简要技术说明： 　　一、动物实验部分： 　　将CD-1小鼠随机分为5组，正常对照组(N)、单纯糖尿病组(DM)、糖尿病+空质粒组（DM+V）、糖尿病+SOCS-1质粒组（DM+S1）和糖尿病+SOCS-3质粒组（DM+S3）。每组8只，DM、DM+V、DM+S1和DM+S3组小鼠腹腔单次注射链脲佐菌素150mg/kg（STZ溶于0.1mol/L枸橼酸盐缓冲液中，pH值4.5），对照组只注射相同体。质粒转染采用快速尾静脉注射方式。于实验的第4周处死动物，进行以下观察： 　　（1）常规石蜡包埋，HE染色及特殊染色，形态学观察及图像分析。 　　（2）免疫组化检测肾小球TGF-β1、MCP-1、ICAM-1和F4/80表达。 　　（3）蛋白印迹检测肾皮质SOCS-1、p-STAT1、 MCP-1、ICAM-1和TGF-β1表达。 　　（4） RT-PCR检测肾皮质TGF-β1和MCP-1 mRNA的表达。 　　二、细胞培养部分： 　　体外培养肾脏细胞进行以下观察： 　　（1）高糖对系膜细胞SOCS-1、SOCS-3蛋白及mRNA的表达的影响。 　　（2）AGEs对HKC中SOCS-1、SOCS-3蛋白及mRNA的表达影响。 　　（3）SOCS-1或SOCS-3基因转染HMC细胞增殖、细胞凋亡及TGF-β、细胞外基质FN蛋白表达的影响。 　　（4）SOCS-1或SOCS-3基因转染对AGEs诱导HKC细胞转分化的影响。 　　（5）SOCS-1过表达对高糖条件下MCP-1表达的影响。 　　主要研究结果 　　糖尿病早期肾脏出现肥大、STAT1激活伴随单核/巨噬细胞的积聚，MCP-1及ICAM-1表达增多，提示JAK/STAT信号激活以及炎症反应参与了糖尿病早期肾脏的损伤。肾脏过度表达SOCS-1或SOCS-3基因能够减轻糖尿病早期肾脏的肥大，抑制STAT1的激活、单核/巨噬细胞的积聚、MCP-1和ICAM-1蛋白以及TGF-β1蛋白及mRNA的表达。 　　SOCS-1、SOCS-3在HMC及HKC mRNA及蛋白水平均有基础表达，SOCS-1表达较弱，表达主要定位于肾小球系膜细胞、肾小管细胞胞浆。HG诱导下HMC及AGEs 诱导下HKC SOCS-1、SOCS-3 mRNA及蛋白水平表达明显上调，并伴随着JAK2、STAT1的磷酸化增强。AG490通过抑制JAK2的磷酸化，导致p-STAT1、SOCS-1、SOCS-3表达下调，表明JAK-STAT-SOCS通路内存在级联反应。 　　HG能刺激HMC细胞增殖，细胞凋亡，分泌TGF-β和细胞外基质FN。SOCS-1和SOCS-3可能通过抑制JAK/STAT信号途径来抑制HG诱导的肾小球系膜细胞增殖以及TGF-β和细胞外基质FN的表达。 　　SOCS-1和SOCS-3基因转染能够抑制AGEs诱导的肾小管上皮细胞转分化，这种作用可能部分是通过抑制JAK/STAT信号通路的激活化实现的。 　　SOCS-1基因转染能够抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞MCP-1的表达，这种作用可能部分是通过抑制JAK/STAT信号途径的激活实现的。 　　应用前景： 　　目前，本项目内容已在发表论文SCI论文3篇，中文核心期刊论文3篇。待发表论文3篇。参加国际学术交流1次，国内学术会议交流2次。研究成果公开发表及进行学术会议交流后，我们的成果引起了广大肾脏病学者及药学研究工作者的广泛关注，为进一步阐明DN发病机制提供了新的线索，为DN的防治提供了新的思路，我们将与分子生物学及药学工作者寻求合作，开发一些新的药物，为临床DN的防治提供切实可行的途径。

