脑膜炎奈瑟菌(Nm)对环境的温度十分敏感，在没有保护措施的情况下，低于22℃时很快死亡，传统的Nm带菌调查检出率常常很低(0～1.5％)。这是因为：（1）由于采样的棉拭子粘取的样本在棉签上不可能均匀分布，有时有样本的部位没有能接种到平板培养基上，降低了目的菌的检出率；（2）由于是用棉签直接接种，菌落的分布极不均匀，在菌落密集区，很难找到可疑的目的菌菌落；（3）Nm的带菌检查一般都是在寒冷的冬季，现场采样时需携带大批的采样器材和保温设备，并且在运输过程中有些设备或器材容易发生损坏，使得已采好的样本丢失，降低了人群带菌调查的工作效率。 　　本项研究工作技术构思是利用某一种保护剂，延长目的菌的生存时间，使目的菌在寒冷的环境中能够安全地运到实验室。主要研究内容及其关键技术是找到这种有效的保护剂，使其同时具有对目的菌的保菌、增菌作用，又对非目的菌有抑菌作用，便于目的菌的检出，目的菌在这种培养基中，于0℃～10℃时，1小时内，仅有一个活菌时也能检出；48小时内目的菌的死亡率低于10％。 　　本项研究应用我们自己研制的具有保菌增菌作用的“小牛血清双抗培养基”进行各项试验。首先将已知菌种加入培养基中进行冷冻试验，冷冻前，A、C群Nm的生理盐水、小牛血清“双抗”培养基制成悬液活菌含量分别为：2.4×10^6CFU/ml、4×10^6CFU/ml；7×10^5CFU/ml、8.4×10^5CFU/ml。冷冻保存12小时后，生理盐水中的A、C群Nm已检不出有活菌存在。4℃24小时内，保存于其内的Nm的活菌含量未见明显下降（t=0.25，P＞0.5），至96小时仍有一大部分细菌存活；当活菌数下降至3～9CFU/ml时，通过37℃培养18～24小时，可使活菌含量增加到6～7×10^7CFU/ml。本研究两次共检查了801人，其中0岁组111人，1～2岁组136人，3～4岁组115人，5～6岁组107人，7～14岁组112人，15～19岁组109人，20岁以上组111人。以上各年龄组应用常规方法检验时，除15～19岁组于2007年检出一株C型Nm，其它各组均未检出；应用新方法，共检出Nm14株，其中7～14岁组于2006年检出3株；15～19岁组2006年检出3株、2007年检出8株。这14株Nm分别为A群4株、B群4株和C群6株。结果表明，应用小牛血清“双抗”培养基作采样时的保菌剂和检测时的增菌剂，可适用于A、B、C群Nm检测，且有明显提高检出率的作用（P=0.001）。 　　从上述结果可以看出，小牛血清“双抗”培养基具有明显的保菌增菌作用，可以保证在现场采集的样本中Nm在带回实验室检测前能够存活，且有良好的增菌作用和抑制杂菌生长的作用，从而大大地提高了健康人群中Nm的检出率。 　　本项研究成果经专家鉴定，达到国内领先水平。 　　本项研究中，我们发明和应用的“小牛血清‘双抗’培养基”，经国家知识产权局专利局审查，已经批准授予“发明专利”。 　　本项研究工作中研制成功的“小牛血清‘双抗’培养基”无需特殊的材料，制作简单，使用方便，在寒冷的气候条件下有利于脑膜炎奈瑟菌存活，在适当培养条件下则有利于脑膜炎奈瑟菌的生长繁殖，便于检出这种致病菌，大大提高了脑膜炎奈瑟菌的检出率，能准确反映脑膜炎奈瑟菌在人群中的消长情况，为预防和控制流脑提供了更加科学的依据。该培养基及其检验方法已由江苏省疾病预防控制中心对全省疾控系统进行了两次业务培训，并应用于实际工作中。该方法适用于各级疾病预防控制机构以及二等乙级以上的各级医疗机构，具有较为广阔的使用前景。

