（1）任务来源 　　《金黄色葡萄球菌肠毒素基因快速检测方法研究》是河北省科学技术委员会下达的计划内项目之一，课题编号为：052761374。 　　（2）应用领域和技术原理： 　　本项目属于卫生检验和分子生物学的研究领域。由金葡菌肠毒素引起的食物中毒已成为世界性的卫生问题。本研究对迄今为止发现的9种金葡菌肠毒素基因设计特异性PCR引物，优化了PCR扩增条件，成功建立了快速提取基因组DNA和特异性扩增肠毒素基因的方法，通过灵敏度检测和干扰实验，证明该方法具有很高的灵敏度和很强的特异性。应用所建立的PCR方法，探讨本地区金葡菌肠毒素基因的分布规律，为临床提高疗效提供敏感性药物，为诊断由金葡菌引起的食物中毒提供一种快速检测方法，为流行病学调查，确定传染源提供可靠的实验数据，提高处置食物中毒的能力。 　　（3）性能指标 　　本研究建立并优化了PCR方法，可以特异的对9种葡萄球菌肠毒素基因进行分型。通过特异性试验和方法灵敏度的检测证明该方法具有很好的特异性和很高的灵敏度。药敏试验发现无论分泌的肠毒素为哪些型，分离的菌株对抗生素敏感和耐药都很相似，即对头孢唑啉、头孢噻吩、丁胺卡那霉素、四环素、氟哌酸、妥布霉素、呋喃妥因、环丙沙星、万古霉素均为敏感；对苯唑青霉素、氨苄青霉素、头孢他啶、氨曲南、奥普托欣均为耐药。利用课题所建立的PCR方法对我市所发生的由金葡菌引发的食物中毒事件中肠毒素的分布情况进行了调查，从129份食物中毒标本分离的47株金黄色葡萄球菌检测各型肠毒素，携带SEA和SEC基因的最多，分别为30株、25株，各占63.8%和53.2%；同时以免疫方法（Vidas）作为对照，阳性符合率达96%。 　　（4）与国内外同类技术比较 　　本课题在建立PCR快速检测金葡菌肠毒素基因（SEA～SEJ）的方法的同时，对金葡菌进行了肠毒素基因SEA～SEJ的基因分型，并根据分泌肠毒素型别的不同分别进行了耐药性试验，证实了在我市区域内SEA～SEJ九型肠毒素的存在及分布情况，在国内尚未见有人报道。该课题采用国标检验方法和美国国标方法进行分析研究，设计合理，方法确证，该研究项目在国内处于领先水平。 　　（5）成果的创造性、先进性 　　国内在2005年有对金葡菌肠毒素基因SEA～SEJ进行检测的报道，但在国内未有利用聚合酶链反应检测金葡菌肠毒素基因同时进行药敏试验的报道。在省内亦未有查出应用PCR反应检测金葡菌肠毒素基因的报道。研究结果表明：建立了一种系统、成熟、快速的金葡菌肠毒素基因分型方法，通过对大量的中毒样本的检测分型与药敏试验，不仅验证了该方法具有很好的稳定性和可靠性，而且提示了在本区域存在9种肠毒素及其分布情况，另外，为临床提高由金葡菌肠毒素所致的多种感染性疾病的治疗效果，提供敏感性药物。 　　（6）作用意义（直接经济效益和社会意义） 　　本课题建立了检测9种肠毒素基因SEA～SEJ的PCR方法，对129份食物中毒样品中分离的47株金葡菌进行了肠毒素基因分型，携带SEA和SEC基因的最多，分别为30株、25株，各占63.8%和53.2%；药敏试验证明不论分泌何种肠毒素，金葡菌的耐药性大致相同，均对头孢唑啉、头孢噻吩、丁胺卡那霉素、四环素、氟哌酸、妥布霉素、呋喃妥因、环丙沙星、万古霉素敏感。这些结果证实了本课题所建立的PCR方法，可作为一种快速诊断方法应用于实际工作中，很适合在突发公共卫生事件中发挥快速诊断作用。另外，本方法可对肠毒素进行基因分型，在处理食物中毒时针对可能引起中毒的剩余食品、患者的呕吐物、粪便及食品加工、出售等环节的环境因素进行采样分型鉴定，查明传染源，明确传染途径，为快速准确处置食物中毒提供准确数据。 　　（7）推广应用的范围条件和前景及存在的问题和改进意见。 　　金葡菌肠毒素引起的食物中毒已成为世界性的卫生问题，对肠毒素基因进行快速鉴定成为当务之急。本研究所建立的PCR方法是一种灵敏性高、特异性好、检测速度快的方法，明显优于传统的检测方法，极大地缩短了金葡菌引起食物中毒的确诊时间，为及时、有效的控制食源性疾病提供了可靠的技术支持。建议有条件开展分子生物学的各地疾病控制系统应用此方法进行金葡菌肠毒素快速诊断，提高处置食物中毒的能力。

