课题来源： 1、成纤维细胞重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究（黑龙江省卫生厅2007-460）。 2、成纤维细胞DNA甲基化重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究（黑龙江省教育厅—面上项目11531145）。 3、成纤维细胞DNA甲基化重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究（哈尔滨医科大学研究生创新基金—优秀博士学位论文培育资助项目HCXB2007004）。 研究目标/论点/创新：DNA 甲基化是基因组DNA的一种主要的表观遗传修饰形式，是调节基因组功能的重要手段。在细胞分化的过程中，基因组的甲基化模式将遗传给后代细胞。但在哺乳动物的生殖细胞发育时期和植入前胚胎期，其基因组范围内的甲基化模式在大规模的去甲基化和接下来的再甲基化过程发生重编程，从而产生具有发育潜能的细胞。本项目通过联合应用甲基转移酶抑制剂5-氮-2|-脱氧胞苷（5-aza-2|-deoxycytidine，5-aza-dC）和去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（Trichstatin A，TSA）对NIH/3T3 胎鼠成纤维细胞进行DNA去甲基化重编程，同时应用F9 小鼠畸胎瘤细胞和胚胎干细胞全细胞抽提物对NIH/3T3 细胞进行质膜透化和共孵育处理，以期使NIH/3T3细胞DNA整体甲基化水平下降，细胞去分化，表达与多向分化潜能性密切相关的基因。完成的主要内容包括： （1）无论是药物处理组还是细胞抽提物孵育组，处理后的NIH/3T3细胞均呈现出Oct4，Sox2，c-Myc 和Klf4的基因表达上调； （2）并且表观修饰后的NIH/3T3 细胞整体DNA 甲基化水平出现明显下降； （3）应用RA 对药物重编程的体细胞进行诱导后，呈现出neuronal class IIIβ- tubulin，NSE，nestin和 NF-L 的阳性表达； （4）经5-Azacytidine和TSA诱导MSCs后，我们检测到神经干/祖细胞标记物Nestin、Sox2的表达，在共培养组中检测到神经元标志物Tuj1的表达。 社会经济效益： 有关于体细胞和成体干细胞的甲基化问题是现在的研究热点，对成纤维细胞和成体干细胞进行甲基化重编程，使其具有多能性，并且诱导分化为目标靶细胞，以期将来应用于临床疾病的治疗，具有广泛的现实意义和前景。本项目研究成果以论文形式发表在《Molecular Biology Reports》（SCI收录）、《Biochemical and Biophysical Research Communications》（SCI收录）、《Anatomical Record》（SCI收录）等国内外著名生命科学杂志。

课题来源： 1、成纤维细胞重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究（黑龙江省卫生厅2007-460）。 2、成纤维细胞DNA甲基化重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究（黑龙江省教育厅—面上项目11531145）。 3、成纤维细胞DNA甲基化重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究（哈尔滨医科大学研究生创新基金—优秀博士学位论文培育资助项目HCXB2007004）。 研究目标/论点/创新：DNA 甲基化是基因组DNA的一种主要的表观遗传修饰形式，是调节基因组功能的重要手段。在细胞分化的过程中，基因组的甲基化模式将遗传给后代细胞。但在哺乳动物的生殖细胞发育时期和植入前胚胎期，其基因组范围内的甲基化模式在大规模的去甲基化和接下来的再甲基化过程发生重编程，从而产生具有发育潜能的细胞。本项目通过联合应用甲基转移酶抑制剂5-氮-2|-脱氧胞苷（5-aza-2|-deoxycytidine，5-aza-dC）和去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（Trichstatin A，TSA）对NIH/3T3 胎鼠成纤维细胞进行DNA去甲基化重编程，同时应用F9 小鼠畸胎瘤细胞和胚胎干细胞全细胞抽提物对NIH/3T3 细胞进行质膜透化和共孵育处理，以期使NIH/3T3细胞DNA整体甲基化水平下降，细胞去分化，表达与多向分化潜能性密切相关的基因。完成的主要内容包括： （1）无论是药物处理组还是细胞抽提物孵育组，处理后的NIH/3T3细胞均呈现出Oct4，Sox2，c-Myc 和Klf4的基因表达上调； （2）并且表观修饰后的NIH/3T3 细胞整体DNA 甲基化水平出现明显下降； （3）应用RA 对药物重编程的体细胞进行诱导后，呈现出neuronal class IIIβ- tubulin，NSE，nestin和 NF-L 的阳性表达； （4）经5-Azacytidine和TSA诱导MSCs后，我们检测到神经干/祖细胞标记物Nestin、Sox2的表达，在共培养组中检测到神经元标志物Tuj1的表达。 社会经济效益： 有关于体细胞和成体干细胞的甲基化问题是现在的研究热点，对成纤维细胞和成体干细胞进行甲基化重编程，使其具有多能性，并且诱导分化为目标靶细胞，以期将来应用于临床疾病的治疗，具有广泛的现实意义和前景。本项目研究成果以论文形式发表在《Molecular Biology Reports》（SCI收录）、《Biochemical and Biophysical Research Communications》（SCI收录）、《Anatomical Record》（SCI收录）等国内外著名生命科学杂志。