一、课题来源与背景 　　1、课题来源：自选课题 　　2、背景：系统性红斑狼疮(SLE) 是伴有多系统、多器官损伤的一种自身免疫性结缔组织病。目前，SLE的发病机制仍未完全清楚，可能是在遗传因素、环境因素及性激素影响下，发生了异常免疫应答，体内产生大量致病性自身抗体和免疫复合物引起组织损伤。而且SLE不能根治，因此提倡早期诊断、早期治疗及早期缓解。随着系统性红斑狼疮研究的深入，SLE的诊断、治疗也得到很快的发展。从2006年起我们院检验科即开展了ANA、dsDNA、抗ENA抗体的检测。通过研究分析，ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体联合检测对SLE的诊断、病情发展及其治疗效果均有重要的临床意义。 　　二、技术原理及性能指标 　　技术原理：SLE患者血清中自身抗体主要有ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体，三种抗体检测的基本原理简述如下。 　　1、ANA测定原理：采用间接免疫荧光法检测，将稀释血清与生物载片(反应区内固定有包被基质的生物薄片)温育，如果样本是阳性的，特异性IgG、IgA和IgM抗体与相应的抗原结合。在第二次温育时，荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应，形成荧光显微镜下所观察到的特异性荧光模式。 　　2、抗dsDNA测定原理：用胶体金斑点渗滤法检测，采用高特异性的亲和素－生物素系统将双链DNA包被在硝基膜上，结合胶体金标记和斑点渗滤技术，检测血清中的抗双链DNA抗体。 　　3、抗ENA抗体测定原理：采用免疫印迹技术（IBT）测定，将具有多种抗原性的细胞核盐水可提取性抗原（ENA）转印于硝酸纤维膜上，根据区带的数量和分子量识别抗原的表位，进而检测到相应抗ENA抗体。 　　性能指标： 　　1、ANA是一组将真核细胞的各种核成分作为靶抗原的自身抗体的总称，是SLE重要的筛选指标。本研究中，ANA的阳性率为89.1﹪，明显高于正常人（P〈0.01），与正常人鉴别的特异性为96.3﹪，诊断效率为92.4﹪。 　　2、抗dsDNA是SLE的标志性抗体，疾病的活动性指标，在本研究中，抗dsDNA的阳性率为47.8﹪，明显高于正常人（P＜0.01），与正常人鉴别的特异性非常高达到100.0﹪，诊断效率为72.1﹪。SLE伴发狼疮性肾炎患者（LN组）抗dsDNA的阳性率为75.0﹪，明显高于非LN组的26.9﹪，（P＜0.01）。 　　3、抗ENA抗体属于抗非组蛋白抗体，在本研究中抗ENA抗体总阳性率为50.0﹪，明显高于正常人（P＜0.01）；与正常人鉴别的特异性达到100.0﹪，诊断效率为73.3﹪。抗ENA抗体采用免疫印迹技术可检测到抗Sm抗体、抗SSA、抗SSB、抗U1RNP、抗rRNP、抗scl-70、抗Jo-1等7种相应的ENA抗体。其中的抗Sm抗体仅发现SLE中，其存在常提示中枢神经受累。 　　4、ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体联合检测的阳性率为94.5﹪，与正常人比较（P＜0.01）特异性为96.3﹪，诊断效率为95.3﹪，分别高于单项抗体的诊断效率。 　　三、技术的创造性与先进性 　　1、该成果采用ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体的联合检测SLE，可避免因单项检测出现的漏诊情况，提高了SLE的检出率，有利于SLE病人早期诊断，为临床治疗提供了参考依据，成果达省内先进。 　　2、该成果操作简便、方法易于掌握，适宜于基层医院推广应用。 　　四、技术的成熟程度、适用范围和安全性 　　ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体的联合检测的技术已比较成熟，适用于SLE的诊断、鉴别诊断、病情监测及疗效判断，同时还适用于其它自身免疫性疾病的诊断。而且此项目检测对患者无损伤，既安全又可靠。 　　五、应用情况及存在问题 　　已广泛用于SLE的实验室诊断以及其它自身免疫性疾病的实验室诊断，存在的问题是，ANA、抗ENA抗体测定易受反应温度、冲洗等因素影响。

