| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 酶法;血清铁;检测体系 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 初期阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新工艺 | |||
| 成果登记号: | 津20110340 | 资源采集日期: | 11-10-10 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 天津市血液中心 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | 天津市卫生局 | ||
| 评价日期: | 2010.12.25 | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 限国内转让 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
《血清铁酶检测体系的建立与应用》为市卫生局级科研课题(编号:04kz59,经费自筹),是通过参考国外有关酶法检测血清铁含量的有关报道,并结合全自动生化仪的特点,进行方法学研究。通过对异柠檬酸脱氢酶(Isocitrate dehydrogenase,ICD或ICDH)、顺乌头酸酶(Acoinase)进行酶促反应动力学研究,建立了顺乌头酸酶—异柠檬酸脱氢酶反应体系,根据反应产物还原型辅酶Ⅱ(NADPH)在340 nm波长下的吸光度与酶活性存在的正比关系,测定所建立反应酶体系的活性大小。从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶—异柠檬酸脱氢酶反应体系,利用该体系对铁离子的浓度进行检测并对血清铁含量测定进行了探讨。 本研究经查新检索结果表明,在国内外首次通过对异柠檬酸脱氢酶动力学研究、测定方法学评价,确立异柠檬酸脱氢酶活性测定技术,并将该技术应用于全自动生化仪。首次利用提纯、透析技术,分别提取新鲜猪肝线粒体中的顺乌头酸酶和细胞质中的异柠檬酸脱氢酶,建立顺乌头酸酶—异柠檬酸脱氢酶的反应体系。首次通过向顺乌头酸酶—异柠檬酸脱氢酶混合酶体系先添加Fe2+螯合剂1,10—邻二氮杂菲,再加入Fe2+铁离子,进行终产物NADPH检测,从而对血清铁含量进行酶法测定。该技术体系可用于今后涉及生物氧化—三羧酸循环中柠檬酸到异柠檬酸的代谢步骤中各物质的检测,对血清铁进行检测为临床疾病诊断与治疗提供依据,具有一定的实用价值。该研究培养本科生2名,2名硕士研究生参与实验,发表论文3篇均为核心期刊,1篇论文在输血大会上交流,获得新技术填补空白项目一项。 |