microRNA(miRNA)是近年来发现的一种进化上非常保守的内源性非蛋白质编码的单链RNA分子，它们广泛存在于植物、线虫到人类的细胞中，其在基因表达调控中发挥着重要作用。microRNA能通过与靶mRNA特异性碱基互补配对，引起靶mRNA降解或抑制其翻译，从而参与基因表达调控。miRNA调控基因表达的功能与来源无关，因此miRNA已成为继siRNA之后RNA干扰领域一种重要的研究手段和实验工具。 p16基因是一种抑癌基因，近年来发现它在细胞衰老过程中发挥重要作用。P16是CDK4和CDK6的抑制物，P16通过与CDK4和CDK6结合，阻滞CDK4、CDK6与cyclinD结合，抑制cyclinD-CDK复合物的活性，阻断对Rb的磷酸化，使细胞停滞在G0期，不能进入S期。P16在许多细胞进入衰老时均过度表达，其持续表达导致了细胞衰老。目前，P16已成为细胞衰老研究的热门靶点之一。 鉴于针对基因不同片段为模板构建的miRNA干扰体系对目的基因的干扰效率不同，本研究在实验中设计了两组miRNA序列，并成功构建相应的miRNA干扰载体，已选择抑制效果较好的一组完成后续的研究。本研究证实，两组载体构建正确，其转染目的细胞辐射诱导衰老的MEF细胞后对细胞mRNA水平有明显抑制效果，证明该质粒可用于miRNA靶向P16的衰老基因的研究。

microRNA(miRNA)是近年来发现的一种进化上非常保守的内源性非蛋白质编码的单链RNA分子，它们广泛存在于植物、线虫到人类的细胞中，其在基因表达调控中发挥着重要作用。microRNA能通过与靶mRNA特异性碱基互补配对，引起靶mRNA降解或抑制其翻译，从而参与基因表达调控。miRNA调控基因表达的功能与来源无关，因此miRNA已成为继siRNA之后RNA干扰领域一种重要的研究手段和实验工具。 p16基因是一种抑癌基因，近年来发现它在细胞衰老过程中发挥重要作用。P16是CDK4和CDK6的抑制物，P16通过与CDK4和CDK6结合，阻滞CDK4、CDK6与cyclinD结合，抑制cyclinD-CDK复合物的活性，阻断对Rb的磷酸化，使细胞停滞在G0期，不能进入S期。P16在许多细胞进入衰老时均过度表达，其持续表达导致了细胞衰老。目前，P16已成为细胞衰老研究的热门靶点之一。 鉴于针对基因不同片段为模板构建的miRNA干扰体系对目的基因的干扰效率不同，本研究在实验中设计了两组miRNA序列，并成功构建相应的miRNA干扰载体，已选择抑制效果较好的一组完成后续的研究。本研究证实，两组载体构建正确，其转染目的细胞辐射诱导衰老的MEF细胞后对细胞mRNA水平有明显抑制效果，证明该质粒可用于miRNA靶向P16的衰老基因的研究。