| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 血涂片染色;染浴条件;稀释液 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 初期阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新技术 | |||
| 成果登记号: | 津20110113 | 资源采集日期: | 11-10-10 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 天津市第二医院 | 技术水平: | 国内先进 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | 天津市卫生局 | ||
| 评价日期: | 2010.12.23 | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 不转让 | 推广形式: | 其他 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
1984年国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐Romanowsky染色法为血涂片细胞常规染色参考方法,1986年美国临床实验标准化委员会(NCCLS)也公布Romanowsky染色法为血细胞标准染色方法。国内常使用瑞氏染色法或瑞—姬氏染色法,诸多染色方法都沿用pH值6.4~7.0混合磷酸盐缓冲液为稀释液。如瑞氏染色法为KH2PO4 0.3g和Na2HPO4 0.2g∕L水溶液(理论pH值为7.0),瑞—姬氏染色法为KH2PO4 6.64g和Na2HPO4 2.56g∕L水溶液(理论pH值为6.8)。但稀释液及其pH值的优选原理在专业理论中缺乏详尽论述和明确依据,在实际工作中,较为常用的瑞氏染色法染制的血涂片也容易出现细胞核结构着染不清晰、胞质颗粒着色较浅、细胞染色偏蓝或偏红等染色效果不满意现象。而且,含磷制剂的排放污染会造成自然界水体富氧化污染,不利于环保。 该研究通过设计实验将同一份EDTA-K2抗凝静脉血推制的同批血涂片经无水乙醇浸泡固定3min后,分别用pH5.0、5.5、6.0、6.5、7.0的磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液配制的稀释染液(1:3)分别同时染色10、20、30min,冲洗风干,观察血膜外观色泽,油镜比对细胞染色效果。pH值6.0乙酸—乙酸钠缓冲液染色的血涂片红细胞着色良好,白细胞核、胞质颗粒着色均良好,色泽均匀,对比分明;混合磷酸盐缓冲液染液的染色效果类似,但白细胞核有色素聚集现象。在20′、30′时间染色的血膜外观呈淡蓝红色,镜下观察红细胞着色良好,白细胞核、胞质颗粒着色均良好,色泽均匀,对比分明;混合磷酸盐缓冲液染液的染色效果有浅染或过染现象。同时注意到血涂片细胞常规染色是以蛋白质肽链上可电离的—NH3+和-COO-基团吸附结合色素分子为主的染色作用,染浴pH值应设定在大部分氨基酸平均等电点的pH 6.0条件。该结论符合传统等离子状态染色学说及染料应用化学理论。 |