目的：深入系统探讨志贺菌耐多药的分子基础，为解决近年来临床志贺菌耐多药对传染病防治带来的巨大挑战提供基础资料。 分法：本项目以一株福氏志贺菌敏感株为出发菌株，分别构建药物自身诱导耐多药株及基因水平转移耐多药株；采用mRNA消减杂交（SSH）和蛋白双向电泳等基因组和蛋白质组比较技术，对上述三株细菌进行研究，以获得与志贺菌耐多药相关基因和相关蛋白。 结果：建立了基于同一出发菌株的药物自身诱导志和基因水平转移志贺菌耐多药株。分别构建了志贺菌自身诱导株及基因水平转移株抑制性消减杂交文库，并克隆了新的志贺菌耐多药相关基因片段，部分差异基因筛选结果显示与药物诱导多重耐药相关机制有16S rRNA介导的氨基糖苷类抗生素的耐药机制；Rep蛋白调节的质粒耐药；膜融合蛋白流出泵介导的主动流出机制；限制—修复系统；转座子耐药模式；与基因转移多重耐药相关机制有23S rRNA介导的大环内酯类抗菌药物的耐药机制；转座子耐药模式；葡萄糖代谢gnt操纵子；DNA旋转酶基因b亚单位介导的喹诺酮类药物的耐药机制。首次发现转座子耐药模式在垂直诱导及基因水平转移两种多重耐药方式中都存在。新发现了5个诱导多重耐药相关基因片段及5个基因转移多重耐药相关基因片段，可能代表某些未知多重耐药机制。蛋白质组学研究发现了与志贺菌耐多药有关的多个蛋白质，部分差异蛋白的蛋白质组学分析表明：无论敏感株是通过垂直诱导还是基因水平转移方式获得多重耐药性，一些在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量均上调，首次发现ABC转运蛋白在志贺菌两种方式多重耐药机制中起重要作用；CRISPR相关蛋白及Hsp60的分子伴侣蛋白为仅在基因转移多重耐药中出现的蛋白，可能代表了基因水平转移多重耐药的新机制。 结论：综合基因组学及蛋白质组学研究结果，证实志贺菌的多重耐药是在各种代谢酶调节下多机制参与的复杂过程。新发现的与细菌耐多药相关基因和蛋白质，为揭示细菌耐多药新的分子机制提供科学依据，为本研究为阐明志贺菌药物自身诱导与基因水平转移两种耐多药机制提供分子基础，对志贺菌耐多药流行病学监测与控制、临床抗生素应用、耐药监测和新型抗菌药物研发等提供科学依据。

目的：深入系统探讨志贺菌耐多药的分子基础，为解决近年来临床志贺菌耐多药对传染病防治带来的巨大挑战提供基础资料。 分法：本项目以一株福氏志贺菌敏感株为出发菌株，分别构建药物自身诱导耐多药株及基因水平转移耐多药株；采用mRNA消减杂交（SSH）和蛋白双向电泳等基因组和蛋白质组比较技术，对上述三株细菌进行研究，以获得与志贺菌耐多药相关基因和相关蛋白。 结果：建立了基于同一出发菌株的药物自身诱导志和基因水平转移志贺菌耐多药株。分别构建了志贺菌自身诱导株及基因水平转移株抑制性消减杂交文库，并克隆了新的志贺菌耐多药相关基因片段，部分差异基因筛选结果显示与药物诱导多重耐药相关机制有16S rRNA介导的氨基糖苷类抗生素的耐药机制；Rep蛋白调节的质粒耐药；膜融合蛋白流出泵介导的主动流出机制；限制—修复系统；转座子耐药模式；与基因转移多重耐药相关机制有23S rRNA介导的大环内酯类抗菌药物的耐药机制；转座子耐药模式；葡萄糖代谢gnt操纵子；DNA旋转酶基因b亚单位介导的喹诺酮类药物的耐药机制。首次发现转座子耐药模式在垂直诱导及基因水平转移两种多重耐药方式中都存在。新发现了5个诱导多重耐药相关基因片段及5个基因转移多重耐药相关基因片段，可能代表某些未知多重耐药机制。蛋白质组学研究发现了与志贺菌耐多药有关的多个蛋白质，部分差异蛋白的蛋白质组学分析表明：无论敏感株是通过垂直诱导还是基因水平转移方式获得多重耐药性，一些在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量均上调，首次发现ABC转运蛋白在志贺菌两种方式多重耐药机制中起重要作用；CRISPR相关蛋白及Hsp60的分子伴侣蛋白为仅在基因转移多重耐药中出现的蛋白，可能代表了基因水平转移多重耐药的新机制。 结论：综合基因组学及蛋白质组学研究结果，证实志贺菌的多重耐药是在各种代谢酶调节下多机制参与的复杂过程。新发现的与细菌耐多药相关基因和蛋白质，为揭示细菌耐多药新的分子机制提供科学依据，为本研究为阐明志贺菌药物自身诱导与基因水平转移两种耐多药机制提供分子基础，对志贺菌耐多药流行病学监测与控制、临床抗生素应用、耐药监测和新型抗菌药物研发等提供科学依据。