　　脑膜炎奈瑟菌(Nm)对环境的温度十分敏感，在没有保护措施的情况下，低于22℃时很快死亡，传统的Nm带菌调查检出率常常很低(0～1.5％)。这是因为：（1）由于采样的棉拭子粘取的样本在棉签上不可能均匀分布，有时有样本的部位没有能接种到平板培养基上，降低了目的菌的检出率；（2）由于是用棉签直接接种，菌落的分布极不均匀，在菌落密集区，很难找到可疑的目的菌菌落；（3）Nm的带菌检查一般都是在寒冷的冬季，现场采样时需携带大批的采样器材和保温设备，并且在运输过程中有些设备或器材容易发生损坏，使得已采好的样本丢失，降低了人群带菌调查的工作效率。 　　本项研究工作技术构思是利用某一种保护剂，延长目的菌的生存时间，使目的菌在寒冷的环境中能够安全地运到实验室。主要研究内容及其关键技术是找到这种有效的保护剂，使其同时具有对目的菌的保菌、增菌作用，又对非目的菌有抑菌作用，便于目的菌的检出，目的菌在这种培养基中，于0℃～10℃时，1小时内，仅有一个活菌时也能检出；48小时内目的菌的死亡率低于10％。 　　本项研究应用我们自己研制的具有保菌增菌作用的“小牛血清双抗培养基”进行各项试验。首先将已知菌种加入培养基中进行冷冻试验，冷冻前，A、C群Nm的生理盐水、小牛血清“双抗”培养基制成悬液活菌含量分别为：2.4×10^6CFU/ml、4×10^6CFU/ml；7×10^5CFU/ml、8.4×10^5CFU/ml。冷冻保存12小时后，生理盐水中的A、C群Nm已检不出有活菌存在。4℃24小时内，保存于其内的Nm的活菌含量未见明显下降（t=0.25，P＞0.5），至96小时仍有一大部分细菌存活；当活菌数下降至3～9CFU/ml时，通过37℃培养18～24小时，可使活菌含量增加到6～7×10^7CFU/ml。本研究两次共检查了801人，其中0岁组111人，1～2岁组136人，3～4岁组115人，5～6岁组107人，7～14岁组112人，15～19岁组109人，20岁以上组111人。以上各年龄组应用常规方法检验时，除15～19岁组于2007年检出一株C型Nm，其它各组均未检出；应用新方法，共检出Nm14株，其中7～14岁组于2006年检出3株；15～19岁组2006年检出3株、2007年检出8株。这14株Nm分别为A群4株、B群4株和C群6株。结果表明，应用小牛血清“双抗”培养基作采样时的保菌剂和检测时的增菌剂，可适用于A、B、C群Nm检测，且有明显提高检出率的作用（P=0.001）。 　　从上述结果可以看出，小牛血清“双抗”培养基具有明显的保菌增菌作用，可以保证在现场采集的样本中Nm在带回实验室检测前能够存活，且有良好的增菌作用和抑制杂菌生长的作用，从而大大地提高了健康人群中Nm的检出率。 　　本项研究成果经专家鉴定，达到国内领先水平。 　　本项研究中，我们发明和应用的“小牛血清‘双抗’培养基”，经国家知识产权局专利局审查，已经批准授予“发明专利”。 　　本项研究工作中研制成功的“小牛血清‘双抗’培养基”无需特殊的材料，制作简单，使用方便，在寒冷的气候条件下有利于脑膜炎奈瑟菌存活，在适当培养条件下则有利于脑膜炎奈瑟菌的生长繁殖，便于检出这种致病菌，大大提高了脑膜炎奈瑟菌的检出率，能准确反映脑膜炎奈瑟菌在人群中的消长情况，为预防和控制流脑提供了更加科学的依据。该培养基及其检验方法已由江苏省疾病预防控制中心对全省疾控系统进行了两次业务培训，并应用于实际工作中。该方法适用于各级疾病预防控制机构以及二等乙级以上的各级医疗机构，具有较为广阔的使用前景。