课题来源与背景： 　　本课题《新的无饲养层法培养人胚胎干细胞》经海南省科技厅立项于2007.01～2008.12实施。 　　研究目的与意义： 　　胚胎干细胞作为全能干细胞在医学领域具有重要的研究意义，在制药、生物发育研究、细胞退行性疾病治疗和组织细胞工程等有广泛的应用前景。 　　主要论点与论据： 　　以饲养细胞为经典的胚胎干细胞培养方法十分复杂，且难以标准化，形成对胚胎干细胞研究的制约。为探索和简化胚胎干细胞培养与维持，以利于稳定胚胎干细胞相关的研究工作。 　　创见与创新： 　　利用-20度致死的混合饲养层（胎鼠成纤维细胞+人包皮成纤维细胞）遗留于皿底的细胞基质，再辅以混合条件培养基（胎鼠成纤维细胞+人包皮成纤维细胞），能够很好地支持人胚胎干细胞的传代与培养，其效果稳定，克隆形态好。用此方法顺利将胚干细胞传代至20代。经免疫细胞化学、体外全能性分析、畸胎瘤、核型分析及RT-PCR等方法检测，证明人检测胎干细胞仍保持着胚胎干细胞特有的未分化状态。试验结果表明新的培养方案被成功建立。 　　社会经济效益，存在的问题： 　　本研究将去探索建立一种全新的人胚胎干细胞无饲养层培养方案，国内外尚不见任何相关报道。此种方法具有廉价、简便及容易操作等优点，方法一旦建立就可以在国内外的胚胎干细胞传代培养中进行广泛使用。而且，由于饲养层细胞（MEF或HFF）分泌的细胞基质种类有限，如果在使用常规的hES细胞培养基时也能很好地维持人胚胎干细胞的传代与培养，那么我们就可以通过分析饲养层细胞分泌的细胞基质成分来找一条或几条全新的维持hES细胞未分化状态的信号通道来，这又将为人胚胎干细胞的研究开辟一条新的思路。

　　课题来源与背景： 　　本课题《新的无饲养层法培养人胚胎干细胞》经海南省科技厅立项于2007.01～2008.12实施。 　　研究目的与意义： 　　胚胎干细胞作为全能干细胞在医学领域具有重要的研究意义，在制药、生物发育研究、细胞退行性疾病治疗和组织细胞工程等有广泛的应用前景。 　　主要论点与论据： 　　以饲养细胞为经典的胚胎干细胞培养方法十分复杂，且难以标准化，形成对胚胎干细胞研究的制约。为探索和简化胚胎干细胞培养与维持，以利于稳定胚胎干细胞相关的研究工作。 　　创见与创新： 　　利用-20度致死的混合饲养层（胎鼠成纤维细胞+人包皮成纤维细胞）遗留于皿底的细胞基质，再辅以混合条件培养基（胎鼠成纤维细胞+人包皮成纤维细胞），能够很好地支持人胚胎干细胞的传代与培养，其效果稳定，克隆形态好。用此方法顺利将胚干细胞传代至20代。经免疫细胞化学、体外全能性分析、畸胎瘤、核型分析及RT-PCR等方法检测，证明人检测胎干细胞仍保持着胚胎干细胞特有的未分化状态。试验结果表明新的培养方案被成功建立。 　　社会经济效益，存在的问题： 　　本研究将去探索建立一种全新的人胚胎干细胞无饲养层培养方案，国内外尚不见任何相关报道。此种方法具有廉价、简便及容易操作等优点，方法一旦建立就可以在国内外的胚胎干细胞传代培养中进行广泛使用。而且，由于饲养层细胞（MEF或HFF）分泌的细胞基质种类有限，如果在使用常规的hES细胞培养基时也能很好地维持人胚胎干细胞的传代与培养，那么我们就可以通过分析饲养层细胞分泌的细胞基质成分来找一条或几条全新的维持hES细胞未分化状态的信号通道来，这又将为人胚胎干细胞的研究开辟一条新的思路。