1.任务来源： 　　院内立项课题，经费来自本院及课题组。 　　2.应用领域和技术原理： 　　本课题收集从本院各科患者感染部位采取标本，接种血平板、麦康凯平板，37℃孵育24h后分纯，根据革兰染色、生化反应等进行鉴定，必要时用微生物鉴定仪（法国梅里埃全自动微生物鉴定仪）进行菌种鉴定法，共筛选103株鲍曼不动杆菌作为研究对象，应用NCCLS推荐的K-B法进行药敏试验并进行结果判读。采用双纸片琼脂扩散法和传统三维法以及协同法进行产酶耐药表型监测。从而探讨本地区本院临床感染鲍曼不动杆菌耐药菌株的流行情况及诱导耐药酶表型的发生率，以不断提高本院抗菌药物治疗效果，帮助临床合理有效及时的使用正确的抗菌药物。同时动态掌握本院感染鲍曼不动杆菌耐药菌株的流行特点及细菌耐药酶临床分布和发生率，为临床抗感染药物的选择提供进一步合理用药的建议。 　　3.性能指标： 　　鲍曼不动杆菌在本地区本院各病区的临床分布及耐药基因表型的流行特点，提高本地区、本院抗菌药物治疗效果，使临床有针对性合理选用抗菌药物。同时为有效预防和控制该菌多重耐药的感染，防止耐药菌株的传播和扩散，延续耐药菌株的发生提供帮助。 　　关键技术指标 　　产酶耐药表型检测： 　　（1）ESBLs酶测定：采用NCCLS推荐的方法（双纸片琼脂扩散法）进行，筛选试验确证试验。 　　（2）AMPC酶检测：采用三维法，筛选试验（头孢西丁＜18mm）确证试验. 　　（3）金属酶（MBL）测定：筛选试验：亚胺培南小于16mm，确证试验：EDTA-K2与头孢他啶、头孢噻肟、亚胺培南之间任一纸片间出现抑菌环扩大则阳性。 　　（4）SSBL判断：同时产ESBLs和AMPC酶，则为SSBL阳性。 　　4.国内外同类技术比较： 　　随着抗菌药物在临床上的广泛应用，细菌对抗菌药物耐药问题日趋严重，其耐药水平越来越高，出现了多重耐药菌株，耐药问题已成为全球关注热点。 　　目前由于各种内酰胺酶的产生导致鲍曼不动杆菌对内酰胺类抗生素普遍耐药，其中产ESBLs酶、产AMPC酶在持续使用头孢西丁、内酰胺酶、酶抑制剂等抗生素的压力下日益增多，鲍曼不动杆菌的临床分离率逐年上升，多重耐药鲍曼不动杆菌已成为医院ICU、呼吸科、神经外科感染的重要病原菌。 　　美国65个实验室对1998～2001年鲍曼不动杆菌药敏实验监测结果显示，亚胺培南敏感率96.5﹪，头孢吡肟、头孢他啶敏感率80﹪～90﹪，哌拉西林/克拉维酸敏感率大于90﹪，环丙沙星敏感率70﹪～80﹪。台湾地区对亚胺培南耐药率达22﹪。2002年1至12月全国细菌耐药监测网所属57家三家医院调查发现，鲍曼不动杆菌分离率为4.2﹪，并发现对17种临床常用药物的耐药率4.3﹪～86.9﹪，2005年15家医院用浓度梯度法及琼脂稀释法检测医院感染耐药性项目监测显示，对SCF耐药率为11﹪，3、4代头孢耐药率达51﹪，多粘菌素B耐药率1.7﹪。黄支密报道29株分离自下呼吸道感染鲍曼不动杆菌有82﹪产ESBLs酶，其中14株合并产AMPC酶，罗兰等对247株鲍曼不动杆菌研究结果是3代头孢耐药率达44.1﹪～100﹪，亚胺培南23.3﹪，头孢哌酮/舒谱深耐药达9.5﹪，呈多重耐药。 　　大量研究表明不同地区、不同医院对药物使用种类、数量不同，流行耐药菌株不同，不同耐药表型其耐药性存在差异，对抗生素反应不同。本课题采用NCCLS推荐的药敏实验及耐药酶检测方法，对临床筛选103株多重耐药鲍曼不动杆菌进行检测、分析，及时、准确发现鲍曼不动杆菌在本院各病区的临床分布及耐药基因型的流行特点，指导临床合理有效的选择抗菌药物，动态掌握鲍曼不动杆菌在本地区的耐药性及耐药谱型变化趋势，为有效预防和控制该菌多重耐药的感染，防止耐药菌株的传播和扩散，延续耐药菌株的发生提供帮助。 　　5.成果的创造性、先进性： 　　鲍曼不动杆菌是临床上检出率仅次于铜绿假单胞菌及嗜麦芽窄食单胞菌，也是最常见的引起严重院内获得性感染的条件致病菌，该菌引起菌血症、泌尿系统感染在ICU病房中引起医院获得性肺炎。