研究目的： 研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）致小鼠胚胎毒性和致骨骼畸形的作用；探讨DON导致小鼠胚胎畸形骨骼基因表达谱的变化，进一步阐明DON致骨骼畸形的分子机制；探讨DON对胚胎干细胞的细胞毒性和发育毒性作用。研究方法： ①将孕鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组和低、中、高三种剂量DON染毒组，每组6只。于孕期第7～10天连续进行腹腔注射染毒。于妊娠第18天处死孕鼠，记录活胎数、吸收（死）胎数、胎鼠体重。肉眼观察有无畸形；采用阿尔新蓝和茜素红进行活胎鼠骨骼、软骨双重染色，镜下观察骨骼发育情况。②应用NimbleGen 60mer全基因组长寡核苷酸基因表达谱芯片，测定DON诱导胎鼠畸形骨骼组织与正常骨骼组织差异基因表达谱，通过聚类分析对样本进行分组，并经Go分析软件对骨骼组织差异表达基因的生物学功能进行基因分类和注释基因的功能。③利用胚胎干细胞（ES）为试验模型，将不同浓度的DON分别作用于对数生长期的ES细胞24小时，MTT法检测DON对ES细胞增殖的影响。利用差速贴壁法，纯化ES细胞，流式细胞仪检测DON对细胞周期的影响。④用DON作用胚胎干细胞后，提取RNA，应用人全基因组长寡核苷酸基因表达谱芯片，测定DON对胚胎干细胞基因表达谱的改变，通过聚类分析对样本进行分组，并经Go分析软件对差异表达基因的生物学功能进行基因分类和注释基因的功能。通过KEGG Pathway分析有显著差异的信号传导通路。 　　研究结论：①DON导致胎鼠多发性骨骼畸形，以椎体畸形最多，其次为四肢畸形。DON具有胚胎发育毒性，导致活胎数、产仔数和胎鼠体重均较低。②DON致小鼠胚胎畸形骨骼基因表达谱的改变，在小鼠全基因组表达谱芯片上筛选到差异表达基因972条，其中下调455条，上调 517条。这些变化的差异基因与生物过程相关的占32.22%，分子功能占35.11%，细胞组分占32.68%。绝大多数变化的基因与细胞调节、信号传导、生物调节、发育过程、结合等有关。③DON致小鼠胚胎畸形骨骼差异表达基因的通路改变，其中，在筛选的972个差异表达基因中，涉及多条通路。这些通路多为氨基酸代谢类、核糖体、P53 、内吞作用、钙离子信号通路、Wnt通路等。④DON对小鼠胚胎干细胞有明显的毒性作用。抑制细胞增殖和细胞活性，主要抑制细胞增殖周期的S期。⑤DON对人胚胎干细胞基因表达有一定的影响。涉及与胚胎和骨骼发育密切相关的下调基因有： ZNF688、 DHCR24、DLL1、 UFD1L等；上调基因有：FOXM1、 HOXA11 、 LSR、 MIB1 等。涉及与骨骼发育相关的通路为P53、MAPK 、Wnt 信号通路、Ca离子通路等。

　　研究目的： 研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）致小鼠胚胎毒性和致骨骼畸形的作用；探讨DON导致小鼠胚胎畸形骨骼基因表达谱的变化，进一步阐明DON致骨骼畸形的分子机制；探讨DON对胚胎干细胞的细胞毒性和发育毒性作用。研究方法： ①将孕鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组和低、中、高三种剂量DON染毒组，每组6只。于孕期第7～10天连续进行腹腔注射染毒。于妊娠第18天处死孕鼠，记录活胎数、吸收（死）胎数、胎鼠体重。肉眼观察有无畸形；采用阿尔新蓝和茜素红进行活胎鼠骨骼、软骨双重染色，镜下观察骨骼发育情况。②应用NimbleGen 60mer全基因组长寡核苷酸基因表达谱芯片，测定DON诱导胎鼠畸形骨骼组织与正常骨骼组织差异基因表达谱，通过聚类分析对样本进行分组，并经Go分析软件对骨骼组织差异表达基因的生物学功能进行基因分类和注释基因的功能。③利用胚胎干细胞（ES）为试验模型，将不同浓度的DON分别作用于对数生长期的ES细胞24小时，MTT法检测DON对ES细胞增殖的影响。利用差速贴壁法，纯化ES细胞，流式细胞仪检测DON对细胞周期的影响。④用DON作用胚胎干细胞后，提取RNA，应用人全基因组长寡核苷酸基因表达谱芯片，测定DON对胚胎干细胞基因表达谱的改变，通过聚类分析对样本进行分组，并经Go分析软件对差异表达基因的生物学功能进行基因分类和注释基因的功能。通过KEGG Pathway分析有显著差异的信号传导通路。 　　研究结论：①DON导致胎鼠多发性骨骼畸形，以椎体畸形最多，其次为四肢畸形。DON具有胚胎发育毒性，导致活胎数、产仔数和胎鼠体重均较低。②DON致小鼠胚胎畸形骨骼基因表达谱的改变，在小鼠全基因组表达谱芯片上筛选到差异表达基因972条，其中下调455条，上调 517条。这些变化的差异基因与生物过程相关的占32.22%，分子功能占35.11%，细胞组分占32.68%。绝大多数变化的基因与细胞调节、信号传导、生物调节、发育过程、结合等有关。③DON致小鼠胚胎畸形骨骼差异表达基因的通路改变，其中，在筛选的972个差异表达基因中，涉及多条通路。这些通路多为氨基酸代谢类、核糖体、P53 、内吞作用、钙离子信号通路、Wnt通路等。④DON对小鼠胚胎干细胞有明显的毒性作用。抑制细胞增殖和细胞活性，主要抑制细胞增殖周期的S期。⑤DON对人胚胎干细胞基因表达有一定的影响。涉及与胚胎和骨骼发育密切相关的下调基因有： ZNF688、 DHCR24、DLL1、 UFD1L等；上调基因有：FOXM1、 HOXA11 、 LSR、 MIB1 等。涉及与骨骼发育相关的通路为P53、MAPK 、Wnt 信号通路、Ca离子通路等。