意义：随着社会日益老龄化和人民生活水平的不断提高，糖尿病下肢缺血的发病率不断提高，糖尿病下肢缺血主要是由于糖尿病患者动脉硬化闭塞造成的下肢远端组织缺血、缺氧所致的临床征候群。内科的药物，血管旁路移植，下肢动脉硬化闭塞疾病的经皮腔内血管成形术（PTA），支架植入等在糖尿病下肢缺血中不断应用，但对于年老体弱，经常伴有心脑血管病变，无法承受手术搭桥或血管介入治疗等刺激及缺乏远段动脉流出道的患者，自体骨髓干细胞或脐血干细胞移植作为血管再生的新技术，为这部分患者提供了一种新的救治方法。 　　基本原理：本研究旨在通过血清肿瘤坏死因子a(TNF-a)与白细胞介素6(IL-6)水平在自体骨髓干细胞移种植治疗糖尿病下肢缺血患者中的变化，探讨TNF-α、IL-6与之关系。 　　技术指标：TNF-α、IL-6测定，踝肱指数（ABI）测定，经皮氧分压（TcPO_2）测定，皮温测定。进行统计学分析处理，然后分析、总结。 　　1、移植前准备： 　　（1）骨髓动员：所有患者均使用粒细胞集落刺激因子(GSF)，3～4d，外周血中白细胞增加(3.0～5.0)×10^9/L之间，平均为4.6×10^9/L，骨髓动员期间均用低分子肝素钙抗凝治疗。 　　（2）所有患者术前均排出肿瘤患者及多肿瘤检测正常。 　　2、移植方法：局部麻醉下从髂后上嵴抽取骨髓200mL，按照骨髓、脐带血有核细胞体外分离试剂盒(宁夏中联达生物有限公司)去除红细胞，密度梯度离心，分离出单个核细胞，再将收获的单个核细胞制成30mL左右的细胞悬液备用。本组单次移植提取的单个核细胞总量平均为(3.75±2.46)×10^9，沿闭塞的血管走形，间距2.0cm，每个点0.5ml，深1.0cm注意避开腓神经走形局部注射。 　　3、主要临床症状与体征及其评价指标： 　　（1）TNF-α、IL-6测定：实验组患者与对照组于清晨抽取空腹静脉血3ml离心后分离血清冻存，实验前将标本置室温复溶后进行检测，所有样本一次性完成，以消除批间误差。TNF-α、IL-6均采用放射免疫分析，试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免所提供。由专业人员按说明书操作。测量仪器为上海原子核所日环光电仪器有限公司提供的SN-697型γ计数仪。 　　（2）踝肱指数（ABI）测定：前所有患者均行ABI测定。 　　（3）经皮氧分压（TcPO_2）测定：所有患者在移植前均进行经皮氧分压测定。 　　（4）皮温测定：移植前后用瑞士产PICCOLO多功能红外线体温仪检测足部皮温。

　　意义：随着社会日益老龄化和人民生活水平的不断提高，糖尿病下肢缺血的发病率不断提高，糖尿病下肢缺血主要是由于糖尿病患者动脉硬化闭塞造成的下肢远端组织缺血、缺氧所致的临床征候群。内科的药物，血管旁路移植，下肢动脉硬化闭塞疾病的经皮腔内血管成形术（PTA），支架植入等在糖尿病下肢缺血中不断应用，但对于年老体弱，经常伴有心脑血管病变，无法承受手术搭桥或血管介入治疗等刺激及缺乏远段动脉流出道的患者，自体骨髓干细胞或脐血干细胞移植作为血管再生的新技术，为这部分患者提供了一种新的救治方法。 　　基本原理：本研究旨在通过血清肿瘤坏死因子a(TNF-a)与白细胞介素6(IL-6)水平在自体骨髓干细胞移种植治疗糖尿病下肢缺血患者中的变化，探讨TNF-α、IL-6与之关系。 　　技术指标：TNF-α、IL-6测定，踝肱指数（ABI）测定，经皮氧分压（TcPO_2）测定，皮温测定。进行统计学分析处理，然后分析、总结。 　　1、移植前准备： 　　（1）骨髓动员：所有患者均使用粒细胞集落刺激因子(GSF)，3～4d，外周血中白细胞增加(3.0～5.0)×10^9/L之间，平均为4.6×10^9/L，骨髓动员期间均用低分子肝素钙抗凝治疗。 　　（2）所有患者术前均排出肿瘤患者及多肿瘤检测正常。 　　2、移植方法：局部麻醉下从髂后上嵴抽取骨髓200mL，按照骨髓、脐带血有核细胞体外分离试剂盒(宁夏中联达生物有限公司)去除红细胞，密度梯度离心，分离出单个核细胞，再将收获的单个核细胞制成30mL左右的细胞悬液备用。本组单次移植提取的单个核细胞总量平均为(3.75±2.46)×10^9，沿闭塞的血管走形，间距2.0cm，每个点0.5ml，深1.0cm注意避开腓神经走形局部注射。 　　3、主要临床症状与体征及其评价指标： 　　（1）TNF-α、IL-6测定：实验组患者与对照组于清晨抽取空腹静脉血3ml离心后分离血清冻存，实验前将标本置室温复溶后进行检测，所有样本一次性完成，以消除批间误差。TNF-α、IL-6均采用放射免疫分析，试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免所提供。由专业人员按说明书操作。测量仪器为上海原子核所日环光电仪器有限公司提供的SN-697型γ计数仪。 　　（2）踝肱指数（ABI）测定：前所有患者均行ABI测定。 　　（3）经皮氧分压（TcPO_2）测定：所有患者在移植前均进行经皮氧分压测定。 　　（4）皮温测定：移植前后用瑞士产PICCOLO多功能红外线体温仪检测足部皮温。