本项目分别应用免疫组化的方法从蛋白表达的层面上和RT-PCR技术从mRNA水平上检测了铅对脑即刻早基因c-fos，c-jun和bcl-2的表达，探讨了这些基因的表达规律，同时对于这些基因的表达部位有很好的判断。本研究发现IEG的诱导表达既可用于探索化学品毒性作用的靶细胞，又有助于定量探讨剂量-效应（反应）关系。提示我们在化学品毒性的研究和评价中，IEG可能具有比较重要的理论意义和潜在的应用价值。IEG可显示铅作用的脑的部位和靶细胞，而且随着染铅剂量的增高，IEG的表达也呈增高趋势；c-fos，c-jun的表达是铅进一步引起神经细胞凋亡的主要促发因素之一，由此可见，IEG在一些重金属神经毒物的毒性作用过程中，具有不可忽视的影响和作用。而在多种神经毒物毒性评价中，生物标志物（biological markers）的选择和建立是很关键的，根据本研究的结果及目前已探知的IEG诱导表达的机制，本实验室建议，将IEG作为重金属神经毒性检测和评价的效应指标，为今后对神经毒物进行危险度评价奠定了一定的基础。 项目在给母鼠孕期和哺乳期经铅暴露后所产子代通过morris水迷宫检测，发现经孕期和哺乳期铅暴露母鼠所产子鼠学习记忆能力显著下降，进一步采用SSH的方法探索了母鼠铅暴露后代海马组织中的差异表达基因。这些幼鼠海马中明显上调的基因包括一些已知的看家基因和一些与细胞生长调控密切相关的基因如Mdn1、Stk24和Taok2等，这些蛋白与细胞蛋白折叠，调控蛋白复合体的组装，肌蛋白丝的聚合密切相关。在差减文库中鉴定出一个基因编码金属肽酶，推测机体在铅的作用下上调的金属肽酶表达水平，从而增强机体对由于重金属作用导致变性蛋白或组装不正确多肽的内切作用，发挥其抗铅污染的作用。实验筛选到Park2基因，该基因在突触传递、多巴胺的代谢和神经递质的分泌调整等方面具有重要功能，从基因水平上说明铅暴露确实导致学习、记忆和行为的改变。在差减文库中还鉴定得到Map3K10、Nfatc 1、Runx1、Ddx18和Prkdc等基因。这些基因在海马组织中的上调说明铅在该组织中影响广泛，因为这些基因编码了与信号传导相关的蛋白质激酶、ATP结合蛋白、依赖钙调蛋白的磷酸酯酶的和磷酸转移酶等。另外，本实验在差减文库中筛选到Ctcf基因，该基因与DNA结合、DNA甲基化、应激响应以及维持DNA甲基化有密切关系。 研究结果表明，母鼠铅暴露影响了后代幼鼠海马中许多跟应激响应、信号传导和蛋白翻译/折叠相关功能的蛋白，这些蛋白可能与幼鼠学习、记忆能力的显著降低直接相关，为今面铅暴露的信号传导以及对学习、记忆能力的调控和影响机制打下了基础。

本项目分别应用免疫组化的方法从蛋白表达的层面上和RT-PCR技术从mRNA水平上检测了铅对脑即刻早基因c-fos，c-jun和bcl-2的表达，探讨了这些基因的表达规律，同时对于这些基因的表达部位有很好的判断。本研究发现IEG的诱导表达既可用于探索化学品毒性作用的靶细胞，又有助于定量探讨剂量-效应（反应）关系。提示我们在化学品毒性的研究和评价中，IEG可能具有比较重要的理论意义和潜在的应用价值。IEG可显示铅作用的脑的部位和靶细胞，而且随着染铅剂量的增高，IEG的表达也呈增高趋势；c-fos，c-jun的表达是铅进一步引起神经细胞凋亡的主要促发因素之一，由此可见，IEG在一些重金属神经毒物的毒性作用过程中，具有不可忽视的影响和作用。而在多种神经毒物毒性评价中，生物标志物（biological markers）的选择和建立是很关键的，根据本研究的结果及目前已探知的IEG诱导表达的机制，本实验室建议，将IEG作为重金属神经毒性检测和评价的效应指标，为今后对神经毒物进行危险度评价奠定了一定的基础。 项目在给母鼠孕期和哺乳期经铅暴露后所产子代通过morris水迷宫检测，发现经孕期和哺乳期铅暴露母鼠所产子鼠学习记忆能力显著下降，进一步采用SSH的方法探索了母鼠铅暴露后代海马组织中的差异表达基因。这些幼鼠海马中明显上调的基因包括一些已知的看家基因和一些与细胞生长调控密切相关的基因如Mdn1、Stk24和Taok2等，这些蛋白与细胞蛋白折叠，调控蛋白复合体的组装，肌蛋白丝的聚合密切相关。在差减文库中鉴定出一个基因编码金属肽酶，推测机体在铅的作用下上调的金属肽酶表达水平，从而增强机体对由于重金属作用导致变性蛋白或组装不正确多肽的内切作用，发挥其抗铅污染的作用。实验筛选到Park2基因，该基因在突触传递、多巴胺的代谢和神经递质的分泌调整等方面具有重要功能，从基因水平上说明铅暴露确实导致学习、记忆和行为的改变。在差减文库中还鉴定得到Map3K10、Nfatc 1、Runx1、Ddx18和Prkdc等基因。这些基因在海马组织中的上调说明铅在该组织中影响广泛，因为这些基因编码了与信号传导相关的蛋白质激酶、ATP结合蛋白、依赖钙调蛋白的磷酸酯酶的和磷酸转移酶等。另外，本实验在差减文库中筛选到Ctcf基因，该基因与DNA结合、DNA甲基化、应激响应以及维持DNA甲基化有密切关系。 研究结果表明，母鼠铅暴露影响了后代幼鼠海马中许多跟应激响应、信号传导和蛋白翻译/折叠相关功能的蛋白，这些蛋白可能与幼鼠学习、记忆能力的显著降低直接相关，为今面铅暴露的信号传导以及对学习、记忆能力的调控和影响机制打下了基础。