本项目属于临床医学应用技术研究领域。研究的主要任务来源是国家高科技研究发展计划（863计划）：自身免疫性疾病的早期诊断及免疫耐受重建（2006AA02Z496）。 　　经过近八年的研究，我们得到了如下研究结果： 　　1）我们成功建立了TLR4基因和蛋白的检测方法（实时荧光定量PCR和流式细胞术），并应用该方法发现TLR4在动脉粥样硬化患者中的表达明显升高；但TLR4表达量的高低与血脂无关。这一结果提示TLR4信号通路可能参与动脉粥样硬化的发病，与国外研究相一致，而且TLR4信号通路的活化与否似乎与自然状态的血脂成分无关； 　　2）我们通过细胞实验证实，ox-LDL刺激可以诱导单核细胞TLR4表达增加，引起NF-kappa B活化，诱导MCP-1和IL-8的分泌显著增加，而自然状态的LDL则无上述作用。利用构建的siRNA表达载体诱导单核细胞株的TLR4基因沉默；TLR4表达抑制后，ox-LDL刺激引起的NF-kappa B活化、MCP-1和IL-8的分泌等致动脉粥样硬化作用显著减弱。 　　上述研究表明，血脂成分在氧化应激等环境下发生氧化，结构亦发生变化，而变化后的血脂成分可以活化TLR4信号通路，进一步活化单核巨噬细胞，从而参与动脉粥样硬化的发生，这些结果已发表SCI论文2篇。 　　3）我们在国内外首次发现TLR4在强直性脊柱炎中的表达明显上调，且其上调不受HLA-B27抗原状态的影响；TLR4的表达与CRP及ESR呈显著相关性，且这种相关性明显受HLA-B27抗原状态的影响；此外，TLR4与TNF-α、TRAIL、IL-12等细胞因子呈明显的正相关。这些研究结果提示TLR4及其信号转导通路可能参与强直性脊柱炎的发生和发展，而且与HLA-B27的状态密切相关。上述结果已发表SCI论文2篇。 　　本项目的创新点包括： 　　1）在国内首次建立了检测TLR4 mRNA表达含量的实时荧光定量RT-PCR方法。 　　2）首次利用构建的siRNA表达载体诱导单核细胞株的TLR4基因沉默； 　　3）首次发现TLR4及其信号转导通路的异常活化可能参与强直性脊柱炎的发生、发展，而且TLR4信号转导通路与强直性脊柱炎的关系明显受HLA-B27抗原状态的影响。 　　本项目研究成果已进行推广应用，TLR4在动脉粥样硬化和强直性脊柱炎的筛查、诊断中有着潜在临床应用价值，可作为动脉粥样硬化和强直性脊柱炎早期诊断的辅助指标。 　　本研究的结果已有18篇相关论文在国内外核心期刊发表，其中SCI收录3篇。通过本项目的实施，培养了2名博士和1名硕士研究生，推动了人才梯队的建设。

　　本项目属于临床医学应用技术研究领域。研究的主要任务来源是国家高科技研究发展计划（863计划）：自身免疫性疾病的早期诊断及免疫耐受重建（2006AA02Z496）。 　　经过近八年的研究，我们得到了如下研究结果： 　　1）我们成功建立了TLR4基因和蛋白的检测方法（实时荧光定量PCR和流式细胞术），并应用该方法发现TLR4在动脉粥样硬化患者中的表达明显升高；但TLR4表达量的高低与血脂无关。这一结果提示TLR4信号通路可能参与动脉粥样硬化的发病，与国外研究相一致，而且TLR4信号通路的活化与否似乎与自然状态的血脂成分无关； 　　2）我们通过细胞实验证实，ox-LDL刺激可以诱导单核细胞TLR4表达增加，引起NF-kappa B活化，诱导MCP-1和IL-8的分泌显著增加，而自然状态的LDL则无上述作用。利用构建的siRNA表达载体诱导单核细胞株的TLR4基因沉默；TLR4表达抑制后，ox-LDL刺激引起的NF-kappa B活化、MCP-1和IL-8的分泌等致动脉粥样硬化作用显著减弱。 　　上述研究表明，血脂成分在氧化应激等环境下发生氧化，结构亦发生变化，而变化后的血脂成分可以活化TLR4信号通路，进一步活化单核巨噬细胞，从而参与动脉粥样硬化的发生，这些结果已发表SCI论文2篇。 　　3）我们在国内外首次发现TLR4在强直性脊柱炎中的表达明显上调，且其上调不受HLA-B27抗原状态的影响；TLR4的表达与CRP及ESR呈显著相关性，且这种相关性明显受HLA-B27抗原状态的影响；此外，TLR4与TNF-α、TRAIL、IL-12等细胞因子呈明显的正相关。这些研究结果提示TLR4及其信号转导通路可能参与强直性脊柱炎的发生和发展，而且与HLA-B27的状态密切相关。上述结果已发表SCI论文2篇。 　　本项目的创新点包括： 　　1）在国内首次建立了检测TLR4 mRNA表达含量的实时荧光定量RT-PCR方法。 　　2）首次利用构建的siRNA表达载体诱导单核细胞株的TLR4基因沉默； 　　3）首次发现TLR4及其信号转导通路的异常活化可能参与强直性脊柱炎的发生、发展，而且TLR4信号转导通路与强直性脊柱炎的关系明显受HLA-B27抗原状态的影响。 　　本项目研究成果已进行推广应用，TLR4在动脉粥样硬化和强直性脊柱炎的筛查、诊断中有着潜在临床应用价值，可作为动脉粥样硬化和强直性脊柱炎早期诊断的辅助指标。 　　本研究的结果已有18篇相关论文在国内外核心期刊发表，其中SCI收录3篇。通过本项目的实施，培养了2名博士和1名硕士研究生，推动了人才梯队的建设。