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人体脂肪基质细胞的分离培养及其与骨髓来源成骨细胞成骨活性的对比研究

成果基本信息
关键词: 脂肪基质细胞;骨髓基质细胞;成骨活性
成果类别: 应用技术 技术成熟度: 初期阶段
体现形式(基础理论类): / 体现形式(应用技术类): 其他应用技术
成果登记号: 津20100504 资源采集日期: 11-2-20
研究情况
单位名称: 天津市第三中心医院 技术水平: 国内领先
评价证书号: / 评价单位: 天津市卫生局
评价日期: 2009.11.24 评价证书号: /
转化情况
转让范围: 不转让 推广形式: 其他
已转让企业数(个): 0
联系方式
联系人(平台): 孵化基地 联系人(平台)电话: 0771-3394012
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成果简介

本研究探讨人体脂肪基质细胞的分离培养及其成骨活性,并将其与骨髓基质细胞成骨活性进行比较,从而明确脂肪基质细胞是否具备取代骨髓基质细胞成为骨组织工程种子细胞来源。第一部分探讨人体脂肪组织来源脂肪基质细胞的分离培养方法及其成骨活性,采用机械切割及Ⅰ型胶原酶消化法从脂肪组织中分离获得脂肪基质细胞,原代培养后以诱导培养基(内含10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10-8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C)进行诱导培养,应用形态学观察、碱性磷酸酶钙—钴法染色检测碱性磷酸酶,Von Kossa钙化结节染色检测钙化结节的形成等方法来鉴定诱导分化所得细胞的成骨活性。第二部分对脂肪基质细胞与骨髓基质细胞体外培养的生物学特性加以研究并比较二者的成骨活性,评价脂肪基质细胞能否取代骨髓基质细胞,手术中收集同一人体的脂肪组织与骨髓组织,脂肪组织经机械切割后以Ⅰ型胶原酶消化获得脂肪基质细胞,骨髓组织以淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离骨髓基质细胞,二者均以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液体外培养、传代后以诱导培养液(培养液中加入终浓度为10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10-8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C)行成骨诱导培养,诱导后第2周及第3周各检测一次细胞中的碱性磷酸酶的含量,作为成骨活性的对比指标,并行Von Kossa钙结节染色进一步鉴定成骨细胞。研究结果证实二者的成骨活性相似,同时因脂肪组织来源丰富,取材方便,创伤小,表明脂肪基质细胞可成为一种优秀的骨组织工程的种子细胞,而且比骨髓基质细胞更具有优势。 本研究不仅为人体脂肪基质细胞的生物学特性提供了新的数据,而且为今后进一步的动物实验及临床试验奠定了基础,今后应用于临床,必将对骨不连及骨缺损的治疗提供新的选择,有相当大的临床应用前景。

成果名称: 人体脂肪基质细胞的分离培养及其与骨髓来源成骨细胞成骨活性的对比研究 关键词: 脂肪基质细胞;骨髓基质细胞;成骨活性
成果类别: 应用技术 一级分类名称: 医学生物工程
二级分类名称: / 三级分类名称: /
研究起止时间: 2005.06 至2007.06 成果体现形式(应用技术类): 其他应用技术
成果属性: 原始性创新 成果体现形式(基础理论类): /
技术成熟度: 初期阶段 技术水平: 国内领先
研究形式: 独立研究 学科分类1: 310
单位名称: 天津市第三中心医院 学科分类2: /
中图分类号1: R329.25 所属高新技术类别: 生物、医药和医疗器械
中图分类号2: / 课题来源: 自选
应用行业: 卫生、社会保障和社会福利业 课题立项名称:
国家科技计划子类别: / 课题立项编号: /
经费实际投入额 (万元): 2 评价单位: 天津市卫生局
评价形式: 评估 应用状态: 稳定应用
评价日期: 2009.11.24 转让范围: 不转让
评价证书号: / 推荐单位: 天津市卫生局
推广形式: 其他 成果登记号: 津20100504
成果简介:

本研究探讨人体脂肪基质细胞的分离培养及其成骨活性,并将其与骨髓基质细胞成骨活性进行比较,从而明确脂肪基质细胞是否具备取代骨髓基质细胞成为骨组织工程种子细胞来源。第一部分探讨人体脂肪组织来源脂肪基质细胞的分离培养方法及其成骨活性,采用机械切割及Ⅰ型胶原酶消化法从脂肪组织中分离获得脂肪基质细胞,原代培养后以诱导培养基(内含10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10-8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C)进行诱导培养,应用形态学观察、碱性磷酸酶钙—钴法染色检测碱性磷酸酶,Von Kossa钙化结节染色检测钙化结节的形成等方法来鉴定诱导分化所得细胞的成骨活性。第二部分对脂肪基质细胞与骨髓基质细胞体外培养的生物学特性加以研究并比较二者的成骨活性,评价脂肪基质细胞能否取代骨髓基质细胞,手术中收集同一人体的脂肪组织与骨髓组织,脂肪组织经机械切割后以Ⅰ型胶原酶消化获得脂肪基质细胞,骨髓组织以淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离骨髓基质细胞,二者均以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液体外培养、传代后以诱导培养液(培养液中加入终浓度为10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10-8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C)行成骨诱导培养,诱导后第2周及第3周各检测一次细胞中的碱性磷酸酶的含量,作为成骨活性的对比指标,并行Von Kossa钙结节染色进一步鉴定成骨细胞。研究结果证实二者的成骨活性相似,同时因脂肪组织来源丰富,取材方便,创伤小,表明脂肪基质细胞可成为一种优秀的骨组织工程的种子细胞,而且比骨髓基质细胞更具有优势。 本研究不仅为人体脂肪基质细胞的生物学特性提供了新的数据,而且为今后进一步的动物实验及临床试验奠定了基础,今后应用于临床,必将对骨不连及骨缺损的治疗提供新的选择,有相当大的临床应用前景。

联系人: 江毅 成果登记日期: 10-3-24
联系人email: liuxi1625@163.com 单位代码: 91200132
邮政编码222: 300170 联系人电话: 022-84112246
单位传真: 022-24315132 单位通讯地址: 天津市河东区津塘路83号
单位所在省市: 天津市 单位电话: 022-24315125;84112114
转让收入(万元): 0 单位属性: 医疗机构
合作完成单位: / 已转让企业数(个): 0
成果发布年份: 2010 知识产权形式:
成果完成人: 江毅;刘智;韩立强;朱争艳;田永刚;肖联平;尹庆伟;李晓东 资源采集日期: 11-2-20

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