　　（1）任务来源 　　《金黄色葡萄球菌肠毒素基因快速检测方法研究》是河北省科学技术委员会下达的计划内项目之一，课题编号为：052761374。 　　（2）应用领域和技术原理： 　　本项目属于卫生检验和分子生物学的研究领域。由金葡菌肠毒素引起的食物中毒已成为世界性的卫生问题。本研究对迄今为止发现的9种金葡菌肠毒素基因设计特异性PCR引物，优化了PCR扩增条件，成功建立了快速提取基因组DNA和特异性扩增肠毒素基因的方法，通过灵敏度检测和干扰实验，证明该方法具有很高的灵敏度和很强的特异性。应用所建立的PCR方法，探讨本地区金葡菌肠毒素基因的分布规律，为临床提高疗效提供敏感性药物，为诊断由金葡菌引起的食物中毒提供一种快速检测方法，为流行病学调查，确定传染源提供可靠的实验数据，提高处置食物中毒的能力。 　　（3）性能指标 　　本研究建立并优化了PCR方法，可以特异的对9种葡萄球菌肠毒素基因进行分型。通过特异性试验和方法灵敏度的检测证明该方法具有很好的特异性和很高的灵敏度。药敏试验发现无论分泌的肠毒素为哪些型，分离的菌株对抗生素敏感和耐药都很相似，即对头孢唑啉、头孢噻吩、丁胺卡那霉素、四环素、氟哌酸、妥布霉素、呋喃妥因、环丙沙星、万古霉素均为敏感；对苯唑青霉素、氨苄青霉素、头孢他啶、氨曲南、奥普托欣均为耐药。利用课题所建立的PCR方法对我市所发生的由金葡菌引发的食物中毒事件中肠毒素的分布情况进行了调查，从129份食物中毒标本分离的47株金黄色葡萄球菌检测各型肠毒素，携带SEA和SEC基因的最多，分别为30株、25株，各占63.8%和53.2%；同时以免疫方法（Vidas）作为对照，阳性符合率达96%。 　　（4）与国内外同类技术比较 　　本课题在建立PCR快速检测金葡菌肠毒素基因（SEA～SEJ）的方法的同时，对金葡菌进行了肠毒素基因SEA～SEJ的基因分型，并根据分泌肠毒素型别的不同分别进行了耐药性试验，证实了在我市区域内SEA～SEJ九型肠毒素的存在及分布情况，在国内尚未见有人报道。该课题采用国标检验方法和美国国标方法进行分析研究，设计合理，方法确证，该研究项目在国内处于领先水平。 　　（5）成果的创造性、先进性 　　国内在2005年有对金葡菌肠毒素基因SEA～SEJ进行检测的报道，但在国内未有利用聚合酶链反应检测金葡菌肠毒素基因同时进行药敏试验的报道。在省内亦未有查出应用PCR反应检测金葡菌肠毒素基因的报道。研究结果表明：建立了一种系统、成熟、快速的金葡菌肠毒素基因分型方法，通过对大量的中毒样本的检测分型与药敏试验，不仅验证了该方法具有很好的稳定性和可靠性，而且提示了在本区域存在9种肠毒素及其分布情况，另外，为临床提高由金葡菌肠毒素所致的多种感染性疾病的治疗效果，提供敏感性药物。 　　（6）作用意义（直接经济效益和社会意义） 　　本课题建立了检测9种肠毒素基因SEA～SEJ的PCR方法，对129份食物中毒样品中分离的47株金葡菌进行了肠毒素基因分型，携带SEA和SEC基因的最多，分别为30株、25株，各占63.8%和53.2%；药敏试验证明不论分泌何种肠毒素，金葡菌的耐药性大致相同，均对头孢唑啉、头孢噻吩、丁胺卡那霉素、四环素、氟哌酸、妥布霉素、呋喃妥因、环丙沙星、万古霉素敏感。这些结果证实了本课题所建立的PCR方法，可作为一种快速诊断方法应用于实际工作中，很适合在突发公共卫生事件中发挥快速诊断作用。另外，本方法可对肠毒素进行基因分型，在处理食物中毒时针对可能引起中毒的剩余食品、患者的呕吐物、粪便及食品加工、出售等环节的环境因素进行采样分型鉴定，查明传染源，明确传染途径，为快速准确处置食物中毒提供准确数据。 　　（7）推广应用的范围条件和前景及存在的问题和改进意见。 　　金葡菌肠毒素引起的食物中毒已成为世界性的卫生问题，对肠毒素基因进行快速鉴定成为当务之急。本研究所建立的PCR方法是一种灵敏性高、特异性好、检测速度快的方法，明显优于传统的检测方法，极大地缩短了金葡菌引起食物中毒的确诊时间，为及时、有效的控制食源性疾病提供了可靠的技术支持。建议有条件开展分子生物学的各地疾病控制系统应用此方法进行金葡菌肠毒素快速诊断，提高处置食物中毒的能力。