肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是由汉坦病毒引起的对人类危害较严重的传染病，我国是受其危害较严重的国家，天津作为新疫区出现HFRS的流行，引起国内极大关注。HFRS尚无有效治疗方法，早期诊断，早期治疗，极为关键。汉坦病毒的G2糖蛋白含有主要的中和抗原位点，可刺激机体产生中和抗体，对感染动物和人体产生保护作用。该项目以汉坦病毒SEO型代表株L99为研究对象，通过生物信息软件对汉坦病毒L99株M基因及其编码的G2包膜糖蛋白进行了全面综合分析，从亲水性和表面可及性、抗原性和蛋白二级结构四个方面对其B细胞表位进行分析预测，优选出5个B细胞表位，引入GPG（甘氨酸—脯氨酸—甘氨酸）间隔序列将表位串联，设计并利用重叠PCR方法构建了G2蛋白的多表位抗原基因(mea)，定向克隆到pET-32a原核表达质粒，在大肠杆菌中完成表达，得到的多表位抗原mea蛋白，经镍亲和层析纯化，纯度为95%，得率为0.14mg/mL菌液。同时构建了真核表达质粒pcDNA3.1-G2，并DNA免疫BALB/c小鼠，获得G2蛋白抗体。以此抗体为基础对原核表达的mea蛋白进行免疫学特异性鉴定。然后用纯化mea蛋白建立MEA-ELISA方法用于HFRS患者血清中和抗体的检测，效果满意，表明其可用于HFRS病人病情预后的辅助诊断，作为实验室评估指标。通过本项目的研究与应用可以对HFRS患者血清中的中和抗体进行检测，并制定实验室评价指标，对HFRS患者的预后判断和指导治疗具有非常重要的临床意义，并且为HFRS患者中和抗体检测试剂盒的开发与应用奠定了良好基础。

肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是由汉坦病毒引起的对人类危害较严重的传染病，我国是受其危害较严重的国家，天津作为新疫区出现HFRS的流行，引起国内极大关注。HFRS尚无有效治疗方法，早期诊断，早期治疗，极为关键。汉坦病毒的G2糖蛋白含有主要的中和抗原位点，可刺激机体产生中和抗体，对感染动物和人体产生保护作用。该项目以汉坦病毒SEO型代表株L99为研究对象，通过生物信息软件对汉坦病毒L99株M基因及其编码的G2包膜糖蛋白进行了全面综合分析，从亲水性和表面可及性、抗原性和蛋白二级结构四个方面对其B细胞表位进行分析预测，优选出5个B细胞表位，引入GPG（甘氨酸—脯氨酸—甘氨酸）间隔序列将表位串联，设计并利用重叠PCR方法构建了G2蛋白的多表位抗原基因(mea)，定向克隆到pET-32a原核表达质粒，在大肠杆菌中完成表达，得到的多表位抗原mea蛋白，经镍亲和层析纯化，纯度为95%，得率为0.14mg/mL菌液。同时构建了真核表达质粒pcDNA3.1-G2，并DNA免疫BALB/c小鼠，获得G2蛋白抗体。以此抗体为基础对原核表达的mea蛋白进行免疫学特异性鉴定。然后用纯化mea蛋白建立MEA-ELISA方法用于HFRS患者血清中和抗体的检测，效果满意，表明其可用于HFRS病人病情预后的辅助诊断，作为实验室评估指标。通过本项目的研究与应用可以对HFRS患者血清中的中和抗体进行检测，并制定实验室评价指标，对HFRS患者的预后判断和指导治疗具有非常重要的临床意义，并且为HFRS患者中和抗体检测试剂盒的开发与应用奠定了良好基础。