近年来，随着临床抗感染药物的广泛使用，产酶菌株日益增长，并且通过质粒介导造成耐药菌株传播。加强耐药表型研究，有效预防耐药菌株引发的感染性疾患，控制多重耐药菌株爆发流行非常重要。不同地区、不同医院的临床用药情况不同，流行菌株耐药型也不尽相同。对当地病原菌内酰胺酶菌株耐药基因型研究有利于当地抗生素合理应用及防治。本课题建立的目的是为了探讨鲍曼不动杆菌在本地区本院的临床分布及耐药表型的流行特点，提高本地区抗菌药物治疗效果，使临床有针对性的合理选用抗菌药物。同时为有效预防和控制该菌多重耐药的感染，防止耐药菌株的传播和扩散，延续耐药菌株的发生提供帮助。 　　6.应用范围及作用： 　　鲍曼不动杆菌耐主要机制是质粒介导ESBLs酶，染色体及质粒诱导产生AMPC酶以及金属酶，利用双纸片琼脂扩散及三维实验对实验菌株进行耐药酶检测，可为临床提供正确有效的用药方案，细菌一旦产ESBLs酶，就意味着临床应停用1、2、3、4代头孢菌素，同时ESBLs质粒位于质粒上，携带氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类耐药基因，对这些抗生素也产生耐药，可被酶抑制剂所抑制，一旦产AMPC酶，可选用四代头孢、亚胺培南，不能被抑制剂所抑制临床治疗无效。若产金属酶则临床停用所有抗生素。 　　7.推广应用情况以及存在的问题和改进意见： 　　通过本课题的研究动态掌握了临床感染鲍曼不动杆菌耐药菌株在本院各病区的临床分布及耐药酶表型发生率和流行特点，为临床经验用药，合理选择抗生素提供帮助，以提高经验用药的效果，减少细菌耐药性产生。今后要密切关注临床对亚胺培南的使用，加强本院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药性及耐药型的监测分析。

　　1.任务来源： 　　院内立项课题，经费来自本院及课题组。 　　2.应用领域和技术原理： 　　本课题收集从本院各科患者感染部位采取标本，接种血平板、麦康凯平板，37℃孵育24h后分纯，根据革兰染色、生化反应等进行鉴定，必要时用微生物鉴定仪（法国梅里埃全自动微生物鉴定仪）进行菌种鉴定法，共筛选103株鲍曼不动杆菌作为研究对象，应用NCCLS推荐的K-B法进行药敏试验并进行结果判读。采用双纸片琼脂扩散法和传统三维法以及协同法进行产酶耐药表型监测。从而探讨本地区本院临床感染鲍曼不动杆菌耐药菌株的流行情况及诱导耐药酶表型的发生率，以不断提高本院抗菌药物治疗效果，帮助临床合理有效及时的使用正确的抗菌药物。同时动态掌握本院感染鲍曼不动杆菌耐药菌株的流行特点及细菌耐药酶临床分布和发生率，为临床抗感染药物的选择提供进一步合理用药的建议。 　　3.性能指标： 　　鲍曼不动杆菌在本地区本院各病区的临床分布及耐药基因表型的流行特点，提高本地区、本院抗菌药物治疗效果，使临床有针对性合理选用抗菌药物。同时为有效预防和控制该菌多重耐药的感染，防止耐药菌株的传播和扩散，延续耐药菌株的发生提供帮助。 　　关键技术指标 　　产酶耐药表型检测： 　　（1）ESBLs酶测定：采用NCCLS推荐的方法（双纸片琼脂扩散法）进行，筛选试验确证试验。 　　（2）AMPC酶检测：采用三维法，筛选试验（头孢西丁＜18mm）确证试验. 　　（3）金属酶（MBL）测定：筛选试验：亚胺培南小于16mm，确证试验：EDTA-K2与头孢他啶、头孢噻肟、亚胺培南之间任一纸片间出现抑菌环扩大则阳性。 　　（4）SSBL判断：同时产ESBLs和AMPC酶，则为SSBL阳性。 　　4.国内外同类技术比较： 　　随着抗菌药物在临床上的广泛应用，细菌对抗菌药物耐药问题日趋严重，其耐药水平越来越高，出现了多重耐药菌株，耐药问题已成为全球关注热点。 　　