利用丝状噬菌体展示技术和基因工程技术，构建展示白色念珠菌抗原HSP90表位的杂合噬菌体和HSP90重组蛋白的表达载体，在此基础上构建一种快速、有效的ELISA方法，同时评价杂合噬菌体应用于真菌疫苗研究的潜在价值。 　　1）构建了展示白色念珠菌HSP90 C表位（VKYTS）的杂合噬菌体，免疫原性分析证明展示的抗原表位在没有佐剂的情况下就能够诱导动物产生特异性抗体。噬菌体作为一种新型的表位载体，与化学合成载体匙孔蓝蛋白（KLH）具有相似的作用，能够诱导产生Th1型细胞因子。 　　2）利用基因工程技术构建了HSP90碳端序列的原核表达载体，免疫原性分析证明重组蛋白与天然的HSP90蛋白具有相似的免疫原性。 　　3）分别利用展示C表位的杂合噬菌体和重组蛋白构建了ELISA方法，通过棋盘滴定确定了最佳抗原包被量、血清稀释倍数和酶标抗体稀释倍数后，检测了400例健康人血清，确定了各自体系的cut-off值。 　　4）检测了白色念珠菌易感患者血清。检测结果证明在各种病人血清中都能够检测到HSP90特异性抗体，杂合噬菌体和重组蛋白单独检测具有相似的检出率，二者联合检测能够提高检出率。 　　5）实验结果证明构建的ELISA体系具有较好的稳定性、敏感性和特异性，确定了试剂盒配方。 　　主要技术性能指标： 　　1）构建了展示C表位的杂合噬菌体和重组蛋白表达载体，经过纯化得到了纯度较高的杂合噬菌体和重组蛋白； 　　2）确定了最佳抗原包被量、血清稀释倍数和酶标抗体稀释倍数后，检测了400例健康人血清，确定了各自体系的cut-off值。利用感染患者血清和小鼠感染血清研究证明以展示C表位的杂合噬菌体构建的ELISA体系灵敏性和特异性分别为80.0﹪和90.0﹪，以重组蛋白构建的ELISA体系灵敏性和特异性分别为83.3﹪和90.0﹪； 　　3）优化了ELISA实验条件，ELISA的各种组分、浓度指标、试剂盒配方及使用规程，在鉴定大纲技术报告中详细阐明； 　　4）构建的ELISA方法稳定性较好，可以重复； 　　5）国家授权发明专利一项，申请国家发明专利1项； 　　6）发表相关研究论文3篇，其中1篇为SCI检索论文，目前还有一篇SCI论文在投。

　　利用丝状噬菌体展示技术和基因工程技术，构建展示白色念珠菌抗原HSP90表位的杂合噬菌体和HSP90重组蛋白的表达载体，在此基础上构建一种快速、有效的ELISA方法，同时评价杂合噬菌体应用于真菌疫苗研究的潜在价值。 　　1）构建了展示白色念珠菌HSP90 C表位（VKYTS）的杂合噬菌体，免疫原性分析证明展示的抗原表位在没有佐剂的情况下就能够诱导动物产生特异性抗体。噬菌体作为一种新型的表位载体，与化学合成载体匙孔蓝蛋白（KLH）具有相似的作用，能够诱导产生Th1型细胞因子。 　　2）利用基因工程技术构建了HSP90碳端序列的原核表达载体，免疫原性分析证明重组蛋白与天然的HSP90蛋白具有相似的免疫原性。 　　3）分别利用展示C表位的杂合噬菌体和重组蛋白构建了ELISA方法，通过棋盘滴定确定了最佳抗原包被量、血清稀释倍数和酶标抗体稀释倍数后，检测了400例健康人血清，确定了各自体系的cut-off值。 　　4）检测了白色念珠菌易感患者血清。检测结果证明在各种病人血清中都能够检测到HSP90特异性抗体，杂合噬菌体和重组蛋白单独检测具有相似的检出率，二者联合检测能够提高检出率。 　　5）实验结果证明构建的ELISA体系具有较好的稳定性、敏感性和特异性，确定了试剂盒配方。 　　主要技术性能指标： 　　1）构建了展示C表位的杂合噬菌体和重组蛋白表达载体，经过纯化得到了纯度较高的杂合噬菌体和重组蛋白； 　　2）确定了最佳抗原包被量、血清稀释倍数和酶标抗体稀释倍数后，检测了400例健康人血清，确定了各自体系的cut-off值。利用感染患者血清和小鼠感染血清研究证明以展示C表位的杂合噬菌体构建的ELISA体系灵敏性和特异性分别为80.0﹪和90.0﹪，以重组蛋白构建的ELISA体系灵敏性和特异性分别为83.3﹪和90.0﹪； 　　3）优化了ELISA实验条件，ELISA的各种组分、浓度指标、试剂盒配方及使用规程，在鉴定大纲技术报告中详细阐明； 　　4）构建的ELISA方法稳定性较好，可以重复； 　　5）国家授权发明专利一项，申请国家发明专利1项； 　　6）发表相关研究论文3篇，其中1篇为SCI检索论文，目前还有一篇SCI论文在投。