| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 二胺氧化酶;连续监测法;肠粘膜损伤 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 成熟应用阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新技术 | |||
| 成果登记号: | 津20111130 | 资源采集日期: | 11-10-10 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 天津市第四医院 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | 天津市卫生局 | ||
| 评价日期: | 2011.05.16 | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 允许出口 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
本研究通过试验,确定DAO的测定方法以pH 8.0、浓度为100 mmol/L的Tris-HCl为反应缓冲体系,以3.2 mmol/L丁二胺为最佳底物浓度,试剂I和试剂II按4:1与样品反应,在340nm波长(副波长410nm)下200-300s期间连续监测NADH吸光度的下降速率计算求得DAO的活性。该方法线性范围为0-100U/L,不精密度均小于5%,回收率分别为95.8%和98 %,胆红素<150umol/L、血红蛋白<400mg/dL、血脂<400mg/dL、NH4+<100umol/L、MAO<120U/L时对本实验无明显干扰,试剂在两周之内稳定,正常人血清DAO活性为3.9士2.96U/L,诊断参考值为0--9.7U/L,对烧伤后肠道粘膜屏障功能障碍或衰竭诊断的ROC曲线下面积为0.96,表明检测方法诊断准确度良好。 研究建立的DAO酶活性浓度双试型连续监测法灵敏度高、重复性好、抗干扰力强、诊断准确度良好,试剂稳定性满足日常工作需要、适合全自动生化分析仪批量检测,可作为临床常规检测方法,用于肠粘膜损伤的诊断。本研究通过实验建立DAO活性浓度连续监测方法,研制成双试剂型试剂,确定了全自动生化仪实验参数,可以应用于全自动生化仪,准确测定血清中DAO活性浓度,为了解严重烧伤或严重创伤后早期肠粘膜损害程度,探索保护肠粘膜的临床治疗方法提供诊断依据。本成果进一步推广到其他学科,还可对了解胎盘和胎儿发育状况,和肿瘤研究方面的研究起重要作用,其社会效益将更加显著。研制成的双试剂型试剂为DAO检测方法的标准化和今后试剂盒的研制开发打下基础,具有进一步商品化的前景。 |