目前由于各种内酰胺酶的产生导致鲍曼不动杆菌对内酰胺类抗生素普遍耐药，其中产ESBLs酶、产AMPC酶在持续使用头孢西丁、内酰胺酶、酶抑制剂等抗生素的压力下日益增多，鲍曼不动杆菌的临床分离率逐年上升，多重耐药鲍曼不动杆菌已成为医院ICU、呼吸科、神经外科感染的重要病原菌。 　　美国65个实验室对1998～2001年鲍曼不动杆菌药敏实验监测结果显示，亚胺培南敏感率96.5﹪，头孢吡肟、头孢他啶敏感率80﹪～90﹪，哌拉西林/克拉维酸敏感率大于90﹪，环丙沙星敏感率70﹪～80﹪。台湾地区对亚胺培南耐药率达22﹪。2002年1至12月全国细菌耐药监测网所属57家三家医院调查发现，鲍曼不动杆菌分离率为4.2﹪，并发现对17种临床常用药物的耐药率4.3﹪～86.9﹪，2005年15家医院用浓度梯度法及琼脂稀释法检测医院感染耐药性项目监测显示，对SCF耐药率为11﹪，3、4代头孢耐药率达51﹪，多粘菌素B耐药率1.7﹪。黄支密报道29株分离自下呼吸道感染鲍曼不动杆菌有82﹪产ESBLs酶，其中14株合并产AMPC酶，罗兰等对247株鲍曼不动杆菌研究结果是3代头孢耐药率达44.1﹪～100﹪，亚胺培南23.3﹪，头孢哌酮/舒谱深耐药达9.5﹪，呈多重耐药。 　　大量研究表明不同地区、不同医院对药物使用种类、数量不同，流行耐药菌株不同，不同耐药表型其耐药性存在差异，对抗生素反应不同。本课题采用NCCLS推荐的药敏实验及耐药酶检测方法，对临床筛选103株多重耐药鲍曼不动杆菌进行检测、分析，及时、准确发现鲍曼不动杆菌在本院各病区的临床分布及耐药基因型的流行特点，指导临床合理有效的选择抗菌药物，动态掌握鲍曼不动杆菌在本地区的耐药性及耐药谱型变化趋势，为有效预防和控制该菌多重耐药的感染，防止耐药菌株的传播和扩散，延续耐药菌株的发生提供帮助。 　　5.成果的创造性、先进性： 　　鲍曼不动杆菌是临床上检出率仅次于铜绿假单胞菌及嗜麦芽窄食单胞菌，也是最常见的引起严重院内获得性感染的条件致病菌，该菌引起菌血症、泌尿系统感染在ICU病房中引起医院获得性肺炎。近年来，随着临床抗感染药物的广泛使用，产酶菌株日益增长，并且通过质粒介导造成耐药菌株传播。加强耐药表型研究，有效预防耐药菌株引发的感染性疾患，控制多重耐药菌株爆发流行非常重要。不同地区、不同医院的临床用药情况不同，流行菌株耐药型也不尽相同。对当地病原菌内酰胺酶菌株耐药基因型研究有利于当地抗生素合理应用及防治。本课题建立的目的是为了探讨鲍曼不动杆菌在本地区本院的临床分布及耐药表型的流行特点，提高本地区抗菌药物治疗效果，使临床有针对性的合理选用抗菌药物。同时为有效预防和控制该菌多重耐药的感染，防止耐药菌株的传播和扩散，延续耐药菌株的发生提供帮助。 　　6.应用范围及作用： 　　鲍曼不动杆菌耐主要机制是质粒介导ESBLs酶，染色体及质粒诱导产生AMPC酶以及金属酶，利用双纸片琼脂扩散及三维实验对实验菌株进行耐药酶检测，可为临床提供正确有效的用药方案，细菌一旦产ESBLs酶，就意味着临床应停用1、2、3、4代头孢菌素，同时ESBLs质粒位于质粒上，携带氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类耐药基因，对这些抗生素也产生耐药，可被酶抑制剂所抑制，一旦产AMPC酶，可选用四代头孢、亚胺培南，不能被抑制剂所抑制临床治疗无效。若产金属酶则临床停用所有抗生素。 　　7.推广应用情况以及存在的问题和改进意见： 　　通过本课题的研究动态掌握了临床感染鲍曼不动杆菌耐药菌株在本院各病区的临床分布及耐药酶表型发生率和流行特点，为临床经验用药，合理选择抗生素提供帮助，以提高经验用药的效果，减少细菌耐药性产生。今后要密切关注临床对亚胺培南的使用，加强本院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药性及耐药型的监测分析。