温敏型水凝胶生物支架负载Lingo-1 shRNA促进脊髓损伤修复的研究

成果基本信息
关键词：	脊髓损伤;Lingo-1 shRNA;水凝胶
成果类别：		技术成熟度：
体现形式（基础理论类）：		体现形式（应用技术类）：	无
成果登记号：	粤科成登2字20180411	资源采集日期：	2019-04-15

研究情况
单位名称：	中山大学	技术水平：
评价证书号：		评价单位：	国家自然科学基金委员会
评价日期：	2016.01.06	评价证书号：

转化情况
转让范围：		推广形式：	无
已转让企业数（个）：	0

联系方式
联系人（平台）：	玉女士	联系人（平台）电话：	0771-5885053
*成果单位详细联系方式请登录会员；还不是会员，马上注册!

成果简介
课题来源与背景：本课题来源于国家自然科学基金，脊髓损伤轴突再生的困难是由于局部产生的髓鞘抑制因子抑制轴突再生。本课题组前期工作表明，温敏型水凝胶在大鼠脊髓损伤模型中具轴突生长的生物支架和局部递送负载药物的作用。基于髓鞘抑制因子是通NR1/lingo-1/p75（or Troy）信号复合物介导的信号通路激活RhoA抑制轴突再生，而Lingo-1 是该信号复合物发挥活性的基础，在该信号通路起关键作用。　　技术原理及性能指标：本课题组成功构建慢病毒载体介导Lingo-1-shRNA拮抗Lingo-1基因，在建立全横断脊髓损伤模型成功后，即刻体内拟采用温敏型水凝胶负载Lingo-1-shRNA协同修复脊髓损伤，使慢病毒Lingo-1-shRNA被水凝胶包裹而定位植入作用于损伤局部，达到在水凝胶植入同时局部为Lingo-1-shRNA慢病毒有效转染浓度要求，持续释放，有效将siRNA传递到目标细胞内，转染细胞。同时研究应用温敏型水凝胶生物支架负载递送Lingo-1-shRNA促进脊髓损伤修复的可行性和优越性，探讨Lingo-1-shRNA对轴突再生的影响和机制。发现动物脊髓损伤后，局部注射温敏型水凝胶生物支架负载递送Lingo-1-shRNA能够显著改善脊髓损伤后运动功能和脊髓诱发电位的恢复。通过免疫荧光检测显示水凝胶负载Lingo-1-shRNA能够显著提高损伤局部靶细胞的有效转染，PCR和WB结果显示能够明显减少损伤区域组织细胞Lingo-1及RhoA的基因表达水平，TUNEL染色显示损伤后细胞的凋亡水平明显被抑制，组织学染色显示水凝胶负载Lingo-1-shRNA能够显著促进损伤区轴突的再生及神经通路的发生，进而修补脊髓空洞面积。　　技术的创造性与先进性：该课题证明生物支架负载RNA干扰沉默特定基因促进脊髓损伤神经修复的可行性和优越性，有望解决在活体内局部应用RNA干扰Lingo-1基因表达进而促进轴突再生修复的难题，为脊髓损伤修复提供新的方法与思路。　　技术的成熟程度，适用范围和安全性：本课题的研究成果具有较大的临床转化能力，主要应用于脊髓损伤修复，动物实验表明安全性良好，有潜在的经济效益和良好的社会效益。　　应用方面情况及存在的问题：利用脊髓损伤模型首次对体内 RNA 干扰 Lingo-1 基因对神经轴突再生的影响进行研究，从而为将来临床应用打下实验基础；还可应用温敏型水凝胶递送 Lingo-1 RNAi，即实现生物支架负载 RNAi分子药物局部定位治疗以修复脊髓损伤，证明了生物支架负载 RNA 干扰沉默特定基因促进脊髓损伤神经修复的可行性和优越性，为其更广泛的应用奠定了基础。在此项研究的基础上，可以进一步研发促进脊髓损伤修复的新型生物材料和载药技术，为后续相关研究打下了良好的基础。但是本课题制作的是全横断脊髓损伤模型，在临床工作中大多数脊髓损伤属于钝挫伤。

