方法： 体外分离培养小鼠BMSCs和RTECs，通过流式细胞术检测BMSCs CD29、CD45、CD34、ClassII等膜蛋白和免疫组化检测BMSCs和RTECs CK18、Vimentin和α-SMA等标志性蛋白的表达进行细胞鉴定。采用带有微孔的培养皿建立分层非接触共培养体系，BMSCs培养在下层，RTECs培养在上层，通过微孔建立细胞间的信息传导。在培养液中分别加入黄芪、川芎注射液或碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等不同诱导物质，流式细胞和免疫组化技术检测共培养后的BMSCs和RTECs CD29、CD45、CD34、Class II以及CK18、Vimentin和α-SMA等标志蛋白，定量PCR检测CK18、Vimentin和α-SMA相应的基因表达；通过检测BMSCs Endothelin、Angiotensin基因表达和尿素氮、尿酸等研究不同诱导剂干预后BMSCs的分泌和转运功能。另外通过无创伤动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉的方法建立肾脏急性缺血再灌注（AIRI）模型，培养RTECs，检测并比较正常和急肾衰小鼠的RTECs与BMSCs共培养微环境对BMSCs定向分化的影响。 结果： 1.分离培养的小鼠正常BMSCs CD29呈阳性表达，CD45、CD34、Class II呈阴性表达，不表达RTECs特异性标志蛋白CK18，Vimentin和α-SMA呈阳性表达；正常RTECs CK18呈阳性表达，Vimentin和α-SMA呈阴性表达。 2.BMSCs与RTECs共培养可诱导BMSCs表达CK18增加，Vimentin和α-SMA表达降低，CD45、CD34、Class II等表达上调。 3.黄芪注射液促进CD34表达的作用最为显著，而bFGF则可显著降低CD29表达。 4.共培养后的BMSCs尿素氮转运作用无显著改变，而尿酸转运功能明显提高，bFGF诱导组最为明显。 5.共培养后的BMSCs Endothelin、Angiotensin基因表达明显增加。 6.急肾衰小鼠RTECs与BMSCs共培养对BMSCs的定向分化作用与正常小鼠RTECs无显著性差异。 结论： 1.采用贴壁细胞分离的方法，在体外成功建立了BMSCs培养体系，经流式细胞术检测CD29阳性标记出现单峰，CD34、CD45、Class II均表达阴性，3-5次传代细胞膜蛋白表达亦无显著性差异；免疫细胞化学染色显示BMSCs的CK表达呈弱阳性，而Vimintin及α-SMA的表达呈强阳性。表明培养的细胞为BMSCs。 2.小鼠原代肾小管上皮细胞培养方法可行性强，通过免疫细胞化学染色显示RTEC的CK表达呈强阳性，Vimintin及α-SMA的表达呈弱阳性。符合RTEC的特征。 3.采用无创伤动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉的方法建立肾脏AIRI模型成功，鼠血清Scr、BUN与正常组相比有明显升高；肾组织病理符合急性肾小管坏死病理改变。 4.通过体外RTECs非接触性共培养模拟肾小管上皮分化微环境，诱导BMSCs向RTECs分化具有一定的可行性，但诱导后的细胞在形态和功能方面与成熟的肾小管上皮细胞还存在一定的差异。 5.bFGF和黄芪注射液对BMSCs体外与RTECs非接触性共培养后，诱导BMSCs向RTECs分化具有一定的促进作用，尤以bFGF为明显，而川芎干预后则未见有促进作用。 6.体外AIRI模型鼠原代RTECs和BMSCs共培养与正常RTECs和BMSCs共培养相比在诱导BMSCs转分化为RTECs方面并无优势。 本项研究将为BMSCs应用于肾脏疾病的治疗提供理论依据和技术基础，使得BMSCs走向临床成为可能，实现其应有的医疗作用。

方法： 体外分离培养小鼠BMSCs和RTECs，通过流式细胞术检测BMSCs CD29、CD45、CD34、ClassII等膜蛋白和免疫组化检测BMSCs和RTECs CK18、Vimentin和α-SMA等标志性蛋白的表达进行细胞鉴定。采用带有微孔的培养皿建立分层非接触共培养体系，BMSCs培养在下层，RTECs培养在上层，通过微孔建立细胞间的信息传导。在培养液中分别加入黄芪、川芎注射液或碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等不同诱导物质，流式细胞和免疫组化技术检测共培养后的BMSCs和RTECs CD29、CD45、CD34、Class II以及CK18、Vimentin和α-SMA等标志蛋白，定量PCR检测CK18、Vimentin和α-SMA相应的基因表达；通过检测BMSCs Endothelin、Angiotensin基因表达和尿素氮、尿酸等研究不同诱导剂干预后BMSCs的分泌和转运功能。另外通过无创伤动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉的方法建立肾脏急性缺血再灌注（AIRI）模型，培养RTECs，检测并比较正常和急肾衰小鼠的RTECs与BMSCs共培养微环境对BMSCs定向分化的影响。 结果： 1.分离培养的小鼠正常BMSCs CD29呈阳性表达，CD45、CD34、Class II呈阴性表达，不表达RTECs特异性标志蛋白CK18，Vimentin和α-SMA呈阳性表达；正常RTECs CK18呈阳性表达，Vimentin和α-SMA呈阴性表达。 2.BMSCs与RTECs共培养可诱导BMSCs表达CK18增加，Vimentin和α-SMA表达降低，CD45、CD34、Class II等表达上调。 3.黄芪注射液促进CD34表达的作用最为显著，而bFGF则可显著降低CD29表达。 4.共培养后的BMSCs尿素氮转运作用无显著改变，而尿酸转运功能明显提高，bFGF诱导组最为明显。 5.共培养后的BMSCs Endothelin、Angiotensin基因表达明显增加。 6.急肾衰小鼠RTECs与BMSCs共培养对BMSCs的定向分化作用与正常小鼠RTECs无显著性差异。 结论： 1.采用贴壁细胞分离的方法，在体外成功建立了BMSCs培养体系，经流式细胞术检测CD29阳性标记出现单峰，CD34、CD45、Class II均表达阴性，3-5次传代细胞膜蛋白表达亦无显著性差异；免疫细胞化学染色显示BMSCs的CK表达呈弱阳性，而Vimintin及α-SMA的表达呈强阳性。表明培养的细胞为BMSCs。 2.小鼠原代肾小管上皮细胞培养方法可行性强，通过免疫细胞化学染色显示RTEC的CK表达呈强阳性，Vimintin及α-SMA的表达呈弱阳性。符合RTEC的特征。 3.采用无创伤动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉的方法建立肾脏AIRI模型成功，鼠血清Scr、BUN与正常组相比有明显升高；肾组织病理符合急性肾小管坏死病理改变。 4.通过体外RTECs非接触性共培养模拟肾小管上皮分化微环境，诱导BMSCs向RTECs分化具有一定的可行性，但诱导后的细胞在形态和功能方面与成熟的肾小管上皮细胞还存在一定的差异。 5.bFGF和黄芪注射液对BMSCs体外与RTECs非接触性共培养后，诱导BMSCs向RTECs分化具有一定的促进作用，尤以bFGF为明显，而川芎干预后则未见有促进作用。 6.体外AIRI模型鼠原代RTECs和BMSCs共培养与正常RTECs和BMSCs共培养相比在诱导BMSCs转分化为RTECs方面并无优势。 本项研究将为BMSCs应用于肾脏疾病的治疗提供理论依据和技术基础，使得BMSCs走向临床成为可能，实现其应有的医疗作用。