本项目我们研究浙江汉族人群MICA基因分布情况，并分析其与HLA-B基因的连锁情况，通过体外载入MICA cDNA构建表达载体，筛选和体外表达获取了不同的MICA等位基因表达的抗原，建立了液相芯片技术检测MICA抗体方法。这些研究将有助于研究不同人群MICA区域序列多态性特征，分析不同人群间MICA基因变化规律，探索MICA DNA多态性形成的可能分子机制，将为进一步研究MICA的功能作用提供基础资料，有助于MICA与疾病的关联性研究。 　　项目实施情况如下： 　　⑴测序方法研究浙江汉族人群MICA基因遗传多态性，建立了MICA2-6外显子测序方法，验证了MICA*019序列，获得了浙江汉族人群中MICA等位基因分布情况，发现MICA*Del。 　　⑵建立了MICA基因在大肠杆菌中的克隆与表达技术，获得了MICA重组蛋白。 　　⑶建立了液态蛋白芯片法检测MICA抗体技术，证实人群中存在MICA抗体。 　　项目完成了技术目标，建立了一系列的关键技术： 　　⑴系统建立了MICA 2-6外显子测序方法； 　　⑵建立了GeneScan技术检测5外显子方法； 　　⑶建立了PCR-SSP检测MICA缺失型等位基因方法； 　　⑷建立了MICA等位基因的cDNA扩增技术； 　　⑸建立了MICA基因体外重组原核表达体系和重组蛋白的纯化方法； 　　⑹利用实验室重组的MICA抗原，建立液态蛋白芯片法检测MICA抗体技术。 　　取得了一系列创新： 　　⑴系统建立了MICA 2-6外显子测序方法、GeneScan技术检测5号外显子方法、PCR-SSP检测MICA缺失型等位基因方法、MICA等位基因的cDNA扩增技术，获得了浙江汉族人群MICA基因遗传多态性数据和常见等位基因分布，在等位基因水平获取了MICA-HLA-B和MICA-STR-HLA-B连锁遗传数据。证实中国人群中存在MICA等位基因缺失，并与HLA-B*4801关联。 　　⑵建立了MICA基因体外重组原核表达体系和重组蛋白的纯化方法。获取了常见MICA等位基因MICA*008和MICA*002表达的蛋白。 　　⑶建立液态蛋白芯片法检测MICA抗体技术，证实PRA标本中存在MICA抗体。 　　已发表论文6篇，其中正式刊物4篇（SCI收录），会议论文1篇，研究生毕业论文1篇。待发表论文1篇。培养硕士研究生1名。

　　本项目我们研究浙江汉族人群MICA基因分布情况，并分析其与HLA-B基因的连锁情况，通过体外载入MICA cDNA构建表达载体，筛选和体外表达获取了不同的MICA等位基因表达的抗原，建立了液相芯片技术检测MICA抗体方法。这些研究将有助于研究不同人群MICA区域序列多态性特征，分析不同人群间MICA基因变化规律，探索MICA DNA多态性形成的可能分子机制，将为进一步研究MICA的功能作用提供基础资料，有助于MICA与疾病的关联性研究。 　　项目实施情况如下： 　　⑴测序方法研究浙江汉族人群MICA基因遗传多态性，建立了MICA2-6外显子测序方法，验证了MICA*019序列，获得了浙江汉族人群中MICA等位基因分布情况，发现MICA*Del。 　　⑵建立了MICA基因在大肠杆菌中的克隆与表达技术，获得了MICA重组蛋白。 　　⑶建立了液态蛋白芯片法检测MICA抗体技术，证实人群中存在MICA抗体。 　　项目完成了技术目标，建立了一系列的关键技术： 　　⑴系统建立了MICA 2-6外显子测序方法； 　　⑵建立了GeneScan技术检测5外显子方法； 　　⑶建立了PCR-SSP检测MICA缺失型等位基因方法； 　　⑷建立了MICA等位基因的cDNA扩增技术； 　　⑸建立了MICA基因体外重组原核表达体系和重组蛋白的纯化方法； 　　⑹利用实验室重组的MICA抗原，建立液态蛋白芯片法检测MICA抗体技术。 　　取得了一系列创新： 　　⑴系统建立了MICA 2-6外显子测序方法、GeneScan技术检测5号外显子方法、PCR-SSP检测MICA缺失型等位基因方法、MICA等位基因的cDNA扩增技术，获得了浙江汉族人群MICA基因遗传多态性数据和常见等位基因分布，在等位基因水平获取了MICA-HLA-B和MICA-STR-HLA-B连锁遗传数据。证实中国人群中存在MICA等位基因缺失，并与HLA-B*4801关联。 　　⑵建立了MICA基因体外重组原核表达体系和重组蛋白的纯化方法。获取了常见MICA等位基因MICA*008和MICA*002表达的蛋白。 　　⑶建立液态蛋白芯片法检测MICA抗体技术，证实PRA标本中存在MICA抗体。 　　已发表论文6篇，其中正式刊物4篇（SCI收录），会议论文1篇，研究生毕业论文1篇。待发表论文1篇。培养硕士研究生1名。