青光眼是世界上第二大致盲性疾病，全世界大约有660万人患病，其导致视功能损害的病理基础是视网膜神经节细胞（RGCs）进行性死亡和视神经纤维丢失，研究表明视网膜神经节细胞的选择性丢失与机体免疫潜能密切相关。目前研究已证实，中枢神经损伤后Nogo抑制因子释放增加、表达增强，启动了神经元的凋亡过程，导致了神经元死亡。Nogo蛋白是一种碳端和氮端在膜内，而66个氨基酸残基在胞膜外形成拓扑结构，在Nogo-A、-B、-C中都可以检测到这一完全独立的且具有抑制活性的结构域-Nogo-66，Nogo-66与NgR通过特异性的配体受体式结合，介导了Nogo-66的中枢神经抑制活性。因此，我们希望将Nogo-66蛋白作为抗原，通过疫苗接种增强T淋巴细胞介导的保护性自身免疫反应，或刺激机体产生抗体中和抑制分子，来达到对慢性青光眼患者的视神经保护的目的。为此，我们采用了实验动物学、组织免疫学和细胞免疫学等技术，在成功建立了639只SD大鼠慢性高眼压模型的基础上，开展了以下系列研究： 1.观察Nogo-66蛋白及Nogo-66受体（NgR）在正常成年SD大鼠视网膜的表达和分布，初步了解阻遏Nogo抑制因子的可行性； 2.制作SD大鼠慢性高眼压青光眼模型，观察视网膜Nogo抑制因子的表达变化； 3.在T细胞抗原表位分析基础上，通过小胶质细胞培养和外周免疫对Nogo-66蛋白进行免疫原性分析； 4.制备Nogo-66蛋白疫苗，进行动物疫苗接种，并对疫苗的安全性和免疫原性进行研究； 5.观察Nogo-66蛋白疫苗对SD大鼠慢性青光眼视神经损伤的保护作用，并研究其保护机制。为保护青光眼患者视神经研究奠定理论基础是本研究的主要目的。 本课题主要创新点如下： 1.国内率先通过Nogo-66蛋白与视网膜小胶质细胞共培养，以及Nogo蛋白接种SD大鼠发现：Nogo-66蛋白对视网膜小胶质细胞具有免疫原性，并能够刺激大鼠产生致敏T淋巴细胞，提高血清Nogo-66蛋白特异性IgG抗体浓度。 2.提出通过制备Nogo-66蛋白疫苗，接种慢性高眼压SD大鼠，促进大鼠T淋巴细胞增殖，刺激Nogo-66抗体IgG生成增加，对抗Nogo-66蛋白的视神经损伤作用的构想。 3.成功制备了以壳聚糖为佐剂的Nogo-66蛋白疫苗，通过全身接种、玻璃体内接种、结膜内接种的方式，证明了该蛋白疫苗不仅可以促进视网膜神经节细胞存活，减少视神经纤维进一步损害，而且可以使视神经功能得到一定保护。 4.初步探讨了Nogo-66蛋白疫苗对视神经保护作用的机制。 该课题发表论文共23篇（SCI论著1篇，中文统计源期刊论著15篇，综述7篇）。引用次数中国科技期刊引文和中国引文数据库分别为31和41次，国外科学引文索引3次。参编专著1部。获国家实用新型专利1项。培养硕、博研究生共7名。本项目于2007年至2009年与美国wills眼科研究所和加州大学圣地亚哥分校合作研究。该项目成员曾就该项目在柏林世界眼科大会、中华医学会全国眼科大会上发言。本课题与中山大学中山眼科中心、四川大学附属华西医院、北京协和医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、重庆医科大学第一附属医院等国内一流院校的眼科教授有广泛的合作和交流。研究成果中的相关技术，受到第三军医大学西南眼科医院、第四军医大学唐都医院，武警重庆市总队医院、四川泸州医学院附属医院、重庆医科大学第一附属医院推广应用，均认为本项目对Nogo蛋白疫苗对视神经损伤的保护作用及机制进行了系统深入的研究，属国内领先，具有较大的社会意义和经济效益。

