本项目系统筛选了ABO、Rh、H、Kidd血型系统的罕见表型，并对筛选出的罕见表型标本进行了系统的分子生物学研究，建立了基因诊断技术和转染分析技术，发现了多个新的等位基因和多个突变点，同时采用冷冻技术成功长期保存了罕见表型血液。 　　项目实施情况如下。 　　⑴建立了高通量的ABO、Rh、Kidd、H血型抗原筛选技术，并对献血人群的意外抗体进行了检测，获得了相应的罕见表型。 　　⑵利用罕见表型的血清学和生物化学特异性，准确鉴定了JK（a-b-）、类孟买型、ABO亚型和RhD弱D和部分D表型等表型。 　　⑶部分样本进行了家系分析。 　　⑷分析了ABO、H、Rh和Kidd血型系统罕见表型的分子机理。 　　⑸进行了ABO基因遗传多态性和5|端非编码区序列分析。 　　⑹进行了FUT1 682G+35T等位基因的体外表达研究。 　　⑺根据其分子机理建立相应的基因诊断技术。 　　⑻建立了罕见表型冰冻库及其应用。 　　项目完成了技术目标，取得了一系列创新： 　　⑴在国内首次建立了高通量ABO、Rh、Kidd、H血型抗原筛选技术，明确了ABO亚型、意外抗体、H和Kidd血型的检出频率。 　　⑵系统进行ABO血型罕见表型分子机制研究，发现了7个ABO新等位基因A208、A210、A211、B305、B307、BW12、cisAB05，在国内首次建立ABO基因全部外显子测序技术。 　　⑶系统建立了H血型系统FUT1测序技术，发现2个新的等位基因FUT1 682G和FUT1 293T，首次明确 FUT1 35T不是引起类孟买型的原因。 　　⑷首次在体外表达FUT1 682G+35T等位基因的研究，成功证实复合突变型质粒（682G+35T）H抗原表达量和mRNA水平下降。 　　⑸系统对Rh血型系统变异体进行分子机制，发现3个新的弱D等位基因和1个新的部分D等位基因（86G＞A），首次在国内明确DVI type Ⅲ表型的分子机制。 　　⑹系统筛选Kidd血型系统罕见表型的分子机制，首次建立了SLC14A1基因的外显子扩增条件和测序方法，明确Jk(a-b-)机制。 　　⑺系统分析了ABO基因遗传多态性分析，首次明确人群中等位基因分布情况，发现3个新的等位基因B112、CisAB06和O61。 　　⑻首次系统分析ABO基因5|端非编码区（包括外显子1和部分内含子1序列），发现20个多态性，11个为新的多态性位点。 　　⑼首次建立FUT1 293C＞T的PCR-SSP、FUT1 547-552delAG的PCR-SSP和Genescan、FUT1 682A＞G的PCR-SSP、FUT1 658C＞T的PCR-SSP、FUT1 35C＞T的PCR-RFLP、ABO基因721C＞T的PCR-SSP和ABO基因278C＞T的PCR-SSP、RHD 10个外显子的PCR-SSP、D VI type Ⅲ型的PCR-SSP和PCR-RFLP、Del（RHD1227G＞A）PCR-SSP、RHD基因合子型PCR-SSP。 　　⑽系统冰冻保存了JK(a-b-)以及类孟买型血液等罕见表型血液。 　　研究成果为黑龙江、辽宁、广东、河北等省的疑难标本提供实验方法，在临床使用冰冻保存Rh阴性红细胞965单位，所有输注均取得了良好的效果。发表论文12篇，其中SCI论文3篇，国内刊物5篇，会议论文2篇，待发表2篇，为浙江大学培养硕士研究生2名。 　　通过本项目建立的方法，在浙江人群中筛选到各类罕见表型，并对采集的血液进行冷冻长期保存，建立罕见表型检索数据库，这对于提高稀有血型血液的应急能力具有重要的意义，可在极短的时间内为稀有血型患者找到相合血液，将有利地提高了血液的应急能力和血液安全，提高人民的生活水平，造福浙江人民，具有较好的社会和经济效益。

