本课题研究是针对现行检测香港海鸥菌的方法缺乏血清学诊断，缺少成熟的快速分离鉴定技术手段，分离鉴定香港海鸥菌需经较复杂的生化试验，整个过程耗时费力，不利于快速检测的缺点。目标是通过与现行方法对比，建立一套简便、实用、特异的香港海鸥菌实验诊断技术。根据香港海鸥菌的生化特性，用筛选与确诊试验检测香港海鸥菌。在改良头孢哌酮麦康凯琼脂平板或头孢哌酮血琼脂平板上，挑取浅灰色、半透明、直径1～1.5㎜的圆形、光滑、不溶血、带有特殊腥味、湿润、略粘不易挑取的菌落划线并穿刺TSI琼脂，并同时分离于血琼脂平板，37℃温箱需氧培养24h。用TSI、革兰氏染色、氧化酶、触酶等4项试验作筛选，凡在TSI上生长，培养基仍保持原有的颜色即TSI（-/-），革兰氏染色镜检为G-杆菌，呈海鸥状或螺旋杆状的可疑菌落，在其相应的血平板上挑取菌落作氧化酶及触酶试验，若两项试验结果均为阳性的菌株，则符合筛选标准；再进一步作PCR确诊试验。采用特异性PCR引物，应用PCR反应体系对符合筛选标准的菌株进行快速检测，凡PCR检测结果阳性的菌株则符合确诊试验标准，判定为香港海菌。 　　本课题研究通过用筛选与确诊试验方法和现行常规生化方法同步检测草鱼、鳙鱼、鲤鱼、鲫鱼等4类样品共计92份和胃肠炎的腹泻患者粪便样品共计211份。经筛选与确诊试验检出香港海鸥菌11株和1株，阳性率分别为11.9﹪（11/92）和0.48﹪（1/211）。与此同时将所有TSI（-/-）的菌株用现行常规生化试验进行：通过精氨酸水解酶，脲酶，氧化酶，触酶等一系列生化试验后，再用手工方法、GNI+或API20NE进行生化鉴定，结果用常规生化试验也在相同编号的鱼类和人体标本中分离到11株和1株香港海鸥菌。研究结果显示筛选与确诊试验和常规生化试验的检测结果完全一致，两方法的符合率为100.00﹪（12/12）。同时，将检出阳性菌株与NCBI中公布的香港海鸥菌16S rRNA序列进行同源性分析，结果12株香港海鸥菌的16S rRNA序列与HKU1株同源性在99.5﹪～100.0﹪之间，仅差1～2个碱基。 　　用筛选与确诊试验检测香港海鸥菌，实现了用时短、灵敏度高、易于操作的优点，既简化了实验步骤，减轻了工作强度，加快了检测速度，也保证了在筛选过程中不漏检香港海鸥菌的目的，具备了简便、快速、准确、特异的优点，对当前缺乏香港海鸥菌血清学诊断，完善香港海鸥菌的分离鉴定方法，提高香港海鸥菌检出率，具有极其重要的现实意；有较强的实用性，有利于实验室开展香港海鸥菌的检测及研究工作，是一套简便、实用、特异的香港海鸥菌实验诊断技术，具有较大的实用价值和推广前景。

本课题研究是针对现行检测香港海鸥菌的方法缺乏血清学诊断，缺少成熟的快速分离鉴定技术手段，分离鉴定香港海鸥菌需经较复杂的生化试验，整个过程耗时费力，不利于快速检测的缺点。目标是通过与现行方法对比，建立一套简便、实用、特异的香港海鸥菌实验诊断技术。根据香港海鸥菌的生化特性，用筛选与确诊试验检测香港海鸥菌。在改良头孢哌酮麦康凯琼脂平板或头孢哌酮血琼脂平板上，挑取浅灰色、半透明、直径1～1.5㎜的圆形、光滑、不溶血、带有特殊腥味、湿润、略粘不易挑取的菌落划线并穿刺TSI琼脂，并同时分离于血琼脂平板，37℃温箱需氧培养24h。用TSI、革兰氏染色、氧化酶、触酶等4项试验作筛选，凡在TSI上生长，培养基仍保持原有的颜色即TSI（-/-），革兰氏染色镜检为G-杆菌，呈海鸥状或螺旋杆状的可疑菌落，在其相应的血平板上挑取菌落作氧化酶及触酶试验，若两项试验结果均为阳性的菌株，则符合筛选标准；再进一步作PCR确诊试验。采用特异性PCR引物，应用PCR反应体系对符合筛选标准的菌株进行快速检测，凡PCR检测结果阳性的菌株则符合确诊试验标准，判定为香港海菌。 　　本课题研究通过用筛选与确诊试验方法和现行常规生化方法同步检测草鱼、鳙鱼、鲤鱼、鲫鱼等4类样品共计92份和胃肠炎的腹泻患者粪便样品共计211份。经筛选与确诊试验检出香港海鸥菌11株和1株，阳性率分别为11.9﹪（11/92）和0.48﹪（1/211）。与此同时将所有TSI（-/-）的菌株用现行常规生化试验进行：通过精氨酸水解酶，脲酶，氧化酶，触酶等一系列生化试验后，再用手工方法、GNI+或API20NE进行生化鉴定，结果用常规生化试验也在相同编号的鱼类和人体标本中分离到11株和1株香港海鸥菌。研究结果显示筛选与确诊试验和常规生化试验的检测结果完全一致，两方法的符合率为100.00﹪（12/12）。同时，将检出阳性菌株与NCBI中公布的香港海鸥菌16S rRNA序列进行同源性分析，结果12株香港海鸥菌的16S rRNA序列与HKU1株同源性在99.5﹪～100.0﹪之间，仅差1～2个碱基。 　　用筛选与确诊试验检测香港海鸥菌，实现了用时短、灵敏度高、易于操作的优点，既简化了实验步骤，减轻了工作强度，加快了检测速度，也保证了在筛选过程中不漏检香港海鸥菌的目的，具备了简便、快速、准确、特异的优点，对当前缺乏香港海鸥菌血清学诊断，完善香港海鸥菌的分离鉴定方法，提高香港海鸥菌检出率，具有极其重要的现实意；有较强的实用性，有利于实验室开展香港海鸥菌的检测及研究工作，是一套简便、实用、特异的香港海鸥菌实验诊断技术，具有较大的实用价值和推广前景。