-1、OXA-2、OXA-10 9种基因型），通过测序后建立实验室阳性标准菌株，对天津市人民医院、天津市胸科医院、天津市南开医院确证产ESBLs大肠埃希菌109株，肺炎克雷伯菌109株及天津市人民医院多重耐药铜绿假单胞菌49株，阴肠杆菌20株、鲍曼不动杆菌20株，其它肠杆菌19株进行基因检测。并对产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌进行药敏分析。随着国内基因扩增实验室不断规范化，越来越多的临床实验室开展了分子生物学基因检测技术，实时荧光定量PCR仪已应用于检验科日常检测工作。与定性PCR仪相比该方法具有定量结果可靠、检测更加灵敏，操作简便的特点；由于扩增、检测都在封闭管内，避免污染环境及假阳性结果，既保护操作人员，又减少人为因素造成的误差。因此，此法适用于具备分子生物实验室的医院检测微生物耐药基因，为临床早期提供用药依据。