　　简要技术说明： 　　一、动物实验部分： 　　将CD-1小鼠随机分为5组，正常对照组(N)、单纯糖尿病组(DM)、糖尿病+空质粒组（DM+V）、糖尿病+SOCS-1质粒组（DM+S1）和糖尿病+SOCS-3质粒组（DM+S3）。每组8只，DM、DM+V、DM+S1和DM+S3组小鼠腹腔单次注射链脲佐菌素150mg/kg（STZ溶于0.1mol/L枸橼酸盐缓冲液中，pH值4.5），对照组只注射相同体。质粒转染采用快速尾静脉注射方式。于实验的第4周处死动物，进行以下观察： 　　（1）常规石蜡包埋，HE染色及特殊染色，形态学观察及图像分析。 　　（2）免疫组化检测肾小球TGF-β1、MCP-1、ICAM-1和F4/80表达。 　　（3）蛋白印迹检测肾皮质SOCS-1、p-STAT1、 MCP-1、ICAM-1和TGF-β1表达。 　　（4） RT-PCR检测肾皮质TGF-β1和MCP-1 mRNA的表达。 　　二、细胞培养部分： 　　体外培养肾脏细胞进行以下观察： 　　（1）高糖对系膜细胞SOCS-1、SOCS-3蛋白及mRNA的表达的影响。 　　（2）AGEs对HKC中SOCS-1、SOCS-3蛋白及mRNA的表达影响。 　　（3）SOCS-1或SOCS-3基因转染HMC细胞增殖、细胞凋亡及TGF-β、细胞外基质FN蛋白表达的影响。 　　（4）SOCS-1或SOCS-3基因转染对AGEs诱导HKC细胞转分化的影响。 　　（5）SOCS-1过表达对高糖条件下MCP-1表达的影响。 　　主要研究结果 　　糖尿病早期肾脏出现肥大、STAT1激活伴随单核/巨噬细胞的积聚，MCP-1及ICAM-1表达增多，提示JAK/STAT信号激活以及炎症反应参与了糖尿病早期肾脏的损伤。肾脏过度表达SOCS-1或SOCS-3基因能够减轻糖尿病早期肾脏的肥大，抑制STAT1的激活、单核/巨噬细胞的积聚、MCP-1和ICAM-1蛋白以及TGF-β1蛋白及mRNA的表达。 　　SOCS-1、SOCS-3在HMC及HKC mRNA及蛋白水平均有基础表达，SOCS-1表达较弱，表达主要定位于肾小球系膜细胞、肾小管细胞胞浆。HG诱导下HMC及AGEs 诱导下HKC SOCS-1、SOCS-3 mRNA及蛋白水平表达明显上调，并伴随着JAK2、STAT1的磷酸化增强。AG490通过抑制JAK2的磷酸化，导致p-STAT1、SOCS-1、SOCS-3表达下调，表明JAK-STAT-SOCS通路内存在级联反应。 　　HG能刺激HMC细胞增殖，细胞凋亡，分泌TGF-β和细胞外基质FN。SOCS-1和SOCS-3可能通过抑制JAK/STAT信号途径来抑制HG诱导的肾小球系膜细胞增殖以及TGF-β和细胞外基质FN的表达。 　　SOCS-1和SOCS-3基因转染能够抑制AGEs诱导的肾小管上皮细胞转分化，这种作用可能部分是通过抑制JAK/STAT信号通路的激活化实现的。 　　SOCS-1基因转染能够抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞MCP-1的表达，这种作用可能部分是通过抑制JAK/STAT信号途径的激活实现的。 　　应用前景： 　　目前，本项目内容已在发表论文SCI论文3篇，中文核心期刊论文3篇。待发表论文3篇。参加国际学术交流1次，国内学术会议交流2次。研究成果公开发表及进行学术会议交流后，我们的成果引起了广大肾脏病学者及药学研究工作者的广泛关注，为进一步阐明DN发病机制提供了新的线索，为DN的防治提供了新的思路，我们将与分子生物学及药学工作者寻求合作，开发一些新的药物，为临床DN的防治提供切实可行的途径。