1.项目任务来源：自选项目。 2.应用领域和技术原理 Cajal间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)是胃肠道慢波的起搏细胞，并在肠神经信号传递中起重要作用。c-kit作为酪氨酸激酶受体家族的重要成员，与其配体干细胞因子(stem cell factor,SCF)结合后所启动的信号通路，对ICC的分化、发育、表型维持及胃肠道节律性活动至关重要。一些证据表明，ICC在胃肠道肌层产生慢波，传递慢波，通过内脏神经元向平滑肌传导神经信号。ICC表达原癌基因c-kit，后者编码膜受体酪氨酸激酶。已证实，标记了c-kit受体的人和其他种属的胃肠道ICC，在光镜下能被鉴别。人类一些动力障碍性疾病与ICC数量减少或网络不完整有关。 3.性能指标 (1)豚鼠血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) (2)豚鼠胆囊c-kit mRNA表达 (3)豚鼠胆囊c-kit蛋白表达 (4)豚鼠胆囊c-kit阳性细胞免疫组织化学观察 (5)豚鼠胆囊ICC的超微结构观察 4.与国外同类技术比较 充分的证据表明，C-kit/SCF在ICC的发育和维持其表型中发挥关键作用。用中和抗体阻断c-kit，引起ICC向平滑肌样表型转变。研究表明，CD1小鼠[5]和豚鼠[6]胆囊存在ICC。高胆固醇食物豚鼠的胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达是否异常，迄今未见报道。本研究用RT-PCT和 Western blot检测正常豚鼠和高胆固醇食物豚鼠胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达，探索胆固醇对胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达有无影响。 本实验用免疫组织化学法观察豚鼠胆囊ICC的形态和分布，初步探讨高胆固醇食物对豚鼠胆囊ICC有无影响，为进一步研究高胆固醇食物与ICC的关系奠定基础。超微结构研究表明：ICC有如下特征：大量线粒体、丰富的中间丝、ICC相互之间以及ICC与平滑肌细胞之间有大的缝隙连接。我们应用透射电镜观察高胆固醇食物豚鼠胆囊ICC。 5.成果的创造性、先进性 (1)本研究目的是阐明豚鼠胆囊Cajal间质细胞(ICC)免疫组织化学的形态特征，目前国内外相关研究较少，具有创新性。 (2)本文探讨高胆固醇摄入对豚鼠胆囊ICC的超微结构形态有无影响，目前关于这方面的研究还未见报道，具有创新性。 (3)本研究采用RT-PCR和Western blot，对正常食物豚鼠和高胆固醇食物豚鼠胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达进行了研究，从分子水平探讨高胆固醇食物对胆囊ICC的影响。 (4)本研究的预期成果将有助于进一步阐明胆固醇对胆囊ICC的作用机制，并为胆囊运动障碍和胆固醇结石的机制研究提供新的思路。 6.作用意义（直接经济效益和社会意义） 该研究由动物实验试图揭示胆固醇对胆囊运动的影响机理，为胆囊运动障碍和胆结石的发生提供理论依据。同时，肥胖人群胆结石的发病率较高，因此，该研究为人胆结石的发病机理研究提供了新的思路。C-kit标志物的检测可能成为胆囊运动功能障碍的检测指标，为临床带来直接的经济效益。同时，为胆结石的预防和治疗提供可能的新方法，具有潜在的巨大社会效益。 7.推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见 推广应用的范围是进行人胆囊相关实验，实验条件包括生化、免疫组化和电子显微镜技术。该研究的前景在于：胆囊运动障碍的机制尚不清楚，目前，已经证实人胆道系统存在ICC，人胆囊ICC的形态和功能生理和病理研究势在必行。该项目的进一步工作是研究高胆固醇患者胆道系统ICC的形态和功能有无异常。

1.项目任务来源：自选项目。 2.应用领域和技术原理 Cajal间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)是胃肠道慢波的起搏细胞，并在肠神经信号传递中起重要作用。c-kit作为酪氨酸激酶受体家族的重要成员，与其配体干细胞因子(stem cell factor,SCF)结合后所启动的信号通路，对ICC的分化、发育、表型维持及胃肠道节律性活动至关重要。一些证据表明，ICC在胃肠道肌层产生慢波，传递慢波，通过内脏神经元向平滑肌传导神经信号。ICC表达原癌基因c-kit，后者编码膜受体酪氨酸激酶。已证实，标记了c-kit受体的人和其他种属的胃肠道ICC，在光镜下能被鉴别。人类一些动力障碍性疾病与ICC数量减少或网络不完整有关。 3.性能指标 (1)豚鼠血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) (2)豚鼠胆囊c-kit mRNA表达 (3)豚鼠胆囊c-kit蛋白表达 (4)豚鼠胆囊c-kit阳性细胞免疫组织化学观察 (5)豚鼠胆囊ICC的超微结构观察 4.与国外同类技术比较 充分的证据表明，C-kit/SCF在ICC的发育和维持其表型中发挥关键作用。用中和抗体阻断c-kit，引起ICC向平滑肌样表型转变。研究表明，CD1小鼠[5]和豚鼠[6]胆囊存在ICC。高胆固醇食物豚鼠的胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达是否异常，迄今未见报道。本研究用RT-PCT和 Western blot检测正常豚鼠和高胆固醇食物豚鼠胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达，探索胆固醇对胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达有无影响。 本实验用免疫组织化学法观察豚鼠胆囊ICC的形态和分布，初步探讨高胆固醇食物对豚鼠胆囊ICC有无影响，为进一步研究高胆固醇食物与ICC的关系奠定基础。超微结构研究表明：ICC有如下特征：大量线粒体、丰富的中间丝、ICC相互之间以及ICC与平滑肌细胞之间有大的缝隙连接。我们应用透射电镜观察高胆固醇食物豚鼠胆囊ICC。 5.成果的创造性、先进性 (1)本研究目的是阐明豚鼠胆囊Cajal间质细胞(ICC)免疫组织化学的形态特征，目前国内外相关研究较少，具有创新性。 (2)本文探讨高胆固醇摄入对豚鼠胆囊ICC的超微结构形态有无影响，目前关于这方面的研究还未见报道，具有创新性。 (3)本研究采用RT-PCR和Western blot，对正常食物豚鼠和高胆固醇食物豚鼠胆囊c-kit mRNA和c-kit蛋白表达进行了研究，从分子水平探讨高胆固醇食物对胆囊ICC的影响。 (4)本研究的预期成果将有助于进一步阐明胆固醇对胆囊ICC的作用机制，并为胆囊运动障碍和胆固醇结石的机制研究提供新的思路。 6.作用意义（直接经济效益和社会意义） 该研究由动物实验试图揭示胆固醇对胆囊运动的影响机理，为胆囊运动障碍和胆结石的发生提供理论依据。同时，肥胖人群胆结石的发病率较高，因此，该研究为人胆结石的发病机理研究提供了新的思路。C-kit标志物的检测可能成为胆囊运动功能障碍的检测指标，为临床带来直接的经济效益。同时，为胆结石的预防和治疗提供可能的新方法，具有潜在的巨大社会效益。 7.推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见 推广应用的范围是进行人胆囊相关实验，实验条件包括生化、免疫组化和电子显微镜技术。该研究的前景在于：胆囊运动障碍的机制尚不清楚，目前，已经证实人胆道系统存在ICC，人胆囊ICC的形态和功能生理和病理研究势在必行。该项目的进一步工作是研究高胆固醇患者胆道系统ICC的形态和功能有无异常。