中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白是lipocalin家族的新成员，研究发现NGAL的定量监测在多种实体肿瘤、细菌感染、肾脏疾患的早期诊断、疗效观察和预后判断等多方面有着重要意义。 国内现在临床上没有检测NGAL 的ELISA试剂盒供应，因此我们没有进行实验对比。但理论上分析，荧光定量PCR检测方法是对mRNA丰度进行绝对定量性的检测，结果准确、易于自动化；而绝大多数ELISA方法则是对蛋白质进行定性检测或相对定量检测，自动化程度也相对较低。 实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，检测原理是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 本研究的目的就是建立NGAL mRNA的荧光定量PCR检测方法，为临床定量检测NGAL mRNA奠定基础。 本研究制作的标准曲线相关系数为98.9﹪，无非特异性扩增。其线性检测范围为102～109copies/μl；灵敏度为10copies/μl.高拷贝样品的天间CV为3.57﹪、批内CV为2.95﹪，低拷贝样品的天间CV为3.24﹪、批内CV为1.85﹪；特异性好。 对临床标木的检测结果与预期设想完全相符。肿瘤组织、癌旁组织正常组织的NGAL mRNA水平呈明显的下降梯度。与普通PCR相比，该检测方法灵敏度要高约100倍。 本成果的创造性体现在成功构建了荧光定量PCR检测体系和NGAL mRNA的定量标准品，并在此基础上优化了反应条件，成功建立了NGAL mRNA荧光定量PCR检测方法。经查新，国内未见相关报道。 本研究的意义： 研究表明NGAL与细菌感染性或非细菌性感染性疾病、一些慢性炎症、肿瘤的侵袭与转移以及与肿瘤细胞的调节与分化关系密切。而且NGAL与炎症的研究结果表明，NGAL在这些疾病中的表达特征趋于成熟，极有可能成为多种临床炎症相关性疾病诊断的标志物，同时NGAL在肿瘤的侵袭转移过程的功能与机制也趋于明朗，因此NGAL的定量监测在多种实体肿瘤、细菌感染、肾脏疾患的早期诊断、疗效观察和预后判断等多方面有着重要意义。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白是lipocalin家族的新成员，研究发现NGAL的定量监测在多种实体肿瘤、细菌感染、肾脏疾患的早期诊断、疗效观察和预后判断等多方面有着重要意义。 国内现在临床上没有检测NGAL 的ELISA试剂盒供应，因此我们没有进行实验对比。但理论上分析，荧光定量PCR检测方法是对mRNA丰度进行绝对定量性的检测，结果准确、易于自动化；而绝大多数ELISA方法则是对蛋白质进行定性检测或相对定量检测，自动化程度也相对较低。 实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，检测原理是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 本研究的目的就是建立NGAL mRNA的荧光定量PCR检测方法，为临床定量检测NGAL mRNA奠定基础。 本研究制作的标准曲线相关系数为98.9﹪，无非特异性扩增。其线性检测范围为102～109copies/μl；灵敏度为10copies/μl.高拷贝样品的天间CV为3.57﹪、批内CV为2.95﹪，低拷贝样品的天间CV为3.24﹪、批内CV为1.85﹪；特异性好。 对临床标木的检测结果与预期设想完全相符。肿瘤组织、癌旁组织正常组织的NGAL mRNA水平呈明显的下降梯度。与普通PCR相比，该检测方法灵敏度要高约100倍。 本成果的创造性体现在成功构建了荧光定量PCR检测体系和NGAL mRNA的定量标准品，并在此基础上优化了反应条件，成功建立了NGAL mRNA荧光定量PCR检测方法。经查新，国内未见相关报道。 本研究的意义： 研究表明NGAL与细菌感染性或非细菌性感染性疾病、一些慢性炎症、肿瘤的侵袭与转移以及与肿瘤细胞的调节与分化关系密切。而且NGAL与炎症的研究结果表明，NGAL在这些疾病中的表达特征趋于成熟，极有可能成为多种临床炎症相关性疾病诊断的标志物，同时NGAL在肿瘤的侵袭转移过程的功能与机制也趋于明朗，因此NGAL的定量监测在多种实体肿瘤、细菌感染、肾脏疾患的早期诊断、疗效观察和预后判断等多方面有着重要意义。