承担吉林省科技发展计划项目：组织工程肝实验研究，2003年-2005年，合同编号：20030436。 　　本研究组应用克隆的人肝细胞生长因子（hHGF）cDNA，构建了重组AcMNPV/hHGF,建立了稳定的AcMNPV/hHGF/Sf9昆虫细胞的rhHGF表达体系和提纯方法。表达合成的rhHGF为成熟型的rhHGF，有强力的抑制HepG2、KP细胞的增殖和促进分散移动的生物活性。经肝素亲和层析和MonoS离子交换层析的连续分离，rhHGF纯度达98%以上。rhHGF合成产量约为5mg/L。 　　并以已建立的稳定的肝细胞二维、三维培养体系为平台，对肝细胞生长因子在肝细胞增殖分化中的调控作用机制进行研究。再通过猪自体肝细胞的脾内移植实验，在肝细胞生长因子的作用下，构建猪脾脏为载体组织工程肝脏。并通过对术后不同时间所取脾脏标本的组织学和超微结构的动态观察，了解组织工程肝组织在脾脏内的形成过程，从而研究组织工程肝组织形成机制。结果显示以猪脾脏为载体植入自体肝细胞，加生长因子rhHGF,经时9个月，经过一系列的增殖、分化、克隆再生、细胞组织化，于脾内构建了类组织工程肝脏。植入肝细胞在脾内形成大量细胞团，细胞团中央可见类似小叶中央静脉的血管结构，细胞呈索条状排列，同时还可见肝细胞间有大量散在的红细胞（类肝索样结构），这些组织现象与肝小叶结构相似。 　　我国肝脏疾病患者多，预后差。目前，肝移植和肝脏组织工程学是仅知的可以有效治疗暴发性肝功能衰竭、终末期肝脏疾病和代谢性肝脏疾病的方法。但肝移植由于存在供体来源有限、费用昂贵、免疫排斥等一系列问题而限制了它的广泛应用。在这种情况下，肝脏组织工程学的研究受到越来越多的重视。肝脏组织工程学的研究主要包括对体外支持系统和组织工程肝脏两个方面的研究。近年来体外支持系统中的组合型生物人工肝支持系统（HBLSS）在临床的应用报道不断增多。它主要应用于暴发性肝功能衰竭、肝移植前等待期、肝移植后无功能期，起着短期支持肝功能，暂时缓解症状，以等待进一步治疗的过渡性作用，却不能长期根本的解决患者肝功能衰竭的问题。组织工程肝脏则既可以对病变肝脏起功能支持作用，又可以永久性的彻底的作为功能衰竭的肝脏的替代品，解决肝功能衰竭。 　　猪肝脏的体积及部分血清学酶学指标均与人体比较接近，在猪体内构建组织工程肝组织的实验研究将为人组织工程肝脏的构建提供大量可靠的参考依据和实验基础。综上，本研究以大型动物猪的脾脏为载体，通过肝细胞生长因子对肝细胞增殖的极强的促进作用，在猪体内构建组织工程肝组织，并阐明了细胞生长因子在组织工程肝组织形成过程中的调控机制。为组织工程肝组织在人体的构建奠定实验基础，从而为肝移植的供体来源问题提供新的根本的解决途径。

　　承担吉林省科技发展计划项目：组织工程肝实验研究，2003年-2005年，合同编号：20030436。 　　本研究组应用克隆的人肝细胞生长因子（hHGF）cDNA，构建了重组AcMNPV/hHGF,建立了稳定的AcMNPV/hHGF/Sf9昆虫细胞的rhHGF表达体系和提纯方法。表达合成的rhHGF为成熟型的rhHGF，有强力的抑制HepG2、KP细胞的增殖和促进分散移动的生物活性。经肝素亲和层析和MonoS离子交换层析的连续分离，rhHGF纯度达98%以上。rhHGF合成产量约为5mg/L。 　　并以已建立的稳定的肝细胞二维、三维培养体系为平台，对肝细胞生长因子在肝细胞增殖分化中的调控作用机制进行研究。再通过猪自体肝细胞的脾内移植实验，在肝细胞生长因子的作用下，构建猪脾脏为载体组织工程肝脏。并通过对术后不同时间所取脾脏标本的组织学和超微结构的动态观察，了解组织工程肝组织在脾脏内的形成过程，从而研究组织工程肝组织形成机制。结果显示以猪脾脏为载体植入自体肝细胞，加生长因子rhHGF,经时9个月，经过一系列的增殖、分化、克隆再生、细胞组织化，于脾内构建了类组织工程肝脏。植入肝细胞在脾内形成大量细胞团，细胞团中央可见类似小叶中央静脉的血管结构，细胞呈索条状排列，同时还可见肝细胞间有大量散在的红细胞（类肝索样结构），这些组织现象与肝小叶结构相似。 　　我国肝脏疾病患者多，预后差。目前，肝移植和肝脏组织工程学是仅知的可以有效治疗暴发性肝功能衰竭、终末期肝脏疾病和代谢性肝脏疾病的方法。但肝移植由于存在供体来源有限、费用昂贵、免疫排斥等一系列问题而限制了它的广泛应用。在这种情况下，肝脏组织工程学的研究受到越来越多的重视。肝脏组织工程学的研究主要包括对体外支持系统和组织工程肝脏两个方面的研究。近年来体外支持系统中的组合型生物人工肝支持系统（HBLSS）在临床的应用报道不断增多。它主要应用于暴发性肝功能衰竭、肝移植前等待期、肝移植后无功能期，起着短期支持肝功能，暂时缓解症状，以等待进一步治疗的过渡性作用，却不能长期根本的解决患者肝功能衰竭的问题。组织工程肝脏则既可以对病变肝脏起功能支持作用，又可以永久性的彻底的作为功能衰竭的肝脏的替代品，解决肝功能衰竭。 　　猪肝脏的体积及部分血清学酶学指标均与人体比较接近，在猪体内构建组织工程肝组织的实验研究将为人组织工程肝脏的构建提供大量可靠的参考依据和实验基础。综上，本研究以大型动物猪的脾脏为载体，通过肝细胞生长因子对肝细胞增殖的极强的促进作用，在猪体内构建组织工程肝组织，并阐明了细胞生长因子在组织工程肝组织形成过程中的调控机制。为组织工程肝组织在人体的构建奠定实验基础，从而为肝移植的供体来源问题提供新的根本的解决途径。