| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 碱性磷酸酶;检测;底物 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 初期阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新工艺 | |||
| 成果登记号: | 津20073076 | 资源采集日期: | 07-12-30 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 天津市医药科学研究所 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | 天津市卫生局 | ||
| 评价日期: | 2007.03.07 | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 限国内转让 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
碱磷酶(ALP)的检测是医院的常规检测项目,主要用于诊断各种肝病、骨病、肝癌、癌症的骨转移等疾病。目前主要使用对硝基苯基磷酸酯在400nm处比色测定。因底物本身存在的诸多问题,测量误差较大。为了寻找新的更适合临床使用的底物,2002年经天津市卫生局批准立项《检测碱性磷酸酶新型底物的合成及临床应用研究》。 对乙酰基苯基磷酸酯(PAP-P)是国际上九十年代(1994年)开发的ALP底物,因其与ALP反应后生成的PAP在碱性溶液中较稳定,并且测定波长在340nm,免除了400nm处诸杂质的干扰,测量准确度较高,目前已受到各国专家高度重视。 本项目在国内率先研制合成了化合物PAP-PNa2,经理化测试及临床对比实验证明其性能与国外产品基本一致。本项目在国内首次将PAP-PNa2用于碱性磷酸酶的检测中,并建立了以PAP-PNa2为底物的碱性磷酸酶连续检测法。 本项目进行了以下临床实验:吸收光谱曲线的确定、摩尔消光系数(ε)的确定、最适底物浓度的确定、最适pH的选择、线性反应时间的确定、结果可报告范围测定、精密度和回收实验、血红蛋白与胆红素干扰实验、相关性实验、参考值建立。 实验结果:以PAP-PNa2为底物的ALP的Km=0.376mmol/L,最适pH为10.4,可报告范围为0~1110U/L,回收率分别为98.5%、97.7%、102.6%,和长征试剂盒相比r=0.971,相关性良好。参考值范围为:男,63.1~118.3 U/L,女,52.5~89.0 U/L。 本项目研制的底物PAP-PNa2因在灵敏度、线性范围等方面优于现在临床普遍使用的对-硝基苯基磷酸盐(NPP)底物,在临床参考值和检验结果上与NPP底物有良好的相关性,可以取代NPP方法用于临床碱性磷酸酶(ALP)检测。碱磷酶的检测是医院的常规检测项目之一,我们打算在各大医院推广应用,因此具有较大的推广应用前景,预测推广应用成功后具有可观的经济效益。 |