该项目为杭州市科技局重点专病专科项目（资助课题编号：20080333Q29）。 　　单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)是引起人类生殖器疱疹(genital herpes，GH)的主要病因，GH 90﹪的病原体为HSV-2。GH近年来发病率明显上升，在由病毒所引起的性传播疾病中占第一位。HSV疫苗的预防接种是预防GH的最佳方法，包膜糖蛋白gD是抗HSV-2感染中最重要的保护性抗原，免疫作用最强。如何大量获得具有生物活性的HSV-2 gD2蛋白是目前研究的热点。本研究以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因，利用Bac-to-Bac表达系统在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中成功表达了重组HSV-2gD2蛋白。为了提高表达量，采用分批补料式培养技术对Sf9细胞进行高密度培养，并对葡萄糖浓度，谷氨酰胺浓度以及溶解氧浓度等关键性培养限制因素进行了优化，实现了重组gD2蛋白的高效表达。 　　本研究成功构建了高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统，应用分批补料式培养法对Sf9细胞进行高密度培养，并对关键性培养限制因素进行了优化，实现了重组gD2蛋白的高效表达。在国内首次利用豚鼠生殖器模型研究gD2免疫效应。结果表明，重组gD2能够诱导豚鼠产生高滴度的中和抗体，并能显著降低豚鼠生殖器疱疹模型的外阴皮损症状，表现出良好的免疫原性和中和活性。研究成果为大量获得功能性HSV-2包膜糖蛋白gD提供了经济有效的方法，为HSV-2gD亚单位疫苗和HSV诊断抗原的进一步研究开发奠定了基础，具有较大的社会和间接经济效益。

　　该项目为杭州市科技局重点专病专科项目（资助课题编号：20080333Q29）。 　　单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)是引起人类生殖器疱疹(genital herpes，GH)的主要病因，GH 90﹪的病原体为HSV-2。GH近年来发病率明显上升，在由病毒所引起的性传播疾病中占第一位。HSV疫苗的预防接种是预防GH的最佳方法，包膜糖蛋白gD是抗HSV-2感染中最重要的保护性抗原，免疫作用最强。如何大量获得具有生物活性的HSV-2 gD2蛋白是目前研究的热点。本研究以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因，利用Bac-to-Bac表达系统在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中成功表达了重组HSV-2gD2蛋白。为了提高表达量，采用分批补料式培养技术对Sf9细胞进行高密度培养，并对葡萄糖浓度，谷氨酰胺浓度以及溶解氧浓度等关键性培养限制因素进行了优化，实现了重组gD2蛋白的高效表达。 　　本研究成功构建了高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统，应用分批补料式培养法对Sf9细胞进行高密度培养，并对关键性培养限制因素进行了优化，实现了重组gD2蛋白的高效表达。在国内首次利用豚鼠生殖器模型研究gD2免疫效应。结果表明，重组gD2能够诱导豚鼠产生高滴度的中和抗体，并能显著降低豚鼠生殖器疱疹模型的外阴皮损症状，表现出良好的免疫原性和中和活性。研究成果为大量获得功能性HSV-2包膜糖蛋白gD提供了经济有效的方法，为HSV-2gD亚单位疫苗和HSV诊断抗原的进一步研究开发奠定了基础，具有较大的社会和间接经济效益。