本课题由国家自然科学基金（30672114）“脊髓源神经干细胞与运动神经元差异蛋白组的研究”支助。脊髓损伤所致的功能丧失长期以来是困扰医学界的一大难题，近年来随着神经干细胞的发现和逐步了解，人们开始希望能通过神经干细胞来治疗脊髓损伤。现今对于神经干细胞蛋白质组的研究为数不多，而且人们多趋向于比较神经干细胞与其分化后所得细胞之间蛋白质组的差异。分化所得的神经细胞与成体中成熟的神经元有着相同的标志物，但就其功能而言与成熟神经元的差异依然很大。因此对于神经干细胞与成熟神经元差异蛋白质组的研究十分必要。 在本研究中，神经干细胞和运动神经元来自胚胎脊髓同一个体的组织，这使得二者的比较更具有生物学统计意义；通过2D-DIGE与HPLC-ESI-MS/MS联合应用，寻找出脊髓源神经干细胞与运动神经元的差异蛋白组；并用Real-time PCR对部分差异蛋白进行了验证分析，所得结果显示Real-time PCR结果与差异蛋白组学研究结果一致；通过在PubMed和Gene Ontology数据库中的检索，获得这些差异表达蛋白所参与的生物过程，发现其均与各自细胞的特性相适应，同时也从理论上解释了造成这种差异的原因。这些差异蛋白为今后神经干细胞向运动神经元的定向分化提供了目标。同时在今后可以对这些差异蛋白的调控因素做进一步的深入研究，这些调控水平的研究结果就可以为定向诱导分化提供了新的靶标。 创新点： ①理论创新：首次着眼于神经干细胞与目的细胞间的差异蛋白组，从蛋白水平对神经干细胞和运动神经元间的差异进行了分析，并解释造成这种差异的蛋白基础。 ②技术创新：创新性地应用Dynal公司的磁珠体系来分离纯化运动神经元，获得了可以满足双向电泳研究的高纯度的运动神经元；并将同一个体的剩余细胞用作脊髓源神经干细胞的分离培养，这样，所得的脊髓源神经干细胞和运动神经元来自于同一批个体，使得二者的比较更具有生物学上的统计意义。 存在的问题及改进意见：建议后续研究从基因调控水平着手，验证基因水平与蛋白水平表达的一致性，同时对差异性蛋白进行功能性鉴定。

本课题由国家自然科学基金（30672114）“脊髓源神经干细胞与运动神经元差异蛋白组的研究”支助。脊髓损伤所致的功能丧失长期以来是困扰医学界的一大难题，近年来随着神经干细胞的发现和逐步了解，人们开始希望能通过神经干细胞来治疗脊髓损伤。现今对于神经干细胞蛋白质组的研究为数不多，而且人们多趋向于比较神经干细胞与其分化后所得细胞之间蛋白质组的差异。分化所得的神经细胞与成体中成熟的神经元有着相同的标志物，但就其功能而言与成熟神经元的差异依然很大。因此对于神经干细胞与成熟神经元差异蛋白质组的研究十分必要。 在本研究中，神经干细胞和运动神经元来自胚胎脊髓同一个体的组织，这使得二者的比较更具有生物学统计意义；通过2D-DIGE与HPLC-ESI-MS/MS联合应用，寻找出脊髓源神经干细胞与运动神经元的差异蛋白组；并用Real-time PCR对部分差异蛋白进行了验证分析，所得结果显示Real-time PCR结果与差异蛋白组学研究结果一致；通过在PubMed和Gene Ontology数据库中的检索，获得这些差异表达蛋白所参与的生物过程，发现其均与各自细胞的特性相适应，同时也从理论上解释了造成这种差异的原因。这些差异蛋白为今后神经干细胞向运动神经元的定向分化提供了目标。同时在今后可以对这些差异蛋白的调控因素做进一步的深入研究，这些调控水平的研究结果就可以为定向诱导分化提供了新的靶标。 创新点： ①理论创新：首次着眼于神经干细胞与目的细胞间的差异蛋白组，从蛋白水平对神经干细胞和运动神经元间的差异进行了分析，并解释造成这种差异的蛋白基础。 ②技术创新：创新性地应用Dynal公司的磁珠体系来分离纯化运动神经元，获得了可以满足双向电泳研究的高纯度的运动神经元；并将同一个体的剩余细胞用作脊髓源神经干细胞的分离培养，这样，所得的脊髓源神经干细胞和运动神经元来自于同一批个体，使得二者的比较更具有生物学上的统计意义。 存在的问题及改进意见：建议后续研究从基因调控水平着手，验证基因水平与蛋白水平表达的一致性，同时对差异性蛋白进行功能性鉴定。