　　本项目系统筛选了ABO、Rh、H、Kidd血型系统的罕见表型，并对筛选出的罕见表型标本进行了系统的分子生物学研究，建立了基因诊断技术和转染分析技术，发现了多个新的等位基因和多个突变点，同时采用冷冻技术成功长期保存了罕见表型血液。 　　项目实施情况如下。 　　⑴建立了高通量的ABO、Rh、Kidd、H血型抗原筛选技术，并对献血人群的意外抗体进行了检测，获得了相应的罕见表型。 　　⑵利用罕见表型的血清学和生物化学特异性，准确鉴定了JK（a-b-）、类孟买型、ABO亚型和RhD弱D和部分D表型等表型。 　　⑶部分样本进行了家系分析。 　　⑷分析了ABO、H、Rh和Kidd血型系统罕见表型的分子机理。 　　⑸进行了ABO基因遗传多态性和5|端非编码区序列分析。 　　⑹进行了FUT1 682G+35T等位基因的体外表达研究。 　　⑺根据其分子机理建立相应的基因诊断技术。 　　⑻建立了罕见表型冰冻库及其应用。 　　项目完成了技术目标，取得了一系列创新： 　　⑴在国内首次建立了高通量ABO、Rh、Kidd、H血型抗原筛选技术，明确了ABO亚型、意外抗体、H和Kidd血型的检出频率。 　　⑵系统进行ABO血型罕见表型分子机制研究，发现了7个ABO新等位基因A208、A210、A211、B305、B307、BW12、cisAB05，在国内首次建立ABO基因全部外显子测序技术。 　　⑶系统建立了H血型系统FUT1测序技术，发现2个新的等位基因FUT1 682G和FUT1 293T，首次明确 FUT1 35T不是引起类孟买型的原因。 　　⑷首次在体外表达FUT1 682G+35T等位基因的研究，成功证实复合突变型质粒（682G+35T）H抗原表达量和mRNA水平下降。 　　⑸系统对Rh血型系统变异体进行分子机制，发现3个新的弱D等位基因和1个新的部分D等位基因（86G＞A），首次在国内明确DVI type Ⅲ表型的分子机制。 　　⑹系统筛选Kidd血型系统罕见表型的分子机制，首次建立了SLC14A1基因的外显子扩增条件和测序方法，明确Jk(a-b-)机制。 　　⑺系统分析了ABO基因遗传多态性分析，首次明确人群中等位基因分布情况，发现3个新的等位基因B112、CisAB06和O61。 　　⑻首次系统分析ABO基因5|端非编码区（包括外显子1和部分内含子1序列），发现20个多态性，11个为新的多态性位点。 　　⑼首次建立FUT1 293C＞T的PCR-SSP、FUT1 547-552delAG的PCR-SSP和Genescan、FUT1 682A＞G的PCR-SSP、FUT1 658C＞T的PCR-SSP、FUT1 35C＞T的PCR-RFLP、ABO基因721C＞T的PCR-SSP和ABO基因278C＞T的PCR-SSP、RHD 10个外显子的PCR-SSP、D VI type Ⅲ型的PCR-SSP和PCR-RFLP、Del（RHD1227G＞A）PCR-SSP、RHD基因合子型PCR-SSP。 　　⑽系统冰冻保存了JK(a-b-)以及类孟买型血液等罕见表型血液。 　　研究成果为黑龙江、辽宁、广东、河北等省的疑难标本提供实验方法，在临床使用冰冻保存Rh阴性红细胞965单位，所有输注均取得了良好的效果。发表论文12篇，其中SCI论文3篇，国内刊物5篇，会议论文2篇，待发表2篇，为浙江大学培养硕士研究生2名。 　　通过本项目建立的方法，在浙江人群中筛选到各类罕见表型，并对采集的血液进行冷冻长期保存，建立罕见表型检索数据库，这对于提高稀有血型血液的应急能力具有重要的意义，可在极短的时间内为稀有血型患者找到相合血液，将有利地提高了血液的应急能力和血液安全，提高人民的生活水平，造福浙江人民，具有较好的社会和经济效益。