| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | RT-PCR;检测;汉坦病毒RNA;临床诊断 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 成熟应用阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新技术 | |||
| 成果登记号: | 20070796 | 资源采集日期: | 07-12-30 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 保定市传染病医院 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | 冀科鉴字[2007]第9-202号 | 评价单位: | 河北省科学技术厅 | ||
| 评价日期: | 2007.03.30 | 评价证书号: | 冀科鉴字[2007]第9-202号 | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 不转让 | 推广形式: | 其他 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
项目名称、项目所属科学技术领域、主要内容、特点及应用推广情况 卫生、HFRS的诊断、判断预后、预见疾病的进展程度。应用套式RT-PCR扩增引物,对收集的HFRS病人血清进行基因分型。同时,我们以自行设计和制备的标准曲线,用荧光定量RT-PCR对汉坦病毒RNA进行定量测定,建立起敏感特异的检测汉坦病毒RNA的定量RT-PCR方法。 目前,在国内定量检测汉坦病毒核酸一直是一个空白,传统的诊断方法包括免疫荧光和酶联免疫实验等。汉坦病毒核酸的检测分为定性和定量两种方法。 由于HFRS病人血清中病毒RNA拷贝数较低,一般方法难以测出,采用RT-PCR用于检测汉坦病毒不仅具有敏感性和特异性好等优点,并且可以对汉坦病毒进行型别鉴定。应用套式PCR可以在感染早期从病人血标本中检出汉坦病毒核酸,敏感度可达1个PFU,是理想的诊断方法。实时PCR(real time PCR)较其它传统的定量方法有其自身的优势。其主要优点在于,在一种巨大的动力学范围内测量核酸分子浓度的能力,并且以它的高灵敏与大容量的并行操作为特征,能同时检测许多的样品。 本研究通过采用一些新的技术,研究HFRS病人病毒RNA的变化规律及在临床诊断中的价值,在探索汉坦病毒致病机理的同时,为HFRS的临床诊断提供理论依据。我们应用实时荧光定量PCR技术检测汉坦病毒核酸,填补了国内空白,并首先发现并研究了病毒载量与临床表现的关系发现病毒核酸拷贝数与脏器损害有一定的关系。这对预见疾病的进展程度,判断疾病的预后,指导临床治疗有深远意义。可使病人得到及时有效的治疗,缩短病程,减少并发症的发生,提高治愈率,还可以客观评价抗病毒治疗效果为临床治疗提供依据。提高临床诊断治疗水平。并为今后研究和推广新的诊断和治疗方法打下基础,为病人带来巨大的经济效益和社会效益。 该技术应用于各综合医院、专科医院及有条件的县级医院。荧光定量PCR检测核酸的方法经进一步简化操作步骤,有望开发出简便可靠的诊断试剂盒,使之成为常规检查项目。在解决基层医院样品采集和保存等问题后,各部门通力合作,发挥我们的资源优势,相信能在这方面研究中取得较大的进展。 |