丙氨酸氨基转移酶（ALT）是肝细胞损伤重要指标之一，我国《献血法》规定：需要对献血者进行ALT筛查。目前用于献血员ALT筛查的检测方法有赖氏法、紫外速率法、丙酮酸氧化酶法等，但是这些方法是酶促反应，除了需要较长反应时间，还需要分光光度计、生化分析仪或酶标仪等特殊检测设备，且受环境温度影响大，目前街头采血车环境温度难以保证反应精准，所以传统检测方法难以满足街头流动献血车上对献血者筛查快速检测需要。因ALT不合格造成的采血后血液报废率达6～8%。因此，研制ALT快速检测试剂有着较大的社会效益和经济效益。免疫金标检测方法具有特异性高，操作简便、快速、便于携带等优点。为此我们通过依据哺乳动物和人ALT基因保守序列的高度同源性，设计免疫原（源自猪心ALT）和检测原（人血清）。应用单克隆抗体技术筛选出高滴度抗ALT抗体杂交瘤，得到1株能稳定分泌抗ALT单克隆抗体的杂交瘤细胞株。该株单抗能识别人血清中的ALT，而与血清中的其它蛋白无交叉反应，显示了很好的特异性。同时，制备出高纯度抗ALT抗体，对杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体进行纯化和鉴定，并申请专利一项。对单抗进行了酶标记，建立了ALT的双抗体夹心ELISA检测方法、金标检测方法。初步开展了ALT免疫金标快速检测试剂研制工作，为检测试剂盒的临床应用奠定了实验基础。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）是肝细胞损伤重要指标之一，我国《献血法》规定：需要对献血者进行ALT筛查。目前用于献血员ALT筛查的检测方法有赖氏法、紫外速率法、丙酮酸氧化酶法等，但是这些方法是酶促反应，除了需要较长反应时间，还需要分光光度计、生化分析仪或酶标仪等特殊检测设备，且受环境温度影响大，目前街头采血车环境温度难以保证反应精准，所以传统检测方法难以满足街头流动献血车上对献血者筛查快速检测需要。因ALT不合格造成的采血后血液报废率达6～8%。因此，研制ALT快速检测试剂有着较大的社会效益和经济效益。免疫金标检测方法具有特异性高，操作简便、快速、便于携带等优点。为此我们通过依据哺乳动物和人ALT基因保守序列的高度同源性，设计免疫原（源自猪心ALT）和检测原（人血清）。应用单克隆抗体技术筛选出高滴度抗ALT抗体杂交瘤，得到1株能稳定分泌抗ALT单克隆抗体的杂交瘤细胞株。该株单抗能识别人血清中的ALT，而与血清中的其它蛋白无交叉反应，显示了很好的特异性。同时，制备出高纯度抗ALT抗体，对杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体进行纯化和鉴定，并申请专利一项。对单抗进行了酶标记，建立了ALT的双抗体夹心ELISA检测方法、金标检测方法。初步开展了ALT免疫金标快速检测试剂研制工作，为检测试剂盒的临床应用奠定了实验基础。