（1）任务来源 　　葡萄球菌耐药基因型与表型的相关性研究与临床应用为濮阳市科技局2009年计划项目。编号：080560。 　　（2）应用领域和技术原理 　　该项目应用于医学领域葡萄球菌感染的追踪检查、流行病学调查、耐药基因检测，通过表型与基因型对照为仪器自动化检测表型耐药提供科学依据。采用聚合酶链反应（PCR）技术，即通过放大特定的DNA片段来检测目的基因或特定的耐药基因－红霉素核糖体甲基化酶（erm基因）。 　　（3）性能指标 　　通过特殊的引物设计，经过基因扩增，凝胶电泳及成像，达到了预期效果。目的基因都能顺利检出，与微量肉汤稀释法即表型诱导试验对比符合率高。 　　（4）与国内外同类技术比较 　　通过多个搜索引擎查询，目前国内未见葡萄球菌耐药基因型与微量肉汤稀释法表型试验对比的相关性研究。国外多见报道各种葡萄球菌的耐药基因型研究，但基因型与表型的比较试验也少见报道，因为微量肉汤稀释法检测葡萄球菌诱导克林霉素耐药是最近CLSI颁布的标准。 　　（5）成果的创造性、先进性 　　本研究在国内率先使用微量肉汤稀释法检测红霉素耐药葡萄球菌的克林霉素诱导试验，接着又进行葡萄球菌诱导试验基因型与表型的对比研究，为该项目在国内顺利开展提供了有益的尝试，为指导临床医生合理用药、流行病学调查提供了科学依据，为自动化仪器顺利检测葡萄球菌诱导试验提供了技术支持。 　　（6）作用意义 　　该项目分别从分子水平和基因水平研究了葡萄球菌的诱导耐药，指导临床医生如何使用抗菌药物，减少了药物的滥用，为病人和社会节约了成本，也保护了人们赖以生存的自然环境；能有效追踪患者感染源，能为有效控制院内感染提供强有力的科学依据；为开发利用仪器的性能和试剂研发提供了指南，因此经济效益和社会效益将十分显著。 　　随着科技时代的到来，医疗技术有了突飞猛进的发展，如心脏搭桥术、血管内放置支架、腹腔镜、结肠镜、胃镜、呼吸机、病人透析等为诊断疾病、治疗疾病、挽救病人生命发挥了巨大作用，但同时因这些操作或设备原因引起的感染也增长迅速，其中葡萄球菌是最重要的感染源。表皮葡萄球菌（S.epidermidi）作为菌血症的病原体已广泛得到公认，术后心脏感染、心内膜炎、骨髓炎、泌尿系感染和卧床透析患者引起的腹膜炎等频繁与血管内置导管、矫形外科装置上的细菌定植密切联系。 　　大环内酯类－林可酰胺－链阳性霉素B类抗生素(MLSB)的化学结构差异甚大，但其抗菌机制和细菌耐药性机制非常相似。MLSB耐药表型分结构型耐药(cMLSB)和诱导型耐药(iMLSB)，iMLSB多发生在大环内酯类出现时，偶尔也发生自然基因突变使iMLSB转化为cMLSB。当耐药表型与基因型不一致时，需做葡萄球菌诱导试验，但基因型为唯一金标准，对临床选择治疗药物影响较大，因此很有必要检测细菌的耐药基因。 　　大环内酯类像阿奇霉素、克拉霉素除用于治疗一般的细菌感染外，还被推荐用于预防HIV感染病人由鸟复合分枝杆菌引起的感染，随着此类药物的广泛应用也增加了细菌获得大环内酯类或MLSB耐药的机会。在中国，头孢菌素和MLSB类药物是使用最频繁的抗生素。在多数菌属中，红霉素总是好的诱导剂，对于动物和人类感染的链球菌林可酰胺类和链阳霉素B也是好的诱导剂，因此，如何合理使用MLSB类药物成为人们急待解决的问题。 　　由多重耐药葡萄球菌引起的医院感染正变得日趋严重，葡萄球菌中所有的菌种都有极大的潜在治病性。目前本地区葡萄球菌对红霉素耐药率在90﹪以上，而对克林霉素的耐药率不足20﹪，体外对红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌能否用克林霉素治疗成为临床医生和各位学者共同关注的焦点，本课题为这一疑难提供了解决途径，所以应用范围大、前景广阔。 　　目前耐药基因检测成本较高，特别是检测单个标本消耗更高，希望不久的将来有标准的试剂盒问世，既能降低成本又能符合国家规定。不过，由于表型诱导试验与基因检测符合率很高，利用微量肉汤稀释法在自动化仪器的药敏检测板上加上规定的红霉素/克林霉素浓度也能解决大部分问题。