成果名称：	温敏型水凝胶生物支架负载Lingo-1 shRNA促进脊髓损伤修复的研究	关键词：	脊髓损伤;Lingo-1 shRNA;水凝胶
成果类别：		一级分类名称：	医学生物工程
二级分类名称：		三级分类名称：
研究起止时间：	2012.01 至2015.12	成果体现形式（应用技术类）：	无
成果属性：		成果体现形式（基础理论类）：
技术成熟度：		技术水平：
研究形式：		学科分类1：
单位名称：	中山大学	学科分类2：	320.27
中图分类号1：		所属高新技术类别：
中图分类号2：	R651.2	课题来源：
应用行业：		课题立项名称：
国家科技计划子类别：		课题立项编号：	81171711
经费实际投入额（万元）：	60.00	评价单位：	国家自然科学基金委员会
评价形式：	无	应用状态：	无
评价日期：	2016.01.06	转让范围：
评价证书号：		推荐单位：	广东省教育厅
推广形式：	无	成果登记号：	粤科成登2字20180411
成果简介：	课题来源与背景：本课题来源于国家自然科学基金，脊髓损伤轴突再生的困难是由于局部产生的髓鞘抑制因子抑制轴突再生。本课题组前期工作表明，温敏型水凝胶在大鼠脊髓损伤模型中具轴突生长的生物支架和局部递送负载药物的作用。基于髓鞘抑制因子是通NR1/lingo-1/p75（or Troy）信号复合物介导的信号通路激活RhoA抑制轴突再生，而Lingo-1 是该信号复合物发挥活性的基础，在该信号通路起关键作用。　　技术原理及性能指标：本课题组成功构建慢病毒载体介导Lingo-1-shRNA拮抗Lingo-1基因，在建立全横断脊髓损伤模型成功后，即刻体内拟采用温敏型水凝胶负载Lingo-1-shRNA协同修复脊髓损伤，使慢病毒Lingo-1-shRNA被水凝胶包裹而定位植入作用于损伤局部，达到在水凝胶植入同时局部为Lingo-1-shRNA慢病毒有效转染浓度要求，持续释放，有效将siRNA传递到目标细胞内，转染细胞。同时研究应用温敏型水凝胶生物支架负载递送Lingo-1-shRNA促进脊髓损伤修复的可行性和优越性，探讨Lingo-1-shRNA对轴突再生的影响和机制。发现动物脊髓损伤后，局部注射温敏型水凝胶生物支架负载递送Lingo-1-shRNA能够显著改善脊髓损伤后运动功能和脊髓诱发电位的恢复。通过免疫荧光检测显示水凝胶负载Lingo-1-shRNA能够显著提高损伤局部靶细胞的有效转染，PCR和WB结果显示能够明显减少损伤区域组织细胞Lingo-1及RhoA的基因表达水平，TUNEL染色显示损伤后细胞的凋亡水平明显被抑制，组织学染色显示水凝胶负载Lingo-1-shRNA能够显著促进损伤区轴突的再生及神经通路的发生，进而修补脊髓空洞面积。　　技术的创造性与先进性：该课题证明生物支架负载RNA干扰沉默特定基因促进脊髓损伤神经修复的可行性和优越性，有望解决在活体内局部应用RNA干扰Lingo-1基因表达进而促进轴突再生修复的难题，为脊髓损伤修复提供新的方法与思路。　　技术的成熟程度，适用范围和安全性：本课题的研究成果具有较大的临床转化能力，主要应用于脊髓损伤修复，动物实验表明安全性良好，有潜在的经济效益和良好的社会效益。　　应用方面情况及存在的问题：利用脊髓损伤模型首次对体内 RNA 干扰 Lingo-1 基因对神经轴突再生的影响进行研究，从而为将来临床应用打下实验基础；还可应用温敏型水凝胶递送 Lingo-1 RNAi，即实现生物支架负载 RNAi分子药物局部定位治疗以修复脊髓损伤，证明了生物支架负载 RNA 干扰沉默特定基因促进脊髓损伤神经修复的可行性和优越性，为其更广泛的应用奠定了基础。在此项研究的基础上，可以进一步研发促进脊髓损伤修复的新型生物材料和载药技术，为后续相关研究打下了良好的基础。但是本课题制作的是全横断脊髓损伤模型，在临床工作中大多数脊髓损伤属于钝挫伤。
联系人：	王晓松	成果登记日期：	2018-10-25
联系人email：	kjcjcka@mail.sysu.edu.cn	单位代码：	94400164
邮政编码222：	510275	联系人电话：	020-84111595
单位传真：	020-84037549	单位通讯地址：	广东省广州市海珠区新港西路135号
单位所在省市：		单位电话：	020-84111596;84113871
转让收入（万元）：	0	单位属性：
合作完成单位：		已转让企业数（个）：	0
成果发布年份：	2018	知识产权形式：
成果完成人：		资源采集日期：	2019-04-15

温敏型水凝胶生物支架负载Lingo-1 shRNA促进脊髓损伤修复的研究

最新科技新闻资讯

热门资讯排行

最新科技图文资讯

友情链接