| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 人类8型疱疹病毒;卡波西氏肉瘤;复合抗原血清检测方法 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 初期阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新技术 | |||
| 成果登记号: | 新疆科成登字20100104 | 资源采集日期: | 11-2-20 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 新疆医科大学第一附属医院/新疆医科大学临床医学院 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | 20100104 | 评价单位: | 新疆维吾尔自治区科学技术厅 | ||
| 评价日期: | 2010.05.13 | 评价证书号: | 20100104 | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 允许出口 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
新疆地区一直存在经典型KS,近年来出现经典型、HIV-相关型、器官移植相关型KS共存的特点,从临床疾病谱角度提示新疆地区很可能属于HHV-8高流行地区,但缺乏可信的检测方法和足够样本量的流行病学研究加以证实,传统的人类8型疱疹病毒血清检测方法具有诸多技术局限性:结果不可信、实验条件要求高,不易短期大量制备,因此不适用于大样本人群快速筛查,而且,目前学术界不认可基于该方法获得的流行病学数据。 本课题组历时4年的研究解决了上述两个问题:首先通过分子克隆制备HHV-8特异性抗原蛋白的抗原簇部分(ORF73C,ORFK8.1,ORF65),经浓度比例优化后组合成复合抗原,再经过稳定性优化,建立了HHV-8在灵敏性、特异性、制备效率、稳定性、操作简易性方面均优于传统系细胞培养裂解态检测方法的复合抗原血清HHV-8检测法。采用该方法开展新疆地区不同人群流行病学调查,筛查总样本量达到8000人次,明确新疆地区是HHV-8高流行区,流行水平约20-26%,该方法为国内首创,方法学及流行病调查结果为国际学术界认可。其次围绕HHV-8病毒学领域开展了基础研究,为将复合抗原血清检测研究方法向商用试剂盒研制奠定了基础。为开展HHV-8领域相关研究建立了基础平台。 本研究自2004年启动至2008年完成,历时4年,研究难度较高,工作量大。项目执行期间共发表相关论文14篇,其中SCI论文1篇,中华期刊论文6篇,核心期刊论文1篇,其他省级期刊论文5篇,有2人获得博士学位,4人获得硕士学位。各项指标都达到预期目标并有所创新。 我们采用人工重组基因克隆技术成功制备ORF73、ORF65、ORFK8.1融合抗原,并为简化病毒蛋白制备流程而作了多个不同蛋白序列的表达及抗原性纯化,在充分优化表达效率又保持了抗原性后,最终建立复合抗原ELISA方法,本研究结果表明,采用ORF73C、ORF65、ORFK8.1三种融合抗原制备的复合抗原ELISA灵敏性、特异性分别为82%、97%,该方法克服了目前常规检测需要基于病毒培养,产量有限、不适用于大样本量人群检测等诸多缺点,而且其准确性优于常规方法,迄今为止,作为人群分子流行病学调查的研究手段,本研究建立的复合抗原ELISA可以提供较准确的检测结果,确保了流行水平研究结果的可靠性,作为研究用实验方法,经过6年余不懈的工作和努力,本研究在HHV-8病毒检测试剂盒商用转化方面已经具备技术基础。 研究团队大量艰苦的努力使我们在该领域与国际先进水平接轨,在国内跻身先进行列。 新疆位列我国HIV感染率第四位,临床已出现越来越多的的AIDS患者,同时,器官移植已成为终末期疾病的有效治疗手段。这意味着HHV-8病毒的致病人群在新疆地区会呈现增加趋势。因此,进一步明确新疆地区确切的HHV-8流行现状、传播途径,完善复合抗原ELISA方法,自主开发商用检测试剂盒,是值得进一步深入的研究方向,具有较明确的社会经济效益前景,高流行特殊人群致病性研究至为重要。 |