| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 细胞系;质量控制;关键技术 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 成熟应用阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新技术 | |||
| 成果登记号: | EK110325 | 资源采集日期: | 11-10-10 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 武汉大学 | 技术水平: | 国际先进 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | 湖北省科学技术厅 | ||
| 评价日期: | 2011.03.22 | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 不转让 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
(1)任务来源:本成果自1985年武汉大学接受国家知识产权局委托成立中国典型培养物保藏中心开始到完成国家科技基础条件平台建设项目《实验细胞资源的标准化整理、整合与共享》后的2010年为止,历时25年。主要任务来源如下:中国专利细胞培养物保藏与管理(国家知识产权局,85-008)、实验细胞资源的标准化整理、整合与共享(科技部平台项目,2004DKA305400-4、2005DKA21502)、病原微生物感染的免疫耐受和免疫逃逸机制(973项目,2006CB504300)、新发突发传染病病原体检测技术平台(国家重大专项2009ZX10601)、牛源性生物材料的病毒检测技术研究(国家科技支撑计划,2008BAI54B06-42)、病毒颗粒侵染宿主细胞的动态过程及机制(973项目 2006CB5933104)(附件二)。 (2)应用领域和技术原理:本成果属生物技术应用领域。其技术原理是:细胞系是具有生命属性的活的生命体,在应用过程中很容易发生种内、种间和外源因子污染,必须使用相关技术进行质量控制,以保障其在科学研究和生产活动中的正常应用。所谓细胞系质量控制就是采用多种经典或先进的检测技术,对细胞系进行全面检测分析,发现可能存在的污染源,排除其潜在的危险性,保持细胞的高品质状态。本成果所指的细胞系质量控制关键技术,就是针对细胞系种内、种间和外源因子污染这3类污染源检测所集成的相应技术体系。 (3)性能指标:建成符合国际规范的细胞系质量控制检测平台。针对常见的种内、种间和外源因子3类细胞系污染源,制定了22项细胞系质量控制规范和规程;集成了包括细胞系身份识別鉴定和细胞系外源因子污染检查两类共11项重要技术的细胞系质量控制检测体系,并将其规范化;精选了用于细胞系质量控制实验的13株(系)对照标准细胞系。 (4)与国外同类技术比较:针对细胞系污染源建立的检测技术国内外都十分相似,就质量控制体系集成的系统性和技术方法的先进性而言,本成果与国外同类技术相当,细胞系质量控制的整体水平达到国际先进标准。在STR分析技术(种内交叉污染鉴别、鉴定)、同工酶分析技术(种间交叉污染鉴别、鉴定)和外源因子污染检测技术(细菌、真菌、支原体、病毒污染检测)的系统性、检测指标和精确度甚至超过国际同行。 (5)成果的创造性、先进性:本成果主要采用STR检测技术分析种内交叉污染(采用16位点分析法检测了保存的标准细胞系和中国自建的细胞系的STR,建立了相应的比对数据库);同工酶检测技术分析种间污染(采用乳酸脱氢酶LD、苹果酸脱氢酶MD、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD和核苷酸磷酸脱氢酶NP等4种同工酶检测方法),在凝胶制备、酶液提取和电泳降温系统方面有所创新,检测成本仅为国外同类技术的1/4;细菌、真菌污染检测技术(采用8种不同培养基成分,2个阳性对照,不同培养条件组合的检测体系);支原体污染检测技术(采用固体直接培养法、液体培养观察法,DNA荧光染色等3种方法);病毒污染检测技术(基于荧光量子点的病毒检测及活细胞示踪新技术)。细胞系外源因子污染检测体系有所创新,其中,基于荧光量子点的活细胞示踪技术对病毒的检测属自主创新。 (6)作用意义(直接经济效益和社会意义):本成果获国家计划项目资金资助20项(附件一);发表相关研究论文75篇(附件四);出版专著4部(附件五);申请专利8件(附件六),授权6件(附件六);近年使用本成果质量监控的细胞系进行生产的企业共32家(附件三,3.1),其中5家企业(附件三,3.2)提供的经济效益证明在2~3年内共新增产值26720万元,利税5160.4万元,创汇434万美元,经济效益十分显著。据不完全统计,6年中使用本成果质量控制的细胞系进行科学研究的单位和个人超过5692 人/次,提高了国内科学研究用细胞系的质量和信度,使武汉大学中国典型培养物保藏中心成为某些国际著名刊物发表论文时必须进行细胞系检测的中国总代理(附件三,3.3)。 (7)推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见 综上所述,本成果在细胞系质量控制关键技术研究方面,整体达到国际先进标准,部分跨入国际前沿,科技进步明显;通过本体系质量控制的细胞系服务于科学研究,提高了我国科学研究的信度和水平,社会效益可观;应用于生产实践,降低了产品污染的质量风险,经济效益显著,支持了地方经济新生长点的发展,显示了极好的应用前景。 |