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双试剂型连续监测法测定二胺氧化酶活性浓度的研究

成果基本信息
关键词: 二胺氧化酶;连续监测法;肠粘膜损伤
成果类别: 应用技术 技术成熟度: 成熟应用阶段
体现形式(基础理论类): / 体现形式(应用技术类): 新技术
成果登记号: 津20111130 资源采集日期: 11-10-10
研究情况
单位名称: 天津市第四医院 技术水平: 国内领先
评价证书号: / 评价单位: 天津市卫生局
评价日期: 2011.05.16 评价证书号: /
转化情况
转让范围: 允许出口 推广形式: 合作开发
已转让企业数(个): 0
联系方式
联系人(平台): 孵化基地 联系人(平台)电话: 0771-3394012
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成果简介

  本研究通过试验,确定DAO的测定方法以pH 8.0、浓度为100 mmol/L的Tris-HCl为反应缓冲体系,以3.2 mmol/L丁二胺为最佳底物浓度,试剂I和试剂II按4:1与样品反应,在340nm波长(副波长410nm)下200-300s期间连续监测NADH吸光度的下降速率计算求得DAO的活性。该方法线性范围为0-100U/L,不精密度均小于5%,回收率分别为95.8%和98 %,胆红素<150umol/L、血红蛋白<400mg/dL、血脂<400mg/dL、NH4+<100umol/L、MAO<120U/L时对本实验无明显干扰,试剂在两周之内稳定,正常人血清DAO活性为3.9士2.96U/L,诊断参考值为0--9.7U/L,对烧伤后肠道粘膜屏障功能障碍或衰竭诊断的ROC曲线下面积为0.96,表明检测方法诊断准确度良好。   研究建立的DAO酶活性浓度双试型连续监测法灵敏度高、重复性好、抗干扰力强、诊断准确度良好,试剂稳定性满足日常工作需要、适合全自动生化分析仪批量检测,可作为临床常规检测方法,用于肠粘膜损伤的诊断。本研究通过实验建立DAO活性浓度连续监测方法,研制成双试剂型试剂,确定了全自动生化仪实验参数,可以应用于全自动生化仪,准确测定血清中DAO活性浓度,为了解严重烧伤或严重创伤后早期肠粘膜损害程度,探索保护肠粘膜的临床治疗方法提供诊断依据。本成果进一步推广到其他学科,还可对了解胎盘和胎儿发育状况,和肿瘤研究方面的研究起重要作用,其社会效益将更加显著。研制成的双试剂型试剂为DAO检测方法的标准化和今后试剂盒的研制开发打下基础,具有进一步商品化的前景。

成果名称: 双试剂型连续监测法测定二胺氧化酶活性浓度的研究 关键词: 二胺氧化酶;连续监测法;肠粘膜损伤
成果类别: 应用技术 一级分类名称: 医学生物工程
二级分类名称: / 三级分类名称: /
研究起止时间: 2003.08 至2011.03 成果体现形式(应用技术类): 新技术
成果属性: / 成果体现形式(基础理论类): /
技术成熟度: 成熟应用阶段 技术水平: 国内领先
研究形式: 与院校、所合作 学科分类1: 320.11
单位名称: 天津市第四医院 学科分类2: /
中图分类号1: R446.112 所属高新技术类别: 生物、医药和医疗器械
中图分类号2: / 课题来源: 部门基金
应用行业: 卫生、社会保障和社会福利业 课题立项名称:
国家科技计划子类别: / 课题立项编号: 03kz10
经费实际投入额 (万元): 2 评价单位: 天津市卫生局
评价形式: 评估 应用状态: 稳定应用
评价日期: 2011.05.16 转让范围: 允许出口
评价证书号: / 推荐单位: 天津市卫生局
推广形式: 合作开发 成果登记号: 津20111130
成果简介:

  本研究通过试验,确定DAO的测定方法以pH 8.0、浓度为100 mmol/L的Tris-HCl为反应缓冲体系,以3.2 mmol/L丁二胺为最佳底物浓度,试剂I和试剂II按4:1与样品反应,在340nm波长(副波长410nm)下200-300s期间连续监测NADH吸光度的下降速率计算求得DAO的活性。该方法线性范围为0-100U/L,不精密度均小于5%,回收率分别为95.8%和98 %,胆红素<150umol/L、血红蛋白<400mg/dL、血脂<400mg/dL、NH4+<100umol/L、MAO<120U/L时对本实验无明显干扰,试剂在两周之内稳定,正常人血清DAO活性为3.9士2.96U/L,诊断参考值为0--9.7U/L,对烧伤后肠道粘膜屏障功能障碍或衰竭诊断的ROC曲线下面积为0.96,表明检测方法诊断准确度良好。   研究建立的DAO酶活性浓度双试型连续监测法灵敏度高、重复性好、抗干扰力强、诊断准确度良好,试剂稳定性满足日常工作需要、适合全自动生化分析仪批量检测,可作为临床常规检测方法,用于肠粘膜损伤的诊断。本研究通过实验建立DAO活性浓度连续监测方法,研制成双试剂型试剂,确定了全自动生化仪实验参数,可以应用于全自动生化仪,准确测定血清中DAO活性浓度,为了解严重烧伤或严重创伤后早期肠粘膜损害程度,探索保护肠粘膜的临床治疗方法提供诊断依据。本成果进一步推广到其他学科,还可对了解胎盘和胎儿发育状况,和肿瘤研究方面的研究起重要作用,其社会效益将更加显著。研制成的双试剂型试剂为DAO检测方法的标准化和今后试剂盒的研制开发打下基础,具有进一步商品化的前景。

联系人: 周雁 成果登记日期: 11-5-16
联系人email: enwww007@sina.com 单位代码: 91200133
邮政编码222: 300222 联系人电话: 022-28181364
单位传真: 022-28180714 单位通讯地址: 天津市河西区微山路4号
单位所在省市: 天津市 单位电话: 022-28116945;28181364
转让收入(万元): 0 单位属性: 医疗机构
合作完成单位: 天津市泰达医院 已转让企业数(个): 0
成果发布年份: 2011 知识产权形式:
成果完成人: 张宏伟;胡进访;吴雁;王玉莲;李英;付建荣;高洁;张楷莹 资源采集日期: 11-10-10

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