| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 胰腺;干细胞;细胞克隆 | |||||
| 成果类别: | 基础理论 | 技术成熟度: | / | |||
| 体现形式(基础理论类): | 论文 | 体现形式(应用技术类): | / | |||
| 成果登记号: | 9112007j0104 | 资源采集日期: | 07-12-30 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 北京大学第三医院 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | / | ||
| 评价日期: | / | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | / | 推广形式: | / | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
本项目所属科学技术领域为生物、医药和医疗器械。主要研究内容:胎儿胰腺来源的人胰腺干细胞的分离、培养、纯化和鉴定;单克隆人胰腺干细胞的建立;确定人胰腺干细胞的体外扩增和分化能力以及表型特征。 主要研究结果: ① 16和20周龄胎儿胰腺组织存在巢蛋白阳性细胞,主要分布在导管区、间质及胰岛样结构中,并且部分细胞中巢蛋白与导管上皮标志物细胞角蛋白19(CK19)共表达,而与胰岛素、胰升糖素未见到共表达。 ② 从20周龄胎儿胰腺组织中分离得到可连续传代培养的上皮样细胞,该细胞普遍呈巢蛋白阳性表达,同时还可表达ABCG2、波形蛋白等其他干细胞标志物;在体外诱导分化培养条件下,可分化为表达PDX-1、胰岛素、胰升糖素的胰岛内分泌细胞,还可分化为脂肪细胞和骨细胞。 ③ FACS分析显示,在传代培养的胎儿胰腺细胞中,侧群(SP)细胞约占0.1%,为小细胞群体;分选单个SP细胞后,其克隆形成率为2.7%;单克隆SP细胞可表达ABCG2、OCT4、巢蛋白等干细胞标志物,在体外具有很强的增殖能力,可连续传代培养15代以上;在体外培养条件下,可诱导分化为表达PDX-1、GLUT2、胰岛素、胰升糖素的细胞,葡萄糖刺激后可检测到胰岛素释放反应。 ④ FACS分析显示,在胎胰来源的单克隆SP细胞和巢蛋白阳性细胞中,CD44、CD90、CD147等阳性,而CD34、CD38、CD45、CD117、CD133、HLA-DR等则阴性,以骨髓间充质干细胞作为对照,它们之间的表型特征基本一致。 主要结论:胎儿胰腺中存在胰腺干细胞,首次报道了通过分选单个SP细胞技术建立单克隆人胰腺干细胞,胰腺干细胞具有间充质的表型特征。单克隆SP细胞的建立可能为从人胰腺组织中纯化胰腺干细胞提供了一种新的方法,可能为胰腺干细胞研究提供更稳定可靠的细胞体系。发现胰腺干细胞具有间充质的表型特征,有助于深入揭示了胰岛再生和修复的细胞生物学基础。本项目发表1年以上的12篇文章中,有1篇被SCI收录(IF 3.0),共在国际期刊被他引6次,被国内研究者他引25次,并先后在多个重要的国内外学术会议上进行专题报告或交流。 |