　　（1）任务来源 　　葡萄球菌耐药基因型与表型的相关性研究与临床应用为濮阳市科技局2009年计划项目。编号：080560。 　　（2）应用领域和技术原理 　　该项目应用于医学领域葡萄球菌感染的追踪检查、流行病学调查、耐药基因检测，通过表型与基因型对照为仪器自动化检测表型耐药提供科学依据。采用聚合酶链反应（PCR）技术，即通过放大特定的DNA片段来检测目的基因或特定的耐药基因－红霉素核糖体甲基化酶（erm基因）。 　　（3）性能指标 　　通过特殊的引物设计，经过基因扩增，凝胶电泳及成像，达到了预期效果。目的基因都能顺利检出，与微量肉汤稀释法即表型诱导试验对比符合率高。 　　（4）与国内外同类技术比较 　　通过多个搜索引擎查询，目前国内未见葡萄球菌耐药基因型与微量肉汤稀释法表型试验对比的相关性研究。国外多见报道各种葡萄球菌的耐药基因型研究，但基因型与表型的比较试验也少见报道，因为微量肉汤稀释法检测葡萄球菌诱导克林霉素耐药是最近CLSI颁布的标准。 　　（5）成果的创造性、先进性 　　本研究在国内率先使用微量肉汤稀释法检测红霉素耐药葡萄球菌的克林霉素诱导试验，接着又进行葡萄球菌诱导试验基因型与表型的对比研究，为该项目在国内顺利开展提供了有益的尝试，为指导临床医生合理用药、流行病学调查提供了科学依据，为自动化仪器顺利检测葡萄球菌诱导试验提供了技术支持。 　　（6）作用意义 　　该项目分别从分子水平和基因水平研究了葡萄球菌的诱导耐药，指导临床医生如何使用抗菌药物，减少了药物的滥用，为病人和社会节约了成本，也保护了人们赖以生存的自然环境；能有效追踪患者感染源，能为有效控制院内感染提供强有力的科学依据；为开发利用仪器的性能和试剂研发提供了指南，因此经济效益和社会效益将十分显著。 　　随着科技时代的到来，医疗技术有了突飞猛进的发展，如心脏搭桥术、血管内放置支架、腹腔镜、结肠镜、胃镜、呼吸机、病人透析等为诊断疾病、治疗疾病、挽救病人生命发挥了巨大作用，但同时因这些操作或设备原因引起的感染也增长迅速，其中葡萄球菌是最重要的感染源。表皮葡萄球菌（S.epidermidi）作为菌血症的病原体已广泛得到公认，术后心脏感染、心内膜炎、骨髓炎、泌尿系感染和卧床透析患者引起的腹膜炎等频繁与血管内置导管、矫形外科装置上的细菌定植密切联系。 　　大环内酯类－林可酰胺－链阳性霉素B类抗生素(MLSB)的化学结构差异甚大，但其抗菌机制和细菌耐药性机制非常相似。MLSB耐药表型分结构型耐药(cMLSB)和诱导型耐药(iMLSB)，iMLSB多发生在大环内酯类出现时，偶尔也发生自然基因突变使iMLSB转化为cMLSB。当耐药表型与基因型不一致时，需做葡萄球菌诱导试验，但基因型为唯一金标准，对临床选择治疗药物影响较大，因此很有必要检测细菌的耐药基因。 　　大环内酯类像阿奇霉素、克拉霉素除用于治疗一般的细菌感染外，还被推荐用于预防HIV感染病人由鸟复合分枝杆菌引起的感染，随着此类药物的广泛应用也增加了细菌获得大环内酯类或MLSB耐药的机会。在中国，头孢菌素和MLSB类药物是使用最频繁的抗生素。在多数菌属中，红霉素总是好的诱导剂，对于动物和人类感染的链球菌林可酰胺类和链阳霉素B也是好的诱导剂，因此，如何合理使用MLSB类药物成为人们急待解决的问题。 　　由多重耐药葡萄球菌引起的医院感染正变得日趋严重，葡萄球菌中所有的菌种都有极大的潜在治病性。目前本地区葡萄球菌对红霉素耐药率在90﹪以上，而对克林霉素的耐药率不足20﹪，体外对红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌能否用克林霉素治疗成为临床医生和各位学者共同关注的焦点，本课题为这一疑难提供了解决途径，所以应用范围大、前景广阔。 　　目前耐药基因检测成本较高，特别是检测单个标本消耗更高，希望不久的将来有标准的试剂盒问世，既能降低成本又能符合国家规定。不过，由于表型诱导试验与基因检测符合率很高，利用微量肉汤稀释法在自动化仪器的药敏检测板上加上规定的红霉素/克林霉素浓度也能解决大部分问题。