青光眼是世界上第二大致盲性疾病，全世界大约有660万人患病，其导致视功能损害的病理基础是视网膜神经节细胞（RGCs）进行性死亡和视神经纤维丢失，研究表明视网膜神经节细胞的选择性丢失与机体免疫潜能密切相关。目前研究已证实，中枢神经损伤后Nogo抑制因子释放增加、表达增强，启动了神经元的凋亡过程，导致了神经元死亡。Nogo蛋白是一种碳端和氮端在膜内，而66个氨基酸残基在胞膜外形成拓扑结构，在Nogo-A、-B、-C中都可以检测到这一完全独立的且具有抑制活性的结构域-Nogo-66，Nogo-66与NgR通过特异性的配体受体式结合，介导了Nogo-66的中枢神经抑制活性。因此，我们希望将Nogo-66蛋白作为抗原，通过疫苗接种增强T淋巴细胞介导的保护性自身免疫反应，或刺激机体产生抗体中和抑制分子，来达到对慢性青光眼患者的视神经保护的目的。为此，我们采用了实验动物学、组织免疫学和细胞免疫学等技术，在成功建立了639只SD大鼠慢性高眼压模型的基础上，开展了以下系列研究： 1.观察Nogo-66蛋白及Nogo-66受体（NgR）在正常成年SD大鼠视网膜的表达和分布，初步了解阻遏Nogo抑制因子的可行性； 2.制作SD大鼠慢性高眼压青光眼模型，观察视网膜Nogo抑制因子的表达变化； 3.在T细胞抗原表位分析基础上，通过小胶质细胞培养和外周免疫对Nogo-66蛋白进行免疫原性分析； 4.制备Nogo-66蛋白疫苗，进行动物疫苗接种，并对疫苗的安全性和免疫原性进行研究； 5.观察Nogo-66蛋白疫苗对SD大鼠慢性青光眼视神经损伤的保护作用，并研究其保护机制。为保护青光眼患者视神经研究奠定理论基础是本研究的主要目的。 本课题主要创新点如下： 1.国内率先通过Nogo-66蛋白与视网膜小胶质细胞共培养，以及Nogo蛋白接种SD大鼠发现：Nogo-66蛋白对视网膜小胶质细胞具有免疫原性，并能够刺激大鼠产生致敏T淋巴细胞，提高血清Nogo-66蛋白特异性IgG抗体浓度。 2.提出通过制备Nogo-66蛋白疫苗，接种慢性高眼压SD大鼠，促进大鼠T淋巴细胞增殖，刺激Nogo-66抗体IgG生成增加，对抗Nogo-66蛋白的视神经损伤作用的构想。 3.成功制备了以壳聚糖为佐剂的Nogo-66蛋白疫苗，通过全身接种、玻璃体内接种、结膜内接种的方式，证明了该蛋白疫苗不仅可以促进视网膜神经节细胞存活，减少视神经纤维进一步损害，而且可以使视神经功能得到一定保护。 4.初步探讨了Nogo-66蛋白疫苗对视神经保护作用的机制。 该课题发表论文共23篇（SCI论著1篇，中文统计源期刊论著15篇，综述7篇）。引用次数中国科技期刊引文和中国引文数据库分别为31和41次，国外科学引文索引3次。参编专著1部。获国家实用新型专利1项。培养硕、博研究生共7名。本项目于2007年至2009年与美国wills眼科研究所和加州大学圣地亚哥分校合作研究。该项目成员曾就该项目在柏林世界眼科大会、中华医学会全国眼科大会上发言。本课题与中山大学中山眼科中心、四川大学附属华西医院、北京协和医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、重庆医科大学第一附属医院等国内一流院校的眼科教授有广泛的合作和交流。研究成果中的相关技术，受到第三军医大学西南眼科医院、第四军医大学唐都医院，武警重庆市总队医院、四川泸州医学院附属医院、重庆医科大学第一附属医院推广应用，均认为本项目对Nogo蛋白疫苗对视神经损伤的保护作用及机制进行了系统深入的研究，属国内领先，具有较大的社会意义和经济效益。