　　一、课题来源与背景 　　1、课题来源：自选课题 　　2、背景：系统性红斑狼疮(SLE) 是伴有多系统、多器官损伤的一种自身免疫性结缔组织病。目前，SLE的发病机制仍未完全清楚，可能是在遗传因素、环境因素及性激素影响下，发生了异常免疫应答，体内产生大量致病性自身抗体和免疫复合物引起组织损伤。而且SLE不能根治，因此提倡早期诊断、早期治疗及早期缓解。随着系统性红斑狼疮研究的深入，SLE的诊断、治疗也得到很快的发展。从2006年起我们院检验科即开展了ANA、dsDNA、抗ENA抗体的检测。通过研究分析，ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体联合检测对SLE的诊断、病情发展及其治疗效果均有重要的临床意义。 　　二、技术原理及性能指标 　　技术原理：SLE患者血清中自身抗体主要有ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体，三种抗体检测的基本原理简述如下。 　　1、ANA测定原理：采用间接免疫荧光法检测，将稀释血清与生物载片(反应区内固定有包被基质的生物薄片)温育，如果样本是阳性的，特异性IgG、IgA和IgM抗体与相应的抗原结合。在第二次温育时，荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应，形成荧光显微镜下所观察到的特异性荧光模式。 　　2、抗dsDNA测定原理：用胶体金斑点渗滤法检测，采用高特异性的亲和素－生物素系统将双链DNA包被在硝基膜上，结合胶体金标记和斑点渗滤技术，检测血清中的抗双链DNA抗体。 　　3、抗ENA抗体测定原理：采用免疫印迹技术（IBT）测定，将具有多种抗原性的细胞核盐水可提取性抗原（ENA）转印于硝酸纤维膜上，根据区带的数量和分子量识别抗原的表位，进而检测到相应抗ENA抗体。 　　性能指标： 　　1、ANA是一组将真核细胞的各种核成分作为靶抗原的自身抗体的总称，是SLE重要的筛选指标。本研究中，ANA的阳性率为89.1﹪，明显高于正常人（P〈0.01），与正常人鉴别的特异性为96.3﹪，诊断效率为92.4﹪。 　　2、抗dsDNA是SLE的标志性抗体，疾病的活动性指标，在本研究中，抗dsDNA的阳性率为47.8﹪，明显高于正常人（P＜0.01），与正常人鉴别的特异性非常高达到100.0﹪，诊断效率为72.1﹪。SLE伴发狼疮性肾炎患者（LN组）抗dsDNA的阳性率为75.0﹪，明显高于非LN组的26.9﹪，（P＜0.01）。 　　3、抗ENA抗体属于抗非组蛋白抗体，在本研究中抗ENA抗体总阳性率为50.0﹪，明显高于正常人（P＜0.01）；与正常人鉴别的特异性达到100.0﹪，诊断效率为73.3﹪。抗ENA抗体采用免疫印迹技术可检测到抗Sm抗体、抗SSA、抗SSB、抗U1RNP、抗rRNP、抗scl-70、抗Jo-1等7种相应的ENA抗体。其中的抗Sm抗体仅发现SLE中，其存在常提示中枢神经受累。 　　4、ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体联合检测的阳性率为94.5﹪，与正常人比较（P＜0.01）特异性为96.3﹪，诊断效率为95.3﹪，分别高于单项抗体的诊断效率。 　　三、技术的创造性与先进性 　　1、该成果采用ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体的联合检测SLE，可避免因单项检测出现的漏诊情况，提高了SLE的检出率，有利于SLE病人早期诊断，为临床治疗提供了参考依据，成果达省内先进。 　　2、该成果操作简便、方法易于掌握，适宜于基层医院推广应用。 　　四、技术的成熟程度、适用范围和安全性 　　ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体的联合检测的技术已比较成熟，适用于SLE的诊断、鉴别诊断、病情监测及疗效判断，同时还适用于其它自身免疫性疾病的诊断。而且此项目检测对患者无损伤，既安全又可靠。 　　五、应用情况及存在问题 　　已广泛用于SLE的实验室诊断以及其它自身免疫性疾病的实验室诊断，存在的问题是，ANA、抗ENA抗体测定易受反应温度、冲洗等因素影响。